菊花总黄酮提取方法技术

本发明专利技术公开了一种菊花总黄酮提取方法，该方法是将菊花经乙醇提取后，以大孔树脂吸附法将提取液经上柱、洗脱、收集洗脱液、浓缩、干燥，获得菊花总黄酮的方法。本发明专利技术涉及的菊花总黄酮提取方法是一种操作简便、快捷的方法。所选用的大孔树脂具有吸附量大，解吸率大的特点。本发明专利技术方法以乙醇为溶剂，既价廉又无毒。用本发明专利技术方法提取菊花总黄酮含量可达５５％以上，且重现性好，树脂可重复使用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术为中药提取的方法，主要涉及中药有效组分提取的方法，尤其涉 及菊花总黄酮的提取方法。
技术介绍
菊花本品为为菊科植物C7jo^朋^e mwm monyW&m Ramat.的干燥头状 花序。9-11月花盛开时分批釆收，阴干或培干，或熏、蒸后晒干。药材按产 地和加工方法不同，分为毫菊、除菊、贡菊、杭菊。菊花，味甘苦，微寒，入肝经，明目，清头风，去目翳，发表。能平肝火, 内风，治头暈目胀，偏正头风，黑睛生翳，抱轮红赤。病后翳膜不去者又能益 肝补阴，治肝肾不足之目昏内障。本品有白菊、黄菊和野菊花三种，白菊花 味甘、清热力稍弱，长于平肝明目；黄菊花其味苦重，清热力较强，常用于疏 风散热；野菊花清热解毒力很强，善解痈肿疮毒。菊花中黄酮类物质对冠心 病、心绞痛、高血压、心血管疾病有很好的疗效，同时还有显著的清除人体 内自由基、抗老化、抗突变、调血脂、降血压等药理保健功能。国外研究发 现菊花对单纯疱疹病毒(HSV-1)、脊髓灰质炎病毒和麻疹病毒具有不同程度 的抑制作用，与空白组对照，空斑形成率减少50%。菊花水浸剂(l :4)在试管 内对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌、许兰氏黄癣菌、奥杜盎氏小芽肥癣菌、铁 锈色小芽胞癣菌、羊毛状小芽胞癣菌、腹股沟表皮癣菌、红色表皮癣菌、星 形好卡氏菌等皮肤真菌均有不同程度的抑制作用。另外菊花还具有抗艾滋病 作用,它能抑制ZV递转录酶和HLV复制的活性。《本草正义》说菊花为目科要药。菊花在眼科中有着广泛的应用， 如白菊花配伍柴胡、蝉蜕、木贼、羌活、防风、苍术、白术、赤芍、女贞子、 生地、菟丝子、甘草，用此方加减治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变、急 性视网膜色素上皮炎、视网膜静脉周围炎、眼外伤及黄斑疾病等。配伍一些 补气血、益肝肾滋补之品还可用于治疗白内障、原发性视网膜色素变性、视 神经萎縮、远视、弱视、迎风流泪等。菊花主要含黄酮类、绿原酸、挥发油等化合物。现有的菊花总黄酮提取方法, 一般采用水提取或者乙醇溶液提取，浓縮， 干躁，即得，这种方法提取的总黄酮含量低，用本专利技术可以克服此缺点。国产的大孔树脂提取，提取物溶剂残留较多，不易达到药用标准，本专利技术可以 克服这些缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，是以乙醇加热 回流提取菊花，回收乙醇，浓縮，将菊花提取液吸附到大孔树脂上、洗脱、 收集洗脱液、浓縮、干燥，获得纯化的菊花总黄酮。本专利技术提供的菊花总黄 酮大孔树脂纯化方法，将菊花以10%~95%的乙醇提取，优选乙醇浓度为 20%~80%,最优选为40%。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，将菊花以乙醇提取1 4次，最优选为3次。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，每次提取菊花质量与乙醇溶液的体积比为1~20倍，优选提取体积为4~14倍，最优选提取体积为8~12倍。本专利技术提供的菊花总黄 酮大孔树脂纯化方法，每次提取的时间为0.5 2h，最优选时间为lh。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，大孔树脂选用日本三菱公司HP20、 SP825、 SP850、 SP700、 SP70，优选大孔树脂SP850、 SP700、 SP70，最优 选SP70。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，菊花提取液的上样量(菊花质量树脂体积)为0.5: 1~8: 1，优选1: 1~4: 1，最优选1.5: 1。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方法，洗脱流速为洗脱液流速为lBV/h~5BV/h，最优选为2BV/h。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯化方 法，洗脱剂为有机醇，优选项为乙醇。本专利技术提供的菊花总黄酮大孔树脂纯 化方法，洗脱剂的洗脱浓度为5% 95%，最优选为20%~75%。。洗脱剂的洗 脱体积为1 10倍柱体积，优选为3 8倍柱体积，最优选为5倍柱体积。获 得纯化的菊花总黄酮含量大于55%。 本专利技术具有以下优点1、 本专利技术涉及的菊花总黄酮树脂纯化的方法是一种操作简便、快捷的 方法。2、 所选用的大孔树脂具有吸附量大，解吸率大的特点。3、 本专利技术方法以乙醇为溶剂，既价廉又无毒。4、 用本专利技术方法纯化菊花提取物，总黄酮含量可达55%以上，且重现 性好，树脂可重复使用。附图说明图1.菊花静态吸附与解吸率曲线图2.菊花动态吸附泄漏曲线 图3.菊花动态解吸曲线 图4菊花比上柱量曲线 图5.菊花洗脱终点曲线具体实施例方式本专利技术将结合具体实施例作进一步说明，这些实例仅用于说明目的，而 不用于限制本专利技术范围。说明菊花总黄酮含量测定方法① 仪器与试药北京普析通用仪器有限公司TU-1901型紫外可见分光光度仪，联想数字处理中心。木犀草苷对照品(供含量测定用)购于中国药品生物制品检 定所，批号为111720-200501，使用前置五氧化二磷减压干燥器中干燥24 小时，使之恒重。甲醇为分析纯(北京化工厂)，水为重蒸馏水，其它试剂 均为分析纯。② 检测条件检测波长348nm,空白对照甲醇。③ 对照品溶液的制备精密称取木犀草苷对照品9.4mg，置25ml量瓶中，甲醇溶解并稀 释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。④ 工作曲线制作精确吸取O.l、 0.4、 0.8、 1.2、 1.6ml置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀。以甲醇作为空白，于348nm波长处测定吸光度。以吸光 度为纵坐标，木犀草苷对照品浓度为横坐标，绘制标准曲线，并计算 回归方程为Y=43.098X-0.0117， R2=0.9999。以浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度Y值为纵坐标，进行线性回归， 其回归方程为Y-3590.7X-188.06 (r=0.9999)结果表明，木犀草苷浓度在3.76)ng/ml 60.16吗/ml范围内呈良好线性关系。⑤供试品溶液的制备取菊花提取物适量，精密称定，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，再精密移取1.0ml至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 (D含量测定取样品溶液置348nm处测定吸光度，记录吸光度值，代入工作曲线计 算总黄酮含量。实施例l本专利技术的一种纯化方法(1) 菊花提取菊花经40%乙醇分别以12倍、8倍、8倍体积加热回流三次，每次lh，合并三次滤液，减压浓縮至药材质量体积为h 2，过(2) 上柱将菊花提取液上柱，控制流出液流速为0.5BV/h，上样量为药材重量树脂体积为1.5: 1，至提取液全部进入树脂床。(3) 洗脱以5BV体积的20%乙醇冲洗树脂床，控制流出液流速为 2BV/h，以除去杂质。然后以5BV体积的75。/。乙醇，控制流速为2BV/h，收 集洗脱液，减压浓縮至一定体积，进行喷雾干燥，即得纯化产物。实施例2选用不同条件进行提取采用本专利技术提供的方法，选用不同条件进行菊花总黄酮提取实验，分别 称取菊花药材20g， 9份，按表1的因素水平分别进行正交试验，每次提取 l小时，提取后滤液合并，减压浓縮至干，真空干燥至恒重，精密称取干膏 适量，以甲醇溶于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。移取1.0ml滤 液至10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述方法测定总黄酮的 含量，并对结果进行方差分析，结果见表2、 3。表1菊花提取正交实验因素水平表<table>table see original docu本文档来自技高网...

【技术保护点】
菊花总黄酮提取方法，具体方法是：将菊花经乙醇提取后，以大孔树脂吸附法将提取液经上柱、洗脱、收集洗脱液、浓缩、干燥，获得菊花总黄酮。

【技术特征摘要】
1、菊花总黄酮提取方法，具体方法是将菊花经乙醇提取后，以大孔树脂吸附法将提取液经上柱、洗脱、收集洗脱液、浓缩、干燥，获得菊花总黄酮。2、 如权利要求1所述的菊花总黄酮提取方法，其特征是将菊花以10%~95%的乙醇提取，优选乙醇浓度为20%~80%，最优选为40%。3、 如权利要求1所述的菊花总黄酮提取方法，其特征是将菊花以乙醇提取三次，每次提取菊花质量与乙醇的体积比为1~20倍，优选提取体积 为4~14倍，最优选提取体积为8 12倍。4、 如权利要求1所述的菊花总黄酮提取方法，其特征是菊花以乙醇 提取三次，提取的时间为0.5~2h，最优选时间为lh。5、 如权利要求1所述的菊花总黄酮提取方法，其特征是大孔树脂选 用日本三菱公司HP20、 SP825、 SP850、 SP700、 SP70，优选大孔树脂SP850、 SP...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭颂，
申请(专利权)人：郭颂，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]