达玛烷三萜糖苷化合物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一类达玛烷三萜糖苷化合物及其制备方法和用途。所述的达玛烷三萜糖苷化合物具体为3个从茜草科茜草属植物华腺萼木(Mycetia sinensis(Hemsl.)Craib)中分离得到的化合物。申请人的试验表明，本发明专利技术所述的式2所示结构的达玛烷型三萜皂苷具有甜味，其甜度约为蔗糖的200倍，可用作甜味剂，应用于食品、医药等各种行业。

Damane triterpene glycoside and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
达玛烷三萜糖苷化合物及其制备方法和用途
本专利技术涉及从植物中提取分离的活性成分，具体涉及茜草科茜草属植物华腺萼木中提取的达玛烷三萜糖苷化合物及其制备方法和用途。
技术介绍
达玛烷型皂苷属于四环三萜类皂苷，是人参、三七、西洋参和绞股蓝等名贵中药材中的重要特征生物活性成分，现代研究表明，达玛烷皂苷具有调节免疫力、抗肿瘤、抗衰老、抗老年痴呆、保护肝肾、抗糖尿病、抗高脂血症、抗心脑血管病、抗神经退行性疾病、抗骨质疏松症、抗抑郁等多种药理作用。目前，已经发现天然存在的达玛烷型三萜化合物200余种，分布于五加科、桦木科、菊科、葫芦科、鼠李科、玄参科、椴树科、山茶科、胡桃科等40余种植物。达玛烷结构为从环氧鲨烯由全椅式构象形成达玛烷骨架，在其C-3位有羟基取代，且为β-构型。此外，C-13位连有β-H，C-8、C-10位有β-CH3，C-14位有α-CH3，C-17位有β-侧链。新的达玛烷化合物，对丰富天然化合物的种类与来源，对开发新的健康产品、天然药物有重要意义。目前，世界各国科学家们都在开发研究纯天然、甜度高而能量低的甜味剂，以期部分替代蔗糖制作食品。纯天然非糖类甜味剂，在食品工业、大健康产业等方面取得了广泛的应用。可广泛应用于糕点、饮料、罐头、医药、烟草、牙膏、啤酒、酱制品等方面。由于天然甜味剂的低热值，不会产生增加胆固醇的影响，不致龋齿，因此心血管、肥胖、糖尿病等患者均可饮用，老少皆宜。除应用于食品工业外，还用于医药工业作矫味剂(矫正某些药物的异殊、怪味)和辅料(片剂、丸剂、胶囊等)。利用高甜度的天然糖苷与低甜度的低聚糖等互相搭配，取长补短，可以生产出色香味俱佳又甜度适中的保健复合甜味剂。甜叶菊、罗汉果与甜茶并称为三大甜味植物，其甜味素分别为甜菊苷(Stevioside)、罗汉果苷(Mogroside)、甜茶素(Rubusoside)，甜度均相当于蔗糖的300倍左右。其中：甜菊苷是一种贝壳松烯类四环二萜配糖体，其分子式为C38H60O18。甜菊苷的特色是资源丰富，还有报道可用于高血压、糖尿病的辅助治疗。目前甜菊苷产量超过5000吨，预计到2022年产值达到7.715亿美元。缺点是甜菊糖带有天然的轻微苦味或青草味，现有技术还无法完全去除或者掩盖，这使得饮料和食品行业还不敢轻易地完全用甜菊糖来简单替换白糖。罗汉果甜苷主要是罗汉果苷IV和罗汉果苷V，为葫芦烷类四环三萜配糖体，分子式分别为C54H92O24和C60H102O29。罗汉果为我国药食两用植物，我国具有丰富的植物来源，有悠久的应用传统。现代药理学研究发现,罗汉果甜苷具有降血糖、抗氧化、保肝、降脂减肥、润肠通便、抗炎和调节免疫等生理活性，具有较好的功能健康型大健康产品的基础。目前，罗汉果的种植规模已经超过12万亩，罗汉果甜苷产量已经超过400吨。原料局限于果实，且受种植环境限制，原料供应不足是目前限制全球罗汉果甜苷行业扩大规模的主要因素。甜茶苷与甜菊苷类似，是一种贝壳松烯类四环二萜配糖体，其分子式为C32H50O12，均由相同甙元组成，其区别仅在C13位上少接一分子葡萄糖。甜茶苷的优点是口感佳、味质好、对肥胖症、糖尿病、心血管病、高血压、动脉硬化、龋齿等患者有一定的辅助疗效。甜茶苷可以通过生物技术由甜菊苷制备，既消除了甜菊苷的后苦味，又获得了甜茶苷良好的口感。天然非糖甜味剂尚远未能满足人们的需求，新的功能性的天然非糖甜味剂如达玛烷型三萜类(Dammaranetriterpenoids)天然甜味剂更是人们梦寐以求的目标。目前也尚未见有茜草属植物华腺萼木Mycetiasinensis(Hemsl.)Craib中含有达玛烷型三萜皂苷且将作为甜味剂的相关报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供三例结构新颖的达玛烷三萜糖苷化合物及其制备方法和用途。本专利技术所述的达玛烷三萜糖苷化合物为具有下述式1-3所示结构的化合物或其药学上可接受的盐：上述式1所示结构的化合物的化学名称为：达玛-20(22)-烯-3，21-二醇-3-O-(β-D-吡喃葡萄糖基(1→2))-β-D-吡喃葡萄糖苷，英文名称：Dammar-20(22)-en-diol-3-O-(β-D-glucopyranyl-(1→2))-β-D-glucopyranoside。分子式为C42H72O14，[M-H]-799.48，[M+H]801.50，平均分子量801.01。理化性质如下：浅黄色无定型粉末，无臭，易溶于水，吡啶，可溶于甲醇、乙醇，难溶于丙酮、乙酸乙酯、氯仿、环己烷、石油醚。本申请中命名为达玛甜茶苷II(MycetiosideII)，在本申请中也称为化合物1。上述式2所示结构的化合物化学名称为：达玛-20(22)-烯-3，21-二醇-3-O-((β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6))-β-D-吡喃葡萄糖苷，英文名称：Dammar-20(22)-en-diol-3-O-((β-D-glucopyranyl-(1→2))-(β-D-glucopyranyl-(1→6))-β-D-glucopyranoside。分子式为C48H82O19，[M-H]-961.54，[M+H]963.55，平均分子量963.15。理化性质如下：浅黄色无定型粉末，无臭，易溶于水，吡啶，可溶于甲醇、乙醇，难溶于丙酮、乙酸乙酯、氯仿、环己烷、石油醚。本申请中命名为达玛甜茶苷III(MycetiosideIII)，在本申请中也称为化合物2。上述式3所示结构的化合物化学名称为：达玛-20(22)-烯-3，21-二醇-3-O-((β-D-吡喃葡萄糖基(1→2))-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6))-β-D-吡喃葡萄糖苷-21-O--β-D-吡喃葡萄糖苷，英文名称：Dammar-20(22)-en-diol-3-O-((β-D-glucopyranyl-(1→2))-(β-D-glucopyranyl-(1→6))-(β-D-glucopyranoside)-21-O-β-D-glucopyranoside。分子式为C54H92O24，[M-H]-1123.07，[M+H]1125.09，平均分子量1125.29。理化性质如下：浅黄色无定型粉末，无臭，易溶于水，吡啶，可溶于甲醇、乙醇，难溶于丙酮、乙酸乙酯、氯仿、环己烷、石油醚。本申请中命名为达玛甜茶苷IV(MycetiosideIV)，在本申请中也称为化合物3。本专利技术还提供上述达玛烷三萜糖苷化合物的制备方法，主要包括以下步骤：1)以茜草科茜草属植物华腺萼木(Mycetiasinensis(Hemsl.)Craib)的枝和/或叶为原料，获取其提取物；2)所得提取物上高速逆流色谱仪进行分离，分段收集流分，以UPLC-MS(超高效液相色谱-质谱联用仪)检识并合并流分，回收溶剂，分别得到白色粉末状逆流色谱纯化物A003、胶状逆流色谱纯化物A004和胶状逆流色谱纯化物A005；其中白色粉末状逆流色谱纯化物A003即为式1所示结构的化合物；其中，进行高速逆流色谱分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有下述式1-3所示结构的达玛烷三萜糖苷化合物或其药学上可接受的盐：/n

【技术特征摘要】
1.具有下述式1-3所示结构的达玛烷三萜糖苷化合物或其药学上可接受的盐：





2.权利要求1所述化合物的制备方法，主要包括以下步骤：
1)以茜草科茜草属植物华腺萼木(Mycetiasinensis(Hemsl.)Craib)的枝和/或叶为原料，获取其提取物；
2)所得提取物上高速逆流色谱仪进行分离，分段收集流分，以UPLC-MS检识并合并流分，回收溶剂，分别得到白色粉末状逆流色谱纯化物A003、胶状逆流色谱纯化物A004和胶状逆流色谱纯化物A005；其中白色粉末状逆流色谱纯化物A003即为式1所示结构的化合物；其中，
进行高速逆流色谱分离时的固定相和流动相为水与选自以下有机溶剂中的一种或两种以上的选择组成的、对达玛烷皂苷分配系数在0.2～10之间的两相体系：
酯类溶剂、醇类溶剂、酮类溶剂、醚类溶剂、卤代烃类溶剂、烷烃类溶剂、腈类溶剂、酸类溶剂；
3)所得胶状逆流色谱纯化物A004和胶状逆流色谱纯化物A005分别上反相色谱柱层析，以乙腈和水组成的混合溶剂作为流动相进行分离，分别得到式2所示结构的化合物和式3所示结构的化合物。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤1)中，以茜草科茜草属植物华腺萼木的枝和/叶为原料，以水和/或低碳醇为溶媒进行提取，获取华腺萼木的提取物。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的低碳醇为体积浓度为10-100％甲醇或体积浓度为10-100％乙醇。


5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中，
所述的酯类溶剂优选为选自醋酸乙酯、醋酸丁酯和醋酸戊酯中的一种或两种以上的组合；
所述的醇类溶剂优选为选...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢运昌，韦霄，秦惠珍，宁德生，潘争红，韦记青，李典鹏，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45