【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种重组蛋白Ａ亲和层析介质的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤： （１）通过化学合成的方法设计合成重组蛋白Ａ基因单体，５’端Ａｌａ－Ａｓｐ突变成Ｖａｌ－Ａｓｐ，以形成ＡｃｃＩ酶切位点，各重组蛋白Ａ基因单体间以ＡｃｃＩ酶切位点相连，第一个重组蛋白Ａ基因单体前端加入与表达载体相连的ＮｃｏＩ酶切位点，６个Ｈｉｓ和ＥＫ酶切位点，最后一个重组蛋白Ａ基因单体末端加入中止密码子ＴＡＡ和与表达载体ｐＥＴ３２ａ相连的ＢａｍＨ Ｉ酶切位点； （２）将步骤（１）的重组蛋白Ａ基因单体酶切后接入载体ｐＥＴ３２ａ的相应酶切位点之间，再以Ａｃｃ Ｉ内切酶酶切，连接成包含３个串连重组蛋白Ａ基因单体的重组蛋白Ａ基因表达载体ｐＥＴ３２ａ－Ｐ； （３）将步骤（２）的表达载体ｐＥＴ３２ａ－Ｐ转化大肠杆菌ＢＬ２１／ＤＥ３，筛选、酶切，获得重组转化子ＢＬ２１／ｐＥＴ３２ａ； （４）将步骤（３）的菌株ＢＬ２１／ｐＥＴ３２ａ进行培养发酵，使其高效表达重组蛋白Ａ，再收集菌体，经分离、纯化得到重组蛋白Ａ产品； （５）用环氧氯丙烷、氢氧化钠与琼脂糖或葡聚糖凝胶在水介质中进行反应，反应产物与步骤（４）获得的重组蛋白Ａ在...
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：谈珉，胡辉，郭亚军，
申请(专利权)人：上海国健生物技术研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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