一种高纯度白藜芦醇提取分离纯化工艺制造技术

本发明专利技术提出一种高纯度白藜芦醇提取分离纯化工艺，其总过程为：原料粉碎、发酵酶解、有机混合溶剂提取、浓缩、醇沉、水沉、过滤、醇溶、柱层析、纯化、精制得９８％产品。本发明专利技术采用混合有机溶剂进行提取，能最大限度地选择性的将有效成分白藜芦醇提出，而抑制无效成分的提出，为后续除杂步骤节省溶剂和时间。采用有机溶剂提取，时间短，减少了提取工艺中的萃取步骤，从而缩短了生产时间，减少了生产设备，更易于生产操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及白藜芦醇的提取分离纯化工艺。
技术介绍
白藜芦醇，又名虎杖苷元，英文名Resveratrol，分子式CMH』3，分子量228. 25，化学名3，5，4"-三羟基芪。其由寥科植物虎杖(Rhi薩a Polygoni Cuspidati)的根茎提取精制而来，为无味、白色晶体粉末，难溶于水，易溶于乙醇，丙酮等有机溶剂。 白藜芦醇被认为是一种植物抗毒素，是在植物受到病原性进攻和环境恶化时产生的。其药理作用有抗菌、抗氧化、预防心脏病、抗癌、抗血小板凝、保护肝脏、雌激素作用、防辐射、免疫调节、抗艾滋病活性等。白藜芦醇已被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物，它在食品、医药、保健等方面应用也越来越广。 现有技术从中药虎杖中提取白藜芦醇的方法有酶解提取、溶剂提取、微波提取、超 声提取等等，但由于提取方式及采用的提取条件等的不同，存在适应性不强、操作复杂、提 取产物纯度不高、提取成本高等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服白藜芦醇现有生产工艺中存在的不足，提供一种对生产设备适应性强、易操作、可提高提取物纯度的白藜芦醇提取分离纯化工艺。 本专利技术的技术方案如下 本专利技术提出的白藜芦醇提取工艺的总过程为原料粉碎、发酵酶解、有机混合溶剂提取、浓縮、醇沉、水沉、过滤、醇溶、柱层析、纯化、精制得98%产品。其具体包括如下步骤 1、前处理选取虎杖干药材用振荡筛筛去泥沙，选出杂物及霉变药材后粉碎成粗 颗粒，待用。 2、发酵酶解将虎杖干药材颗粒用适量的温水充分浸润后，加入发酵酶，将虎杖干 药材颗粒和发酵酶的混合物物料水分调至40% _70%，充分搅拌均匀后放入发酵池中，密 封发酵时间大约3天-12天，得虎杖原料。发酵酶采用纤维素酶，用量为虎杖原料重量的 0. 3-2%。 3、提取将发酵酶解后的虎杖原料于4(TC-7(TC下用混合比例为6 : 1-1 : l的 混合有机溶剂提取1-3次，每次1-3小时，混合有机溶剂的体积(L)与虎杖原料重量(kg)之比为i : l-8 : i，合并提取液，浓縮至出现大量固形物时(即得到第一次浓縮浸膏)，加入70%以上(通常为70% -95% )的醇溶液溶解后调醇至35% -65% ，冷却至室温后离心 过滤去沉淀，取上清液。将上清液于4(TC-6(TC下减压浓縮至产生大量固形物(即得到第 二次浓縮浸膏)，水沉取沉淀，用高醇度醇溶液溶解，过滤，滤液过分离柱，以一定醇度的醇 溶液洗脱，将洗脱液于40°C _701:下浓縮至醇度为30度-40度，放置结晶，过滤，将结晶用 高醇度的醇溶液溶解，加入一定量的活性炭于40°C -e(TC脱色1-3小时，再过滤，将滤液于4(TC-6(TC下浓縮至醇度为35^以下重结晶，过滤，干燥即得白藜芦醇98^精品。结晶后的 母液还可进一步用于制备50% _60%的白藜芦醇产品。 上述方法中，混合有机溶剂的溶剂组合为甲醇乙酸乙酯、乙醇乙酸乙酯、乙醇 石油醚、乙酸乙酯石油醚。 减压浓縮压力为-0. 06Mpa-0. 04Mpa。 所述醇溶液为甲醇或乙醇的水溶液，用于调醇的醇溶液的醇度为70%以上，用于 溶解水沉沉淀的醇溶液醇度为67% _95%，上柱洗脱醇溶液所用醇度为65% -85%。 所述分离柱所用填充材料为氧化铝或硅胶。 所述溶解第一次浓縮浸膏的醇溶液体积(L)与浓縮浸膏重量(Kg)的比为3:i-8: i，溶解水沉沉淀的醇溶液用量体积(L)与沉淀重量(Kg)比为5 : i-io : i。 溶解结晶的醇溶液体积(L)与结晶重量(Kg)的比为8 : 1-20 : i。水沉第二次浓縮浸膏的水的重量是第二次浓縮浸膏重量的5-10倍。 本专利技术的优点或积极效果 本专利技术采用混合有机溶剂进行提取，能最大限度地选择性的将有效成分白藜芦醇提出，而抑制无效成分的提出，为后续除杂步骤节省溶剂和时间。采用有机溶剂提取，时间 短，减少了提取工艺中的萃取步骤，从而縮短了生产时间，减少了生产设备，更易于生产操 作。具体实施例方式下面结合实施例来进行进一步说明本提取工艺，但并不作为对本专利技术的限定。 实施例1 以20Kg虎杖干药材为例，将虎杖干药材粉碎成l-3mm的颗粒待用，将待用料放入 发酵池，加入0. 4kg纤维素酶，将物料中水分调至40% _70%，拌匀自然发酵7天。将发酵 后的虎杖原料用80L的混合有机溶剂(石油醚乙酸乙酯=1 : 1)于4(TC下提取3次，每 次1小时，合并提取液，将提取液减压浓縮至出现大量固形物即第一次浓縮浸膏，将第一次 浓縮浸膏加80L 85%的乙醇溶解，再加水调至含醇量为60% ，冷却后将调醇的醇沉上清液 离心去除沉淀物，取上清液于45t:下减压浓縮至产生大量固形物即第二次浓縮浸膏，加入 第二次浓縮浸膏5倍重量的水进行水沉，离心过滤，再沉淀用85%乙醇溶解，醇溶液用量体 积(L)与沉淀重量(Kg)比为5 : 1，然后过滤，再将滤液上氧化铝柱，又用70%乙醇洗脱，将 洗脱液于5(TC下减压真空浓縮至含醇量为30%，然后放置结晶，过滤，将结晶用醇度80% 乙醇溶解过滤，醇溶液体积(L)与结晶重量(Kg)的比为10 : 1，再加入结晶重量10%的活 性炭于5(TC脱色1小时，过滤，将滤液于5(TC下浓縮至醇度为35度以下重结晶，过滤，最后 将结晶真空干燥即得98%产品。结晶用母液可循环套用或制备60% _70%的产品。 实施例2 以20Kg虎杖干药材为例，将虎杖干药材粉碎成2-4mm的颗粒待用，将待用料放入 发酵池，加入0. 2kg纤维素酶，将物料中水分调至40% _70%，拌匀自然发酵10天。将发酵 后的虎杖原料用100L的混合有机溶剂(石油醚乙酸乙酯=1 : 4)于6(TC下提取3次， 每次1小时，合并提取液，将提取液减压浓縮至出现大量固形物得第一次浓縮浸膏，将第一 次浓縮浸膏加100L80 %的甲醇溶解，加水调至含醇量为50% ，冷却后将调醇的醇沉液离心4去除沉淀物，取上清液于6(TC下减压浓縮至产生大量固形物得第二次浓縮浸膏，然后加入 第二次浓縮浸膏10倍重量的水进行水沉，离心过滤，用85%甲醇溶解，醇溶液用量体积(L) 与沉淀重量(Kg)比为7 : l，再过滤，将滤液上装填硅胶的分离柱，再用70%甲醇洗脱，将 洗脱液于5(TC下减压真空浓縮至含醇量为35%放置结晶，然后过滤，将结晶用醇度85%的 甲醇溶解过滤，醇溶液体积(L)与结晶重量(Kg)的比为15 : 1，在滤液中加入20g活性炭 于4(TC下脱色2小时，然后过滤，将滤液于6(TC下浓縮至醇度为35度重结晶，再过滤，最后 将结晶真空干燥即得98%产品。结晶用母液可循环套用或制备60% _70%的产品。 实施例3 以20Kg虎杖干药材为例，将虎杖干药材粉碎成l-3mm的颗粒待用，将待用料放入 发酵池，加入0. 4kg纤维素酶，将物料中水分调至40% -70% ，拌匀自然发酵7天。将发酵后的虎杖原料用120L的混合有机溶剂(石油醚乙醇=1 : i)于55t:下提取3次，每次i小时，合并提取液，将提取液减压浓縮至出现大量固形物得第一次浓縮浸膏，第一次浓縮浸膏 加80L90%的乙醇溶解，加水调至含醇量为45%，冷却后将调醇的醇沉液离心去除沉淀物， 取上清液于6(TC下减压浓縮至产生大量固形物即得第本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度白藜芦醇提取分离纯化工艺，其包括以下步骤：（１）前处理：先对虎杖干药材进行筛选，然后粉碎成颗粒；（２）发酵：将虎杖干药材颗粒加入发酵酶，发酵酶用量为虎杖干药材重量的０．３－２％，将虎杖干药材颗粒和发酵酶的混合物料水分调至４０％－７０％，密封发酵３－１２天，得到虎杖原料；（３）提取分离纯化：将发酵后的虎杖原料用混合有机溶剂提取１－３次，混合有机溶剂的体积与虎杖原料重量之比为１∶１－８∶１；合并提取液，减压浓缩至出现固形物，得第一次浓缩浸膏；将第一次浓缩浸膏用醇溶液溶解，用水调节醇度，将调醇后的浓缩液去沉淀，取上清液减压浓缩，得第二次浓缩浸膏，加入水对第二次浓缩浸膏进行水沉，沉淀用醇溶液溶解，过滤，将滤液上分离柱，再用醇溶液洗脱，对洗脱液浓缩结晶，又将结晶用醇溶液溶解后，加活性炭脱色，过滤，再加工滤液浓缩重结晶，即得白藜芦醇精品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：申文求，
申请(专利权)人：重庆科瑞南海制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]