杀鲑气单胞菌活疫苗制剂和冻干疫苗制品的制备方法及应用技术

技术编号:11385851 阅读:230 留言:0更新日期:2015-05-01 13:36
杀鲑气单胞菌活疫苗制剂和冻干疫苗制品的制备方法及应用,属于渔用细菌性基因缺失减毒活疫苗技术领域。其包括一株杀鲑气单胞菌野生毒株的无标记基因缺失减毒突变菌株HTAsf-5307,以及通过该菌株制备的杀鲑气单胞菌活疫苗、制备方法和应用。本发明专利技术提供的杀鲑气单胞菌减毒活疫苗株因缺失了杀鲑气单胞菌毒株的芳香族氨基酸合成相关基因的部分片段,和部分三型分泌相关编码基因的部分片段,相对于其野生毒株具有明显的低毒性和产品安全性,同时,可有效地保护免疫鱼免受杀鲑气单胞菌致病毒株的侵害。该活疫苗免疫效果显著,在实际应用中能很好地防治杀鲑气单胞菌引发的病害。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种杀鲑气单胞菌活疫苗制剂和冻干疫苗制品的制备方法及应用,具体涉及基于一种杀鲑气单胞菌无标记基因缺失减毒突变株的制剂及应用,该疫苗株主要用于由杀鲑气单胞菌引发的鱼类疥疮病的免疫防治,属于水产养殖动物病害免疫防控领域,具体属于渔用细菌性基因缺失减毒活疫苗

技术介绍
杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)属于气单胞菌科(Aeromonadaceae)气单胞菌属(Aeromonas),是一种革兰氏阴性短杆菌,最适生长温度为18~22℃。由杀鲑气单胞菌引起的疖疮病(Furuneulosis)是鲑科鱼类养殖业的重大病害(Janda J.M. et al., 2010, Clin Microbiol Rev, 23:35-73.),严重影响了世界范围内以大西洋鲑(Salmo salar)为代表的鲑鱼类养殖业的健康发展,是海水鱼类养殖业中最为重大的风险之一,世界动物卫生组织(World Organisation for Animal Health,OIE)将其列为重点疫病目录。除此该菌还能感染绝大部分其他鲑鳟鱼类,如,太平洋鲑(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株杀鲑气单胞菌野生毒株的无标记基因缺失减毒突变菌株HTAsf‑5307,分类命名为Aeromonas salmonicida,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2014年10月29日,保藏编号为:CCTCC M 2014527。

【技术特征摘要】
1. 一株杀鲑气单胞菌野生毒株的无标记基因缺失减毒突变菌株HTAsf-5307,分类命名为Aeromonas salmonicida,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2014年10月29日,保藏编号为:CCTCC M 2014527。
2.如权利要求1所述杀鲑气单胞菌野生毒株的无标记基因缺失减毒突变菌株,其特征是:其缺失了杀鲑气单胞菌野生毒株的芳香族氨基酸合成基因aroC的部分片段,具体如SEQ ID NO.1所示;和Ⅲ型分泌系统编码基因aopN、acr1及ascN的部分片段,具体如SEQ ID NO.2所示。
3.权利要求1所述菌株制备的杀鲑气单胞菌活疫苗,其特征是:包括疫苗发酵培养液,和疫苗发酵培养液经冻干后得到的冻干疫苗。
4.如权利要求3所述杀鲑气单胞菌活疫苗,其特征是:所述冻干疫苗冻干前,即疫苗发酵培养液是含有活菌的磷酸缓冲液,活菌的含量为45-80亿/毫升。
5.权利要求3所述杀鲑气单胞菌活疫苗制剂,其特征是:将所述冻干疫苗和在药理上可接受的配体复配后得到杀鲑气单胞菌活疫苗制剂,其菌体细胞浓度为104~108CFU/mL。
6.如权利要求5所述杀鲑气单胞菌活疫苗制剂,其特征是:所述药理上可接受的配体为无菌生理盐水;无菌生理盐水配方为:NaCl 9g/L,pH为6.5-8.0。
7.权利要求3所述杀鲑气单胞菌活疫苗的制备方法,其特征是步骤为: 
疫苗发酵培养液的制备:用接种环挑取保存于TSA培养基上减毒突变株,接种于装有液体LB或...

【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人
申请(专利权)人:江苏海健前沿生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1