肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用制造技术

本发明专利技术公开了肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，属于医药技术领域。本发明专利技术首次发现肌醇与氟苯尼考的联合使用能极大提高氟苯尼考对两种代表性革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌‑‑嗜水气单胞菌和无乳链球菌的抗菌能力，注射或口服这两种组合物能提高鱼体嗜水气单胞菌感染的治疗效果，大幅增加鱼体存活率。因此，本发明专利技术提供的肌醇可用作水产养殖抗菌药物氟苯尼考的增效剂，当肌醇与氟苯尼考应用制备复方抗菌药剂时，既可提高抗菌药物药效，又可大幅减少药物的使用量，进而减少药物的毒副作用和药物残留。

Application of inositol as florfenicol synergist

The invention discloses the application of inositol as florfenicol synergist, belonging to the technical field of medicine. The present invention first discovery of inositol and florfenicol combined test can greatly improve the antibacterial ability of florfenicol on two representative gram negative and gram positive bacteria Aeromonas hydrophila and Streptococcus agalactiae, injection or oral administration of these two kinds of compositions can enhance fish Aeromonas hydrophila infection the treatment effect, increase the survival rate of fish. Therefore, the invention provides the inositol can be used as aquaculture antibiotic florfenicol as synergist, inositol and florfenicol used to prepare compound antibacterial agent, can improve the drug efficacy, and can significantly reduce the amount of drug use, thereby reducing the side effects of drugs and drug residues.

【技术实现步骤摘要】
肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及肌醇作为水产养殖抗菌药物氟苯尼考增效剂的应用。
技术介绍
嗜水气单胞菌在河流、湖泊、池塘、食物、动物及人体等自然环境中广泛存在。嗜水气单胞菌属于条件性致病菌，可引起多种水生动物和陆生动物患病，是一种典型的人-畜-鱼共患病病原菌，当环境条件恶劣，机体抵抗力下降可导致鱼类、两栖类、爬行类等冷血动物和哺乳动物发病，引发水生动物细菌性出血病、体表溃疡症以及哺乳动物腹泻等，是鱼类、爬行类和人类的一种致命传染源。链球菌为典型的条件致病菌，平常生存于养殖水体及底泥中。在富营养化或养殖自身污染较为严重的水域中，此菌能长期生存，当养殖鱼体抵抗力降低时，易引起疾病。该病的发生与养殖密度大、换水率低、饵料鲜度差及投饵量大密切相关。链球菌不仅能影响海水养殖鱼类，同时影响半咸水及淡水养殖鳗鲡、香鱼、虹鳟斑点叉尾鮰和罗非鱼等，其具有感染宿主广、传染性强和死亡率高等特点，给水产养殖业造成巨大损失。为了预防和治疗病原菌引起的疾病，在水产养殖疾病防治中多采用抗生素的治疗方法，而长期大量使用或滥用抗生素导致养殖环境中细菌多重耐药、交叉耐药现象严重，这些耐药菌的出现给水产动物疾病防治带来极大的困难，也带来了更大的生态风险。因此，针对水产养殖过程中各种病原微生物的爆发，采用新的策略和方法控制水产动物病原菌的感染十分重要。面对这一形势，开发一种新的药物防治策略，以提高防治效果、降低嗜水气单胞菌耐药性和避免抗菌药物的残留问题，促进水产养殖业的健康和可持续发展具有极大的应用前景。氟苯尼考（florfenicol）为甲砜霉素的单氟衍生物，又称氟甲砜霉素，是一种新型广谱高效抗菌药物，自20世纪90年代初开始应用于水产养殖。该药抗菌谱类似于氯霉素，通过抑制肽酰基转移酶活性而产生广谱抑菌作用，抗菌谱广，包括各种革兰氏阳性、阴性菌和支原体等。氟苯尼考以其广谱、高效、吸收迅速、分布广泛、安全和动物专用等特点，在国内外畜牧和水产上迅速获得广泛应用。欧盟和美国应用CUAPM-Ⅱ及LC-MS确检，对氯霉素类药物（包括氟苯尼考及氟苯尼考胺）的多残留检测限可低至0.1ng/g。因此，在具有相同杀菌效果的情况下，在水产养殖中提高氟苯尼考的抗菌活性，大幅减少药物使用量，降低药物残留，对水产养殖、食品安全和生态环境保护具有十分重要的意义。肌醇在化学上可看作是环己烷的多元烃基衍生物，广泛分布在动物和植物体内，是动物、微生物的生长因子。肌醇是一种“生物活素”，参与体内的新陈代谢活动，具有免疫、预防和治疗某些疾病等多种作用。在发酵和食品工业中，可用于多种菌种的培养和促进酵母的增长等，许多保健饮料和儿童食品都加有微量肌醇。肌醇还是肠内某些微生物的生长因子，在其它维生素缺乏时，它能刺激所缺乏维生素的微生物合成维生素。实践证明，水生动物饲料中加入肌醇，可促进生长和防止死亡，在对虾及鱼类饲料中，肌醇添加量通常为300-500mg/kg，否则将出现肌醇缺乏症。肌醇在医药、化工、食品和饲料等领域具有较大的市场开发潜力。但肌醇作为抗菌药物增效剂的研究尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，肌醇与氟苯尼考联合使用能够大幅度增强氟苯尼考的杀菌效果，提高鱼体感染细菌后的存活率，为水产养殖过程中氟苯尼考的使用提供了一种新方法，肌醇与氟苯尼考的联合使用能够大幅度降低抗生素的使用量，同时提高鱼体对细菌感染的防治水平。本专利技术为实现上述目的采用如下技术方案：肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，其特征在于：通过肌醇与氟苯尼考的联合使用以增强水产养殖抗菌药物氟苯尼考的药效，进而减少氟苯尼考的用药量。进一步优选，所述的肌醇与氟苯尼考的重量比为0.56-180:1。进一步优选，所述的肌醇作为增效剂用于增加氟苯尼考在体外杀灭细菌的能力。进一步优选，所述的肌醇作为增效剂用于增加氟苯尼考在体内清除细菌的能力。进一步优选，所述的肌醇作为增效剂用于与氟苯尼考联合使用以提高鱼体感染细菌的存活率。进一步优选，所述的细菌为嗜水气单胞菌或无乳链球菌。本专利技术经体外、体内实验证实，肌醇能够增强氟苯尼考的杀菌效果；其联合运用能提高鱼体嗜水气单胞菌感染的治疗效果，大幅增加鱼体存活率。在水产养殖业病原菌耐药性日趋普遍、耐药程度日趋严重的情况下，大幅度降低抗菌药物氟苯尼考的使用量，同时提高抗菌药物氟苯尼考的防治效果，有助于无公害水产养殖技术的推广。附图说明图1是肌醇添加前后不同浓度氟苯尼考作用后的细菌存活率图；图2是不同剂量肌醇联合氟苯尼考作用后的细菌存活率图；图3是肌醇协同氟苯尼考杀菌作用的时间依赖关系图；图4是肌醇联合氟苯尼考作用后淇河鲫肝脏、脾和肾脏中嗜水气单胞菌的含量图；图5是肌醇联合氟苯尼考作用后淇河鲫肝脏、脾和肾脏中无乳链球菌的含量图；图6是细菌攻毒后注射肌醇或/和氟苯尼考对鱼体的保护作用对比图；图7是细菌攻毒后口服肌醇或/和氟苯尼考对鱼体的保护作用对比图。具体实施方式以下通过实施例对本专利技术的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1肌醇增加氟苯尼考在体外杀灭细菌的能力1、细菌培养与生存率体外实验方法（1）挑取嗜水气单胞菌或无乳链球菌单菌落接种于100mLLB培养基中，28℃振荡培养过夜；（2）取适量的菌液于12000rpm、5min离心收集菌体，用质量浓度为0.85%的生理盐水洗涤菌体2次，悬浮于含10mM乙酸钠的M9培养基中，调OD600值至0.6；（3）加入相应的代谢物和适量的抗生素于试管中，加M9培养基至5mL体系，28℃培养6h；（4）在特定的时间点，取100uL样品，采用系列稀释法，取10uL进行点板计数，计算细菌cfu/mL（菌落形成单位/毫升）。不经过抗生素和代谢物处理的样品作为起始细菌数，细菌菌落数在20-200的数据可用于统计分析。细菌存活率（percentsurvival）是抗生素和代谢物处理后的细菌cfu与起始细菌cfu的百分比。2、肌醇在提高氟苯尼考杀菌效果方面具有抗生素浓度依赖效应氟苯尼考对嗜水气单胞菌的MIC值为5μg/mL，设置抗生素浓度梯度依次为20、40、80、120、160和200μg/mL，生存率试验结果见图1。从图中可以看出氟苯尼考浓度从20μg/mL开始有较明显杀菌效果，随着浓度增加杀菌效果越来越明显，细菌存活率呈梯度下降。在上述浓度条件下，添加20mM肌醇协同抗生素的杀菌有了明显的增强，细菌存活率分别为22.1%、7.6%、1.9%、0.57%、0.13%、0.039%，与不添加肌醇的对照组相比，协同杀菌的倍数分别为3.6、5.1、12.2、26.5、55.9、146.7倍，说明肌醇能够作为氟苯尼考的增效剂。3、肌醇在提高氟苯尼考杀菌效果方面具有物质剂量依赖效应选择细菌存活率在50%左右的抗生素浓度，进一步探讨肌醇物质梯度的作用效果。结果发现，0.625mM的肌醇也明显提高氟苯尼考的杀菌作用。对嗜水气单胞菌来说，在40μg/mL氟苯尼考条件下，0.625-20mM的肌醇提高杀菌倍数为1.2、1.6、3、4.2、8.6和11.8倍。在80μg/mL氟苯尼考条件下，0.625-20mM的肌醇提本文档来自技高网...

【技术保护点】
肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用。

【技术特征摘要】
1.肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用。2.根据权利要求1所述的肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，其特征在于：通过肌醇与氟苯尼考的联合使用以增强水产养殖抗菌药物氟苯尼考的药效，进而减少氟苯尼考的用药量。3.根据权利要求1或2所述的肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，其特征在于：所述的肌醇与氟苯尼考的重量比为0.56-180:1。4.根据权利要求1所述的肌醇作为氟苯尼考增效剂的应用，其特征在于：所述的肌醇作为增效剂用于增加...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵贤亮，孔祥会，李莉，陈鹤，钟科珂，杨潇，巴新霞，
申请(专利权)人：河南师范大学，
类型：发明
国别省市：河南,41