优化的重组生长因子蛋白纯化方法技术

技术编号:5389968 阅读:316 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
用于在原核生物中生产纯化的重组GDF-5相关蛋白的方法,包括细菌细胞破坏和包含体溶解的步骤,以获得溶解的GDF-5相关蛋白的单体,所述方法的特征在于a)使用高压均质机在800至900巴的破坏压力下破坏细菌细胞;和/或b)用含有L-精氨酸的变性溶解缓冲液处理回收的包含体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】 描述本专利技术涉及用于重组生长因子蛋白的有效原核生物生产和纯化的改进方法。更特 别地,本专利技术涉及导致更好的蛋白产量、更高的产品纯度以及所述方法的改善的工业应用 的程序改进。生长和分化因子(⑶F)是促进细胞增殖/分化和组织再生的同型二聚细胞因子。 在大范围的医学应用中有用的⑶F是生长/分化因子5(⑶F-5)。尤其是过去已经成功地 应用了 GDF-5的成骨特性,即,帮助局部骨折的愈合。具有重叠生物功能和非常高氨基酸 同源性的⑶F-5的非常近的亲缘物质是⑶F-6和⑶F-7。⑶F-5/-6/-7在哺乳动物中是保 守的,但在无脊椎动物中不具有已知的同源基因(Ducy和Karsenty 2000,Kidney Int. 57, 2207-2214)。在体内,该蛋白家族的成员最初作为大的前体蛋白合成,其随后在离C-末端大约 110-140个氨基酸的碱性残基簇处经历蛋白水解裂解地,因此从N-末端前结构域释放出生 物活性C-末端成熟蛋白部分。所有成熟多肽在结构上是相关的并含有保守的生物活性结 构域,其含有六个或七个标准半胱氨酸。这些残基之间的二硫桥键有助于该蛋白家族的典 型三维“半胱氨酸-结”基序本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于生产纯化的重组GDF-5相关蛋白的方法,其包括细菌细胞破坏和包含体溶解的步骤,以获得溶解的GDF-5相关蛋白的单体,所述方法的特征在于a)使用高压均质机在800至900巴的破坏压力下破坏细菌细胞;如/或b)用含有L-精氨酸的变性溶解缓冲液处理回收的包含体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:U埃林格E科尔施特隆
申请(专利权)人:生物医药技术发展有限公司
类型:发明
国别省市:DE[德国]

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