重组中华蜜蜂王浆主蛋白ＡｃｃＭＲＪＰ１的酵母表达方法及产物用途技术

本发明专利技术公开了一种重组中华蜜蜂王浆主蛋白ＡｃｃＭＲＪＰ１的酵母表达方法及产物用途，该方法是利用基因工程手段，从中华蜜蜂脑ｃＤＮＡ文库中筛选出含ＡｃｃＭＲＪＰ１基因全长的克隆，并通过ＰＣＲ扩增得到目的基因，将该基因优化后连接到大肠杆菌－酵母穿梭载体ｐＰＩＣ９Ｋ，线性化后导入酵母细胞，然后在诱导ＡｃｃＭＲＪＰ１表达的条件下培养酵母细胞，最终收获表达产物，通过亲合层析进行纯化，可得到与天然蛋白糖基化程度和生物活性一致的产物。本发明专利技术获得的重组ＡｃｃＭＲＪＰ１可用于传代和原代昆虫、人体和动物细胞的体外无血清培养，排除了血清中众多不明细胞因子，如污染外源病毒和致病因子的风险，抗原、抗体、激素等干扰，在生命科学、医学、生物医药等领域具有广泛的用途。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组中华蜜蜂（Ａｐｉｓ　ｃｅｒａｎａ　ｃｅｒａｎａ）王浆主蛋白ＡｃｃＭＲＪＰ１的酵母表达方法，其特征在于，包括以下步骤：（１）选择适于大规模生产的酵母菌株作为宿主细胞。（２）将目标基因ＡｃｃＭＲＪＰ１进行ＰＣＲ扩增。（３）将ＰＣＲ扩增后的目标基因引入所述宿主细胞。（４）诱导酵母宿主细胞中的目标基因进行表达。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：沈立荣，赖超强，袁鹏，莫寅元，张伟光，张瑮文，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86