细胞转核诱导体细胞成多能二倍体干细胞的方法技术

本发明专利技术公开了一种通过ESC细胞与哺乳动物体细胞融合而形成用于自体移植的、多潜能、二倍体ESL细胞的方法，包括如下步骤：a.提供ESC；b.废除ESC中的DNA复制能力；c.将非复制ESC与多个体细胞混合；d.通过向其中加入聚乙二醇，将非复制ESC和体细胞融合；e.将已融合细胞倒置悬滴培养，以生产聚集细胞；f.在稀释的琼脂糖凝胶上混悬培养聚集细胞，以生产EB，持续1-10代；g.在饲养细胞、涂层板和皿、或者在补充了生长因子的适宜培养基中的基质胶上培养EB；而且，h.选择具有与干细胞相同形态学特征并且包含哺乳动物特异性二倍体ESL细胞的、患者特异性ESL细胞的细胞集落。通过本发明专利技术的细胞转核诱导，成功使体细胞再生为多能二倍体干细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及再生细胞的方法以及这些被再生细胞的人类临床和兽医的应用，更具体地说，涉及通过。所述的再生方法还适用于哺乳动物的器官和身体。
技术介绍
老化是生命不可避免的过程。老化是一种有害的、进行性、普遍性且因而不可逆的变化综合症。细胞的老化特征在于减少细胞的功能、降低对应激响应的能力、增加了体内稳态的失衡以及增加了患疾病的风险。因此，老化本身可被视作“疾病过程”，并且是对大分子、细胞、组织和器官损伤的积聚。细胞的老化由运行于个体寿命始终的生物钟调节，依赖于影响负责维护、修复和防御响应的系统的基因表达的变化。老化与在DNA复制过程中细胞分裂期间的端粒变短相关。老化是由累积突变和损伤而加速的，从大分子(DNA，RNA，蛋白质，碳水化合物和脂质) 到组织，通过自由基、糖化、辐射、交联剂等而引起的。目前已确定了在老化过程中的多种基因途径。这些途径的其中一种涉及基因 Sir2, 一种NAD+-依赖性组蛋白脱乙酰基酶。额外拷贝的Sir2能够延长蠕虫和蝇类的寿命。 人类似物SIRTl蛋白已被证实为脱乙酰p53、Ku70、特异性组蛋白残基和叉头家族的转录因子。超氧化物歧化酶，一种防止线粒体自由基本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种通过ＥＳＣ与哺乳动物个体的体细胞融合而形成用于自体移植的、多潜能二倍体ＥＳＬ细胞的方法，该方法包括：ａ．提供ＥＳＣ；ｂ．废除ＥＳＣ的ＤＮＡ复制能力；ｃ．将非复制的ＥＳＣ与多个体细胞混合；ｄ．通过向其中加入聚乙二醇，将所述非复制ＥＳＣ和所述体细胞融合；ｅ．倒置液滴培养经融合的细胞，以产生聚集的细胞；ｆ．在稀释的琼脂糖凝胶上将所述聚集的细胞混悬培养１－１０代，以产生拟胚体（ＥＢ）；和ｇ．在饲养细胞上或者在涂层板和皿上或者在补充了生长因子的适宜培养基的基质胶上培养ＥＢ；和ｈ．选择具有干细胞典型形态并且包含哺乳动物个体特异性二倍体ＥＳＬ细胞的细胞集落。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：胡继繁，李陶，姜舒，胡祥，
申请(专利权)人：深圳市北科生物科技有限公司，胡继繁，
类型：发明
国别省市：94