当前位置: 首页 > 专利查询>于辉专利>正文

同时检测三种气单胞菌的多重PCR引物组及探针和检测方法技术

技术编号:13053463 阅读:97 留言:0更新日期:2016-03-23 17:17
同时检测三种气单胞菌的多重PCR引物组及探针和检测方法,公开了一种能同时快速检测嗜水气单胞菌(AH)、维氏气单胞菌(AV)和舒伯特气单胞菌(AS)的检测方法及其使用的引物组和探针。该检测方法的特征为使用三对特异性引物和三条核酸探针能够区分高同源性的上述三种气单胞菌,且能在同一管反应体系中同时检测和加以辨别。利用本发明专利技术的引物探针和检测方法能快速检测这三种人畜共患病病原菌,具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点;能够及时发现和确诊可疑病例,提高对该类病原的监测水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测
,尤其涉及同时检测三种气单胞菌的多重PCR引物 组及探针和检测方法。
技术介绍
我国是世界上的水产养殖大国,然而,病害损失严重制约着水产养殖业的健康可 持续发展。嗜水气单胞菌(AeromonasHydrophila,简称AH)、维氏气单胞菌(Aeromonas Veronii,简称AV)和舒伯特气单胞菌(AeromonasSchubertii,简称AS)是流行于我国的致 病性气单胞菌,由这三种病原菌引发的疾病不仅给水产养殖业带来严重的经济损失,还可 通过水产动物和水产品感染人畜,导致人畜腹泻和食物中毒。针对主要致病菌株建立准确 可靠的检测技术对于传染病的防控工作具有重要意义。 气单胞菌的检测技术经历了从传统的分离鉴定法、免疫检测技术,到分子生物学 方法的转变。李晨等(2010年)报道了针对鳗弧菌、嗜水气单胞菌以及迟缓爱德华氏菌多 重PCR检测方法。刘春等人(2014年)报道了针对鳢源致病性舒伯特气单胞菌的双重PCR 检测方法。由于气单胞菌属成员之间基因同源性高,普通PCR检测方法难以区别。余波等人 (2014年)报道了一种检测大鲵致病性嗜水本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时检测三种气单胞菌的多重PCR检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)从被检测动物的组织或者微生物培养液中提取DNA;(2)以步骤(1)中提取的DNA为模板和三对特异性引物与三条TaqMan探针进行多重荧光定量PCR检测;(3)根据检测后的特异性S扩增曲线和循环值进行结果判断,获得检测结果;其中步骤(2)中的三对特异性引物与三条TaqMan探针如下:嗜水气单胞菌上游引物AH‑F:5’‑GGCAGAGCCCGTCTATCCA‑3’(SEQ ID NO:1),或者为该序列的核酸互补序列;嗜水气单胞菌下游引物AH‑R:5’‑GCGATACTTGTCGCCACAGA‑3’(SEQ ID NO:...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:杨映李华于辉
申请(专利权)人:于辉
类型:发明
国别省市:广东;44

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1