用于选择高效表达重组细胞系的方法技术

本发明专利技术涉及一种使用表达载体来选择高效表达重组细胞系的方法，表达载体包括：(i)包括以失活方式连接到多聚腺苷酸化信号的选择性标记基因的基因表达盒；以及(ii)编码以活性方式连接到多聚腺苷酸化信号的目标重组蛋白的基因表达盒。根据本发明专利技术的方法可用现有细胞系选择方法中等于或少于1/10的细胞群选出高产量细胞克隆。具体说来，与增加甲氨蝶呤量及包括多个扩增相的常规相基因扩增策略相比较，本发明专利技术的方法使用较低密度的甲氨蝶呤来选择高产量细胞克隆，以缩短细胞系的发育时间。本发明专利技术的方法使得在使用除甲氨蝶呤外的一般选择性标记基因时，实现高效地产生蛋白质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种选择高效表达相关蛋白质的细胞系(下文中称为“高产量克隆”) 的方法，更具体说来，涉及通过使用表达载体来选择高产量克隆的方法，所述表达载体包括(i)包括以不可操作方式连接到多聚腺苷酸化信号(POlyA)的选择性标记基因的基因表达盒；以及(ii)编码相关重组蛋白并且以可操作方式连接到多聚腺苷酸化信号的基因表达盒；并且涉及所述表达载体。
技术介绍
在生物学或医学领域中，通过将欲产生的相关蛋白质的基因插入表达载体中，将表达载体转染到产生这种蛋白质的细胞系中，大量培养所得细胞系，并使用适合的方法分离和纯化培养的细胞系，以此获得相关蛋白质。工业上用于此目的的方法的实例包含使用二氢叶酸还原酶(dhfndihydrofolate reductase)中国仓鼠卵巢(CHO，Chinese hamster ovary)(-)细胞系、CHO Kl 细胞系、幼仓鼠肾(BHK, Baby Hamster Kidney)细胞系、NSO细胞系、SP2/0细胞系和人细胞系的方法(奥格塔(Ogata)等人，应用微生物学与生物技术(Appl. Microbiol. Biotechnol.), 199本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种通过使用表达载体来选择高产量克隆的方法，所述表达载体包括：（ｉ）包括以不可操作方式连接到多聚腺苷酸化信号的选择性标记基因的基因表达盒；以及（ｉｉ）编码相关重组蛋白并且以可操作方式连接到多聚腺苷酸化信号的基因表达盒。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：曺明三，张珉硕，金锺黙，李炫周，宋侑哲，金满洙，
申请(专利权)人：株式会社斯特利恩，
类型：发明
国别省市：KR