４－取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物及用途制造技术

本发明专利技术提供一类４－取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，是指４′－Ｏ－去甲基－４－脱氧－４－取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，是利用现有的药物依托泊苷作为先导化合物，通过结构改造，合成一系列具有抗肿瘤活性的化合物，初步的体外筛选和体内抑瘤实验表明，这些化合物具有较好的抗肿瘤活性，其中化合物ＧＬ３在提高对肿瘤抑制作用的同时，其毒性也明显降低，可制备具有抗肿瘤活性较高、毒性较低、对多药耐药肿瘤有效的抗肿瘤药物；本发明专利技术的结构通式：

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属化合物制备及用途，主要涉及4’ -0-去甲基-4-脱氧-4-取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物的制备，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
依托泊苷和替尼泊苷是目前临床上使用的抗肿瘤药物，它们都是4’ -0-去甲基表 鬼臼毒素的半合成衍生物。4’-0_去甲基表鬼臼毒素类衍生物可通过抑制DNA拓扑异构酶 II的活性，破坏DNA的结构和功能，从而发挥抗肿瘤的作用。尽管上述的两个化合物已经在临床上使用多年，但仍存在水溶性差，骨髓抑制，容 易产生耐药性等问题，从而限制了其应用。因此，为了克服上述缺点，寻找更为高效低毒的 鬼臼毒素类化合物，研究者对鬼臼毒素进行了一系列结构改造工作。在总结鬼臼毒素的结构与活性关系的基础上，1999年Claude Monneret等人提出 了鬼臼毒素类化合物的构效关系间二氧戊环是最佳选择；E环自由旋转和2 α、3 β构型是 活性所必需的；4β构型的抗肿瘤活性明显高于4α构型；4位是有效的修饰位点，依托泊 苷糖苷部分用氨基取代有利于提高化合物对DNA拓扑异构酶II的抑制活性，同时引起DNA 链的断裂。值得注意的是，一些4 β -芳基胺类鬼白毒素衍生物不仅对一些依托泊苷耐受的 肿瘤细胞有细胞毒活性，还能降低DNA拓扑异构酶II的表达或降低多药耐受(MDR)蛋白的 过表达。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一类4-取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，主要指4’ -0-去甲 基-4-脱氧-4-取代苯胺基表鬼白毒素衍生物，具有下述结构通式(I)<formula>formula see original document page 3</formula>(I)其中X 表示-(CH2) η_，η 为 O 2 或-CH = CH-；R1, R2, R3, R4, R5相同或不同，R1, R2, R3, R4, R5为氢原子、卤原子、羟基、硝基、含1至6个碳原子的直链或支链的烷基或含1至3个碳原子的直链或支链的烷氧基；本专利技术的又一个目的是提供4’-0-去甲基-4-脱氧-4-取代苯胺基表鬼臼毒素衍 生物在制备抗肿瘤药物中的应用。初步的体外筛选发现它们对多种肿瘤细胞株，包括95D， A549，KB, KB/VCR等均有较好的抑制增殖作用，显示出较依托泊苷更强的细胞毒活性，其中 化合物GL2，GL3的作用尤为突出，对上述细胞株的IC5tl值在0. 42 16. 43 μ M之间。进一步 的体内抗肿瘤实验发现，化合物GL3在100mg/kg的大剂量给药条件下，抑瘤率达到58. 1 %， 比阳性对照药物顺钼的抑瘤率高13. 7%，这一结果表明该类化合物在提高对肿瘤的抑制作 用的同时，能够很好地降低其毒性。对人高转移性肺癌95D裸小鼠移植瘤的抑制作用发现， 化合物GL3的抑瘤率达到57. 3%。本专利技术的特点是利用现有的抗肿瘤药物依托泊苷作为先导化合物，通过结构改 造，合成一系列具有抗肿瘤活性的化合物，以期发现抗肿瘤活性较高、毒性较低、对多药耐 药肿瘤有效的抗肿瘤药物。初步的体外筛选和体内抑瘤实验表明，这些化合物具有较好的 抗肿瘤活性，其中化合物GL3在提高对肿瘤抑制作用的同时，其毒性也明显降低。具体实施例方式本专利技术结合实施例作进一步的说明。以下的实施例是说明本专利技术的，而不是以任 何方式限制本专利技术。实施例1 本专利技术的合成通式为H2N-NH2 ——~ H2N-<^^>—NHBocIII/^^―NHBocοφ^ ^^ οοφ^ OO^MeO^^OMeMeO^^OMeMeO^^^OMeOHOHOHTTl[VVH1^nh23hc'H々V^第四步第五步.p-^^K^r5 R4^^ <οΛΧΧ(0f^N 0οOH0HV1通式I实施例2 化合物4’ -0-去甲基-4-脱氧-表鬼臼毒素(GLl)的制备第一步(参照文献方法:Francesco Troisi et al. Tetrahedron Letters 2007, 48,7986-7989)将5. 05g 二碳酸二叔丁酯(Boc2O, 23mmol)溶解于二氧六环中，在冰浴条件下，滴加入5g对苯二胺(化合物I，46.3mmol)的二氧六环溶液中，滴加完后在室温下搅拌过夜， 然后将反应溶液减压浓缩，用硅胶色谱纯化剩下的残余物(洗脱剂乙酸乙酯/石油醚= 7/3)，得化合物II，收率92. 7% ；黄色固体，熔点108. 9-113. 7°C .第二步在氮气保护下，将5g依托泊苷(化合物III，8. 5mmol)与5. Ilg碘化钠(34mmol) 溶于50mL无水乙腈中；另将干燥的4. 3mL三甲基氯硅烷溶于30mL无水乙腈中，在冰浴条件 下，将此溶液缓慢滴加到反应液中，滴加完毕后，室温搅拌1小时，得到中间体4’ -0-去甲 基-4-脱氧-4-碘代表鬼白毒素(化合物IV)，无需纯化，直接进行下步反应.第三步在化合物IV的反应液中加入5. Ig无水碳酸钡(34mmol)，搅拌10分钟，加入无 水三乙胺将反应液调至碱性，加入2. 12g化合物11(10. 2mmol)，室温搅拌12 15小时； 将反应液抽滤，滤液减压浓缩，用硅胶色谱纯化剩下的残余物(洗脱剂乙酸乙酯/石油 醚=1/1)，得化合物V，收率85. 7%，黄色固体，熔点136. 1 138. 6 /Η NMR(500MHz, CDCl3) δ 7. 20-7. 21 (m, 2Η, )，6· 74 (s，1Η)，6· 51 (s, 1Η)，6· 48-6. 50 (d, J = 9. 0Ηζ，2Η)，6.36 (ws, 1Η), 6. 33 (s, 2Η), 5. 95and 5. 97 (d, J = 10. 5Hz，2Η)，5· 47 (ws，1Η)，4· 61 (m，1Η)，4.57-4. 58 (d, J = 5. OHz, 1Η)，4. 34-4. 37 (t, J = 8. OHz, 1Η)，3. 96-4. 00 (m, 1Η)，3. 79 (s, 6Η)，3. 13-3. 16 (dd, J = 5. OHz, 1Η)，2. 94-3. 01 (m, 1Η).第四步将3. Ig化合物V(5. 24mmol)溶于30mL无水乙酸乙酯溶液中，将干燥的HCl气 体通入反应液中，在0°C以下进行反应3小时；将反应液抽滤，得到的固体为化合物VI， 收率95. 7 %,黄色固体，熔点183. 3 186. 3 °C, 1H NMR (500MHz, DMS0) δ 9. 93 (s, 1H)，7.11-7. 13(m，2H，)，6· 76-6. 77 (m，3H)，6. 54 (s，1H)，6· 25(m，2H)，6. 33(s，2H)，5· 96and5.99 (d, J = 10. 5Hz,2H)，4. 85 (m, 1H)，4. 50-4. 51 (d, J = 5. OHz, 1H)，4. 33-4. 35 (m, 2H)， 3. 64 (s，6H)，3. 27-3. 28 (dd, J = 5. OHz, 1H)，2. 96-3. 03 (m, 1H).第五步将IlOmg化合物VI (0. 18mmol)溶于5mL无水二氯甲烷溶液中，加入三乙胺将溶 液调本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种４’－Ｏ－去甲基－４－脱氧－４－取代苯胺基表鬼臼毒素衍生物，其特征在于，具有以下结构通式（Ⅰ）：　　＊＊＊　（Ⅰ）　　其中：　　Ｘ为－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－，ｎ为０～２或－ＣＨ＝ＣＨ－；　　Ｒ↓［１］，Ｒ↓［２］，Ｒ↓［３］，Ｒ↓［４］，Ｒ↓［５］相同或不同，Ｒ↓［１］，Ｒ↓［２］，Ｒ↓［３］，Ｒ↓［４］，Ｒ↓［５］为氢原子、卤原子、羟基、硝基、含１至６个碳原子的直链或支链的烷基或含１至３个碳原子的直链或支链的烷氧基。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡永洲，汪丽，杨波，何俏军，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]