用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法。本发明专利技术包括如下技术步骤：（１）选择细胞系作为制苗用细胞；（２）制苗用细胞的传代与培养；（３）细胞毒种的繁殖；（４）制苗毒液的繁殖；（５）配苗、分装及冻干。本发明专利技术具有生产工艺简单且稳定、易操作，病毒含量高，批间差异小，质量易控，可显著提高疫苗产量和质量。利用本发明专利技术生产的猪瘟活疫苗安全性好、免疫效力高，对猪瘟强毒攻击具有完全的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于兽用生物制品
，更具体是涉及一种用细胞系 生产猪瘟活疫苗的方法。
技术介绍
我国目前生产猪瘟兔化弱毒疫苗所用的细胞为牛睾丸原代细胞。由于我国牛群BVD/MDV病比较普遍，用牛睾丸原代细胞制苗，易造成 细胞外源病毒污染，且产毒滴度不高，批间差异大，给疫苗产量、效 力的提高带来困难。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足之处，提供一种用细 胞系生产猪痘活疫苗的方法。该方法具有生产工艺简单且稳定、易操 作，病毒含量高，批间差异小，质量易控，可显著提高疫苗产量和质 量。利用本专利技术生产的猪瘟活疫苗安全性好、免疫效力高，对猪瘟强 毒攻击具有完全的免疫保护作用。为达到上述目的，本专利技术采取了如下的技术方案1.用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法，包括如下技术步骤(1) 选择细胞系作为制苗用细胞(2) 制苗用细胞的传代与培养上述细胞系经EDTA-胰酶细胞 *液消化传代，以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于继 续传代或接种病毒；(3) 细胞毒种的繁殖用细胞维持液，将新鲜脾毒制成病毒悬 液，接种生长良好的上述细胞系单层，继续培养；每隔4—5日收获换 液一次，取二收、三收本文档来自技高网...

【技术保护点】
用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：包括如下技术步骤：（１）选择细胞系作为制苗用细胞：（２）制苗用细胞的传代与培养：上述细胞系经ＥＤＴＡ－胰酶细胞分散液消化传代，以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于继续传代或接种 病毒；（３）细胞毒种的繁殖：用细胞维持液，将新鲜脾毒制成病毒悬液，接种生长良好的上述细胞系单层，继续培养；每隔４～５日收获换液一次，取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种；（４）制苗毒液的繁殖：取已形成良好单层的上述细胞系培 养瓶，弃去细胞生长液，接种含猪瘟兔化弱毒的维持液，继续培养；接毒后第５日作第一次收获换液...

【技术特征摘要】
1.用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于包括如下技术步骤(1)选择细胞系作为制苗用细胞(2)制苗用细胞的传代与培养上述细胞系经EDTA-胰酶细胞分散液消化传代，以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于继续传代或接种病毒；(3)细胞毒种的繁殖用细胞维持液，将新鲜脾毒制成病毒悬液，接种生长良好的上述细胞系单层，继续培养；每隔4～5日收获换液一次，取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种；(4)制苗毒液的繁殖取已形成良好单层的上述细胞系培养瓶，弃去细胞生长液，接种含猪瘟兔化弱毒的维持液，继续培养；接毒后第5日作第一次收获换液，以后每隔4日收获换液1次，收获的毒液置-15℃以下保存；(5)配苗、分装及冻干将检验合格的病毒培养液，混合于同一容器内，加入稳定剂，同时加入抗生素，充分摇匀，定量分装；每头份含细胞毒液不少于0.015ml，分装后迅速进行冷冻真空干燥后即得成品。2. 根据权利要求1所述的用细胞系生产猪瘟...

【专利技术属性】
技术研发人员：宁宜宝，吴文福，林旭埜，张毓金，李嘉爱，赖月辉，张国丽，岑小清，游启有，王少英，司徒剑谋，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，广东永顺生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]