抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供可与癌症细胞结合的抗体及其片段，所述抗体或其片段在生理现象如细胞滚动和转移中起重要作用。本发明专利技术还提供用所述抗体或其片段进行治疗、诊断、预测预后或分期的方法和所述抗体或其片段的组合物。本发明专利技术的方法和组合物可用于诊断和治疗疾病，如癌症（包括肿瘤生长和转移）、白血病、自身免疫疾病和炎症性疾病。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及与特殊表位结合的抗体，所述表位存在于细胞上，如癌细胞、转移细胞、白血病细胞、白血球和血小板，在细胞滚动、转移、炎症和自身免疫疾病等生理学现象中起重要作用。具体的说，所述抗体可具有抗癌活性、抗转移活性、抗白血病活性、抗病毒活性、抗感染活性和/或抗其它疾病活性，如炎症性疾病、自身免疫疾病、心血管疾病(如心肌梗塞、视网膜疾病)和依赖硫酸化酪氨酸的蛋白-蛋白相互作用导致的疾病。
技术介绍
抗体、噬菌体展示和组织靶向组织选择性靶向治疗药物是药物工业中新兴的方向。现已设计了新的基于靶向的癌症治疗方法，在增加治疗特异性和效力的同时降低了毒性，因而提升了整体效力。针对肿瘤相关抗原的小鼠单克隆抗体(MAb)已尝试用于将毒素、放射性核苷酸和化学治疗缀合物靶向肿瘤。此外，分化抗原如CD19、CD20、CD22和CD25已被开发用作治疗造血系统恶性肿瘤的癌症特异性靶标。虽然进行了详细的研究，这种方法具有某些局限性。一个缺陷是分离合适的显示选择性结合的MAb十分困难。第二个缺陷是作为成功分离抗体的先决条件，需要高抗体免疫原性物。第三个缺陷是最终产物具有非人类序列，这会引起免疫应答；如当给予人类小鼠MAb时，会产生人抗小鼠抗体(HAMA)应答。HAMA应答常常导致血浆半衰期缩短，并且不能反复治疗，因此降低了该抗体的治疗价值。后一个缺陷激起了工程改造生产小鼠源的嵌合或人源化单克隆抗体的兴趣，以及开发人抗体的兴趣。这种方法还有一个缺陷是只能分离抗已知纯化抗原的单一抗体类型。而且这种方法选择性不够高，其分离的抗体针对存在于正常细胞和恶性细胞上的细胞表面标记。有许多因素可影响MAb治疗癌症的治疗效果。这些因素包括肿瘤细胞上抗原表达的特异性和水平、抗原异质性和肿瘤包块的可接近性。白血病和淋巴瘤对抗体治疗的反应性比实体肿瘤(例如癌)更好。MAb迅速与血流中的白血病细胞和淋巴瘤细胞结合，容易进入淋巴组织中的恶性细胞，因此基于MAb的治疗对淋巴肿瘤有良好效果。理想系统需要鉴定识别产生恶性子细胞的干细胞表面标记。噬菌体文库已用于筛选与目标蛋白结合的随机单链变异体片段(scFv)，所述目标蛋白是预先决定的分离的蛋白，如抗体、激素和受体。抗体展示文库、尤其是噬菌体scFv文库的应用促进另一种发现靶向特殊细胞表面部分的独特分子的方法，即使该细胞表面部分仍未被人们所了解或性质未明。白血病、淋巴瘤和骨髓瘤为发源于骨髓和淋巴组织的癌症，涉及细胞不受控制的生长。急性成淋巴细胞性白血病(ALL)为异质性疾病，由特定的临床和免疫特性定义。与其它形式的ALL相似，大多数B细胞ALL(B-ALL)的确切病因是未知的；但是许多情况下该疾病由一种细胞DNA中的获得性遗传改变引起，该改变导致异常和持续性增殖。与其它白血病患者相比，B-ALL患者的预后显著较差，在儿童和成人中都是如此。B细胞CLL(B-CLL)是慢性淋巴细胞白血病(CLL)的一个实例，是一种发展缓慢的白血病，其特征为淋巴细胞数量增加。急性骨髓白血病(AML)是一种异质肿瘤，包括祖细胞，祖细胞在正常情况下最终会形成髓系分化细胞(红血球、粒细胞、单核细胞和血小板)。和其它形式肿瘤一样，AML涉及获得性遗传改变，该改变导致相对未分化的胚细胞代替了正常分化的骨髓细胞，表现为存在1种或多种早期髓系分化类型。AML通常起源于骨髓，较少涉及次级造血器官。AML主要影响成人，发病率高峰在15-40岁之间，但已知它也影响儿童和年龄较大的成人。几乎所有AML患者确诊后需要立即治疗以获得临床缓解，即使是没有循环未分化胚细胞异常迹象的患者。至今已开发出各种细胞裂解活性的抗肿瘤细胞MAb。小鼠MAbmuMab4D5拮抗HER2(P185)的胞外域，可显著抑制过度表达HER2的人肿瘤细胞的增殖，它被人源化以生产药物HERCEPTIN(trastuzumab)，该药物经FDA许可用于治疗人乳腺癌(美国专利号5,821,337和5,720,954)。结合后，抗体可抑制依赖HER2生长因子受体的肿瘤细胞生长。此外，抗CD20嵌合抗体最近也通过了FDA许可(美国专利号5,843,439)，该抗体导致外周B细胞迅速耗尽，包括淋巴瘤B细胞。该抗体与目标细胞结合导致依赖补体的裂解。该产品最近通过许可，当前临床上用于治疗低度B细胞非霍杰金氏淋巴瘤。某些其它人源化和嵌合抗体正在开发或临床试验中。例如，与CD33抗原特异性反应的人源化免疫球蛋白(Ig)与抗癌药加利车霉素CMA-676结合(Sievers et al.，Blood Supp.308504a(1997))，CD33表达于正常骨髓细胞上和大多数种类的骨髓白血病细胞上。该结合物又称为药物MYLOTARG，最近已获得FDA许可(Caron et al.，Cancer Supp.731049-56(1994))。根据其细胞裂解活性，另一个处于临床试验的抗CD33抗体(HumM195)与某些细胞毒性药物结合，包括白树毒素毒素(McGraw et al.，Cancer Immunol.Immunother.39367-74(1994))和放射性同位素131I(Caron et al.，Blood 831760-68(1994))，90Y(Jurcic et al.，Blood Supp.92613a(1998))和213Bi(Humm etal.，Blood Supplement 38231P(1997))。抗白细胞抗原CD45的嵌合抗体(cHuLym3)也处于临床试验，用于治疗人白血病和淋巴瘤(Sun etal.，Cancer Immunol.Immunother 48595-602(2000))。在体外测定中，ADCC(抗体依赖性细胞介导细胞毒性)测定中可观察到特异性细胞裂解(Henkart，Immunity 1343-46(1994)；Squier and Cohen，Current Opin.Immunol.6447-52(1994))。这些治疗性抗体经特殊的工程改造，使其对目标具有更高的亲合力，更稳定，并具有最佳的生物分布。参见如Presta，Current Pharma.Biotechnol.，3237-56(2002)；Presta et al.，Biochem.SocietyTransactions，30(4)487-90(2002)。与小鼠单克隆人源化和嵌合抗体的构建相比，噬菌体展示技术的应用允许完全人序列scFv的分离。最近开发了基于scFv克隆的抗人TGFβ2受体的完全人抗体，所述克隆即来源于噬菌体展示技术。该scFv可被转化为与TGFβ2结合竞争的完整人IgG4(Thompson etal.，J.Immunol.Meth.22717-29(1999))，具有很强的抗增殖活性。噬菌体展示技术作为本领域技术人员已知的技术，在下述出版物中由更详细的描述Smith，Science 2281315(1985)；Scott et al.，Science249386-90(1990)；Cwirla et al.，PNAS 876378-82(1990)；Devlin etal.，Science 249404-06(1990)；Griffiths et al.，E本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合ＰＳＧＬ－１表位的抗体或其片段，其中所述抗体或其片段具有ＳＥＱＩＤＮＯ：１ｓｃＦｖ的结合能力。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：A莱瓦农，R本莱维，D普拉克辛，E桑顿，Y哈加尔，H霍奇马哈伊姆，
申请(专利权)人：萨文特医药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]