一种复合酶法制备茶树菇水解液的方法技术

本发明专利技术涉及一种复合酶法制备茶树菇水解液的方法，其步骤包括：1)将茶树菇子实体洗净，破碎，打浆；2)按茶树菇与水的比例为1∶2-1∶5加水调浆；3)第一次酶解：再加入由纤维素酶，木聚糖酶、β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶和几丁质酶组成的复合酶I，加量为茶树菇原料的0.05％-0.3％，在45-55℃条件下酶解2-4小时，4)第二次酶解：加入复合酶II，在50-60℃条件下酶解2-4小时，5)将酶解液煮沸灭酶，6)吸附，过滤、浓缩制成透明的水解液。本发明专利技术利用复合生物酶制剂制取茶树菇水解液，可充分发挥复合酶的协同增效作用，并采取分段加工工艺，最大限度地使茶树菇中的生物活性物质释放出来。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物提取领域，尤其是。
技术介绍
茶树菇(Agrocybe aegerita)又叫茶薪菇、杨树菇、柱状田头菇、柳松茸等，是一种被人们称为“菇中珍品”的食用菌，享有“中华神菇”，“神仙菇”之称，属于真菌界、担子菌门、层菌纲、伞菌目、粪锈伞科、田蘑属，民间常用于多种常见病、多发病的防治，晒干后可治疗头晕、头痛、呕吐及小儿低烧、老人气喘等症，现代医学研究证明，可滋阴壮阳，对肾虚、尿频、水肿、癌症、高血压、早衰及小儿低热、尿床等都有较理想的辅助治疗功能。这些功能来自于茶树菇中的多种生物活性物质，而茶树菇多糖就是其中的主要成分。目前提取茶树菇多糖的方法包括水提、微波及超声波辅助提取法，这些方法耗费大量的能量，而且多糖的提取率较低，酶制剂作为一类绿色食品添加剂，用于改善食品品质和食品制造工艺已经越来越普遍。从早期的酿造、发酵食品开始，食品用酶已广泛应用到各种食品上。随着生物科技进展，不断研究、开发出新的酶制剂，已成为当今新的食品原料开发、品质改良、工艺改造的重要环节。首先，酶制剂本身具有安全性，酶源于自然界中的生命体，如微生物、植物、动物； 其次，酶不会残留在食品中，酶有催化化学反应的功能，具有专一性高，无副产物生成的特点，酶制剂在食品加工过程中只是起加速反应的作用，反应完钝化后变成一个蛋白颗粒，因此，不会在最终产品里检测出来；第三，酶的反应条件温和，对营养物质损伤低，可以保证食品的营养。由此可见，在食品加工过程中应用酶制剂是非常安全的，可以替代那些对人体有害的物质，或者把有害的物质转化为无害，降低食品不安全因素，另外，酶制剂还具有缩短生产过程、用量少、绿色、安全、高效等优点。据检索，现有的提取方法包括单一提取法和由单一提取法组成的几种组合法提取茶树菇多糖，但是目前的提取方法提取效率都较低，提取后酶活力不高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种酶解完全、多糖含量高的复合酶法制备茶树菇水解液的方法。本专利技术实现目的的技术方案如下，方法和步骤如下(1)将茶树菇粉碎，调浆，煮沸灭菌，得浆液；(2)第一次酶解加水调整浆液的浓度，使干茶树菇原料与水的kg L比为 1 15-25，调节其PH值，使PH值在4.5-6，加入复合酶I，复合酶I的质量为干茶树菇质量的0. 05% -0. 3%，在45-55°C条件下，酶解2-4小时，得到第一次酶解液；其中，复合酶I由纤维素酶木聚糖酶β-葡聚糖酶甘露聚糖酶几丁质酶 =1:1:1:1:1-1:2:2:2:5 组成；(3)第二次酶解加水调整第一次酶解液的浓度，使干茶树菇原料与酶解液的 kg L比值为1 25-35，调节pH值，使pH值在3.0-6. 0，加入占干茶树菇重量0. 1-0. 3% 的复合酶II，在50-60°C条件下，酶解2-4小时，得到第二次酶解液；其中，复合酶II由果胶酶蛋白酶脂肪酶=1 1 1-1 4 6组成；(4)将第二次酶解液煮沸灭酶，加重量百分比为0. 5% -1%吸附剂吸附，过滤、浓缩制成茶树菇水解液。而且，所述pH调节剂为食用级柠檬酸或稀盐酸。而且，所述步骤(4)的吸附剂为活性炭。而且，所述复合酶I中纤维素酶木聚糖酶β-葡聚糖酶甘露聚糖酶几丁质酶=1.5 1.5 2 2 3或纤维素酶木聚糖酶β-葡聚糖酶甘露聚糖酶几丁质酶=3:3:4:4:6。而且，所述复合酶II中果胶酶蛋白酶脂肪酶=2 2.5 3或果胶酶蛋白酶脂肪酶=4:5:6。本专利技术的优点和积极效果如下1、本专利技术利用复合酶在较温和的条件下将细胞组织分解，加速有效成分的释放， 从而提高生物活性物质得率，利用二次酶解法，使细胞中的多糖得到充分溶出，解决了一次酶解中生物活性物质提取率低的弊端，使茶树菇中的多糖更加充分的被溶出，有效提高多糖的含量。2、本专利技术将纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、几丁质酶以及蛋白酶、果胶酶、脂肪酶组成的两种复合酶用于活性物质的提取，以去除细胞壁和细胞膜上的果胶、纤维素及蛋白质等成分，使得细胞顺利破裂，有利于促进胞内活性物质的溶出，达到提高提取率、缩短提取时间、减少能耗和有效保存生物活性的目的，然而由于加酶提取会提高生产成本，在添加量上需严格控制。3、本专利技术采用酸性及中性酶水解茶树菇，在整个反应过程中无须加入大量碱，因此在提取后得到的茶树菇多糖中含盐量极少，不用再脱盐，减少操作步骤，降低生产成本。4、本专利技术利用复合生物酶制剂制取茶树菇水解液，可充分发挥复合酶的协同增效作用，并采取分段加工工艺，最大限度地使茶树菇中的生物活性物质释放出来。附图说明图1为本专利技术实施例的工艺流程图。 具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术的
技术实现思路
做进一步说明；下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本专利技术的保护范围。以下实施例所述的纤维素酶、木聚糖酶、β -葡聚糖酶、甘露聚糖酶、几丁质酶、脂肪酶、果胶酶和蛋白酶均为市售产品。实施例1，步骤如下(1)将Ikg干茶树菇洗净，粉碎成80目，按照茶树菇与水的重量比例为1 2加水调浆，煮沸15分钟灭菌，得浆液； (2)第一次酶解首先，加水调整浆液的浓度，使干茶树菇原料的重量与水的比为1 20 (kg L)，Ikg茶树菇中加入20L水，再采用食用级柠檬酸或稀盐酸调节其pH值，使 PH值在4. 5，然后，加入复合酶I，在45-55°C条件下，酶解3小时，温度调节可采用水浴加热器，酶解在慢速搅拌状态下进行，得到第一次酶解液； 其中，复合酶I由纤维素酶1. 5g，木聚糖酶1. 5g，β -葡聚糖酶2g，甘露聚糖酶2g， 几丁质酶3g组成，酶的活力以80万单位/克计，其中，纤维素酶木聚糖酶β-葡聚糖酶甘露聚糖酶几丁质酶的推荐重量百分比为1:1:1:1:1-1:2:2:2:5， 本实施例的比例为1.5 1.5 2 2 3。(3)第二次酶解首先，加水调整第一次酶解液的浓度，使干茶树菇的重量与酶解液的体积为1 30(kg L)，补充水分至30L，再采用食用级柠檬酸或稀盐酸调节pH值，使 PH值在5. 0左右，然后，加入复合酶II，在55°C条件下，酶解2. 5小时，得到第二次酶解液；复合酶II由果胶酶2g，蛋白酶2. 5g，脂肪酶3g组成，酶的活力以80万单位/克计，其中，果胶酶蛋白酶脂肪酶的推荐比例为1 :1:1-1:4: 6，本事实例的比例为2· 2 · 5 · 3 ο(4)将第二次酶解液煮沸15分钟灭酶，加重量百分比为0. 5%活性炭吸附，然后过滤、浓缩制成澄清的水解液。根据苯酚硫酸法测得其中多糖含量189. 45mg/g,茚三酮法测得α _氨基氮含量 99. 36mg/g，与对比试验1的结果相比，比单酶酶解有明显提高。对比试验1 单酶酶解将Ikg干茶树菇洗净，粉碎成80目，加水调整浆液浓度，使干茶树菇原料的重量与水的比为1 20(kg L)，Ikg茶树菇中加入20L水，再采用食用级柠檬酸或稀盐酸调节其PH值，使pH值在4. 5，加入纤维素酶，木聚糖酶，β -葡聚糖酶，甘露聚糖酶， 几丁质酶，果胶酶，蛋白酶，脂肪酶在45-55°C条件下，分别酶解3小时，温度调节可采用水浴加热器，酶解在慢速搅拌状态下进行，得单酶酶解液，煮沸15分钟灭酶，加重量百分比为 0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种复合酶法制备茶树菇水解液的方法，其特征在于：方法和步骤如下：（１）将茶树菇粉碎，调浆，煮沸灭菌，得浆液；（２）第一次酶解：加水调整浆液的浓度，使干茶树菇原料与水的ｋｇ∶Ｌ比为１∶１５－２５，调节其ｐＨ值，使ｐＨ值在４．５－６，加入复合酶Ｉ，复合酶Ｉ的质量为干茶树菇质量的０．０５％－０．３％，在４５－５５℃条件下，酶解２－４小时，得到第一次酶解液；其中，复合酶Ｉ由纤维素酶∶木聚糖酶∶β－葡聚糖酶∶甘露聚糖酶∶几丁质酶＝１∶１∶１∶１∶１－１∶２∶２∶２∶５组成；（３）第二次酶解：加水调整第一次酶解液的浓度，使干茶树菇原料与酶解液的ｋｇ∶Ｌ比值为１∶２５－３５，调节ｐＨ值，使ｐＨ值在３．０－６．０，加入占干茶树菇重量０．１－０．３％的复合酶ＩＩ，在５０－６０℃条件下，酶解２－４小时，得到第二次酶解液；其中，复合酶ＩＩ由果胶酶∶蛋白酶∶脂肪酶＝１∶１∶１－１∶４∶６组成；（４）将第二次酶解液煮沸灭酶，加重量百分比为０．５％－１％吸附剂吸附，过滤、浓缩制成茶树菇水解液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛淑红，路福平，周瑶，王娜，华伯元，王春霞，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：12