用于癌转移的诊断、预后和治疗的方法技术

本研究，除了设计患有癌症，特别地乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌和甲状腺癌的受试者的定制疗法以外，还描述了基于其表达受c-MAF表达的升高调节的一个或多个基因的表达水平的测定来测定患有癌症的受试者发生转移的可能性的方法。其还描述了用于基于诱导c-MAF表达的调节鉴定具有对转移癌的倾向的标志基因的方法，和最终PTHLH和PODXL抑制剂以及RERG激活剂在治疗和/或预防癌症，特别地乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌和甲状腺癌中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】 本专利技术的目的 本专利技术除了用于产生用于患有癌症，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌或甲状腺 癌的受试者的定制疗法的方法外，还涉及确定受试者患癌症，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、 肾癌或甲状腺癌，将发展转移癌的可能性的方法。此类方法由测定一组其表达与c-MAF基因 表达相关的基因的表达水平组成。本专利技术还包括PTHLH和P0DXL抑制剂以及RERG激活剂在治 疗和/或预防的转移癌，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌或甲状腺癌中的用途。 专利技术背景 乳腺癌是是全世界第二大癌症类型（10.4% ;排在肺癌之后)和第五大癌症引起的 死亡原因（排在肺癌、胃癌、肝癌和结肠癌后）。乳腺癌是妇女最常见的死亡原因吗？在2005 年，乳腺癌在全世界导致502，000例死亡（7 %的癌症相关死亡;几乎1 %的所有死亡人数）。 全球病例的数目从1970年代以来显著增加，这种现象部分地归咎于西方世界的现代生活方 式。 所有细胞在其表面上、细胞质和细胞核中具有受体。某些化学信使诸如激素结合 这些受体，并且这导致细胞的变化。3个主要受体可影响乳腺癌细胞:雌激素受体(ER)、孕酮 受体(PR)和HER2/neu。为了命名含有这些受体之一的细胞，当受体存在时使用正号，当其不 存在时使用负号：ER阳性(ER+)、ER阴性(ER-)、PR+ (阳性）、PR阴性(PR-)、HER2+(阳性）和 HER2阴性(HER2)。受体状态已成为所有乳腺癌形式的重要评估，因为其决定特定治疗诸如 他莫昔芬或曲妥珠单抗的使用适合性。雌激素受体(ER)的α同种型在约65%的经诊断的乳 腺癌病例中过表达。该类型的乳腺癌被称为"ER-阳性"（ER+)。在该病例中，雌激素与ER的结 合促进癌细胞哺乳动物细胞的增殖。癌性ER+细胞高度依赖于该刺激来扩散，这是ER目前用 作治疗靶的原因。 具有实体瘤的癌症患者的大多数死亡是由晚期转移引起的事实使得理解使得肿 瘤能够转移的分子和细胞机制至关重要。最近的公开案除了举例说明转移性细胞类型如何 展示对某些器官的向性以外，还举例说明转移是如何由对其知之甚少的复杂机制引起的。 这些组织特异性转移细胞具有一系列获得的功能，所述功能使得它们能够定殖在特定器官 中。 专利申请ΕΡ1961825-Α1描述了用于预测转移性乳腺癌至骨、肺、肝和脑中出现的 方法，其由确定相对于对照样品中的对应表达水平癌性组织样品中一个或多个标志物(包 括c-MAF)的表达水平组成。此外，该文献要求同时确定几个基因以确定乳腺癌患者的存活 期，并且基因标签预测无骨转移存活期的能力之间的关系在统计上是不显著的。 Bos，P. D .，等人描述参与乳腺癌至脑转移的基因。 专利申请US2005/0181375描述用于基于许多在转移性肿瘤(特别是转移至脑的肿 瘤）中被上调或下调的基因的表达水平的检测来检测转移性乳腺癌的方法。国际专利申请W02010/000907描述了用作乳腺癌患者的远处转移的基因组预测者 的遗传标志。然而，存在对诊断和/或预测患有特定乳腺癌诸如ER-或ER+乳腺癌的患者是否将 发生转移，从而允许对患有所述癌症的受试者使用适当疗法的遗传标志物的现有技术水平 需要。新的预后因子的鉴定将用作选择最适当的治疗的指导。 专利技术概述 本专利技术的作者已鉴定了其表达因 c-MAF基因的表达的变化而在乳腺癌样品中增加 或减少的一组基因。通过功能获得实验和相关临床数据，作者已确认了这些基因基因的作 用，特别是其表达与c-MAF的表达反相关的RERG基因的作用，以及其表达与c-MAF表达直接 相关的PTHLH和P0DXL基因的作用，诸如ER+乳腺癌转移至骨的预后标志物。 因此，在第一方面，本专利技术涉及用于预测受试者的转移癌，特别是乳腺癌、结肠癌、 肺癌、肾癌和甲状腺癌，尤其是乳腺癌的体外方法，其由测定一个或多个其表达响应所述肿 瘤的C-MAF表达水平的升高而被调节的基因在癌组织样品中的表达水平组成，其中相对于 标准值的上述一个或多个基因的改变的表达水平是发生转移癌的高风险的指征。 本专利技术的第二方面涉及用于产生用于患有癌症，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾 癌或甲状腺癌，尤其是乳腺癌的受试者的定制疗法的体外方法，其由测定一个或多个其表 达响应所述肿瘤的c-MAF表达水平的升高而被调节的基因在癌组织样品中的表达水平组 成，其中上述一个或多个基因相对于标准值的改变的表达水平是所述受试者容易接受旨在 防止转移的疗法的高风险的指征。 本专利技术的第三方面涉及抑制基因的表达或该基因的表达产物的活性的试剂用于 制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防转移癌，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌 或甲状腺癌，尤其是乳腺癌，其中所述基因的特点在于其在肿瘤性细胞(特别是乳腺癌细 胞、结肠癌细胞、肺癌细胞、肾癌细胞和甲状腺细胞，尤其是乳腺癌细胞）中的表达响应这些 细胞中的c-MAF表达水平的升高而增加，或响应这些细胞中的c-MAF表达水平的降低而减少 的事实。 本专利技术的第四方面涉及刺激刺激基因的表达或该基因的表达产物的活性的试剂 用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防转移癌，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、 肾癌和甲状腺癌，尤其是乳腺癌，其中所述基因的特征在于其在肿瘤性细胞(特别是乳腺癌 细胞、结肠癌细胞、肺癌细胞、肾癌细胞和甲状腺细胞，尤其是乳腺癌细胞）中的表达响应这 些细胞中的c-MAF表达水平的升高而增加，或响应这些细胞中的c-MAF表达水平的降低而减 少的事实。 本专利技术的最终方面涉及用于鉴定患有癌症，特别是乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌或 甲状腺癌，尤其是乳腺癌的受试者中的标志基因的体外方法，所述方法包括： ⑴原发癌(特别是乳腺癌)肿瘤样品中的候选者和c-MAF基因的表达水平的测定， 和 (ii)测定癌细胞，特别是乳腺癌细胞的群体中的所述候选基因的表达水平响应C- MAF基因表达的调节的变化 其中所述基因的表达水平与原发癌(特别是乳腺癌)肿瘤样品中的c-MAF表达在统 计上显著相关，并且响应c-MAF基因表达的调节的表达的变化与所述基因的水平的变化在 统计上显著相关，是所述基因为受试者发生转移的倾向性的标志物的指征。 附图简述图1.(A)增加的（左)或减少的（右)MBP基因与ER+乳腺癌患者中的骨转移的表型的 关联性（"GSEA"算法）。(B)增加的（左)或减少的（右)MBP基因与源自原发性乳腺癌肿瘤的一 系列至骨、肺、肝和脑的转移中的骨转移的表型的关联性（"GSEA"算法）。对于至肺、脑和肝 的转移已进行相同的对增加的基因的逼近。 图2. (A)使用适度转移的（亲代)ER+、MCF7乳腺癌细胞以及对骨是高度转移的其衍 生物(B〇M2)在异种移植类型的实验性小鼠模型中进行的转移病灶的Ki-67表达水平、增殖 标志物的分析。（B)使用定量RT-PCR进行的MAF表达与RERG基因之间的关系的验证。（C)使用 具有或不具有MAF的B〇M2细胞在小鼠中进行的骨转移。通过免疫组织化学定量Ki-67信号和 半胱天冬酶-3活性。（D)在对骨是高度转移的细胞中诱导了增加的RERG。将具有RERG表达的 细胞衍生物注射进小鼠的左心室，并使用生物发光成像技术现场和实时分析骨的定殖以验 证在MAF存在的情本文档来自技高网...

【技术保护点】
预测受试者的乳腺癌转移的体外方法，其包括测定一个或多个基因在获自所述受试者的肿瘤组织的样品中的表达水平，所述基因的表达响应于c‑MAF在所述肿瘤中的表达水平的升高而被调节，其中所述一个或多个基因相对于参照值的改变的表达水平表示转移发生的高风险。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·戈米斯，A·阿诺尔，M·塔拉戈纳，M·帕夫罗维奇，E·普拉尼特，
申请(专利权)人：生物医学研究机构基金会，卡塔兰研究和高级研究院，
类型：发明
国别省市：西班牙;ES