一种表达纯化人ＶＥＧＦ基因和重组ＶＥＧＦ的方法，其特征在于：包括以下步骤： （１）克隆人ＶＥＧＦ的基因，用反转录ＰＣＲ法扩增ＶＥＧＦ的基因； （２）将上述扩增的ＶＥＧＦ基因与克隆载体连接，构建人ＶＥＧＦ克隆质粒； （３）将上述人ＶＥＧＦ克隆质粒亚克隆进表达载体，再将连接后的质粒ＤＮＡ转染大肠杆菌； （４）表达人ＶＥＧＦ ａ、将上述带有人ＶＥＧＦ基因的表达载体的大肠杆菌铺含有抗生素的ＬＢ培养基板，将板放置３７℃温箱过夜培养； ｂ、从板上选一个菌落，接种ＬＢ培养基培养瓶内，在３７℃摇箱内培养，测菌液Ａ↓［６５０］ＯＤ值为０．６－０．８时停止培养； ｃ、向菌液内加ＩＰＴＧ，使其终浓度为０．５ｍＭ，继续培养６－８小时； ｄ、收获细菌； （５）纯化人ＶＥＧＦ蛋白。 ａ、将上述细菌沉淀用ｐＨ８．０的磷酸盐缓冲液洗一次，离心后，再用ｐＨ８．０的磷酸盐缓冲液悬浮沉淀； ｂ、超声裂解细菌，离心，将沉淀加８Ｍ尿素悬浮，离心，取上清液； ｃ、纯化人用离子交换和Ｎｉ－ＮＴＧ－Ｈｉｓ柱亲和层析进行纯化。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡敬群，杨建国，
申请(专利权)人：胡敬群，蔡建强，赵平，
类型：发明
国别省市：
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