一种高纯度罗汉果苷V的提取方法技术

本发明专利技术提供一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，其包括如下步骤：冷冻高温预处理、常温超高压提取、ZTC‑II型澄清剂澄清、10微米C

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度罗汉果苷V的提取方法
本专利技术涉及天然植物提取领域，具体涉及一种高纯度罗汉果苷V的提取方法。
技术介绍
罗汉果是广西著名的特产之一，是葫芦科(Cucrubitaceae)罗汉果属植物[Siraitiagrosvenorii(Swingle)C.Jeffery]的成熟果实。在广西的永福、临桂、龙胜等县均有大面积种植，产量可观，是罗汉果进行对外贸易的主要供货来源之一。罗汉果的药用历史悠久，除用作配方外，还经常作为原料生产中成药产品陋3，是我国传统出口中药材之一。罗汉果中含有16种人体必需的微量元素及广泛元素，丰富的维生素C、维生素E，人体必需脂肪酸一亚油酸、油酸、棕榈酸等人体必需的营养成分，此外，还含有多种活性物质，例如黄酮、多糖、甜苷、多酚。罗汉果性凉味甘，无毒，在治疗咳嗽、咽炎、胃肠疾病等方面疗效显著。罗汉果中含有一种甜度极高的甜味物质-罗汉果甜苷V，实验证明罗汉果甜苷V不但食用安全，而且对血糖没有显著影响，可作为肥胖者及糖尿病患者的代用糖进行使用。同时，罗汉果甜苷V也已成为许多食品和营养品的原料，具有广阔的应用前景。2008年，美国可口可乐公司在新推出的两款饮料“清凉橙”和“清凉源”中均添加了罗汉果甜苷V。2011年，由中国莱茵和吉福斯两家公司生产的罗汉果甜苷提取物也通过了美国FDA的GRAS认证，成功打入美国市场。近年来，由于罗汉果甜苷应用的范围越来越广泛，对罗汉果甜苷提取物的需求量也在迅速的增长，由2007年的60吨猛增至2012年的150吨。罗汉果是我国传统的药食两用植物，含有多种活性成分，强甜味的非糖物质三萜类成分罗汉果甜苷(mogroside)是其主要的有效成分，其中罗汉果甜苷V的含量最为丰富。且因罗汉果甜苷V甜度高，热量低，色泽浅，水溶性及稳定性好，食用安全，1996年，我国批准该产品为食品添加剂，可作为甜味剂部分或全部代替蔗糖而广泛用于各类食品，尤其是作为肥胖病及糖尿病患者的代用糖。研究表明，罗汉果甜苷作为功能性高效甜味剂具有广泛的应用前景。由于罗汉果甜苷V的分离纯化技术不是很成熟，方法不是很完善，所以，市场上50％-90％含量甜苷V提取物价格分别高达4000元/kg和20000元/kg，因此在食品、保健品、日用健康用品领域仍无法与蔗糖竞争。现有技术中，专利号CN200910044558.9中提供了一种罗汉果苷V含量大于60％的罗汉果提取物生产方法：破碎→糖化→水提取→浓缩→沉降离心→离子交换树脂精制→大孔树脂精制→浓缩→氧化铝精制→浓缩→喷雾干燥→成品的工艺流程。该专利技术工艺路线长，在分离纯化环节需要大孔树脂、氧化铝串联精制，操作复杂，成本高。专利号CN200710049737.2中提供了罗汉果苷V≥40％,罗汉果苷≥98％的牛奶白色罗汉果提取物的制备方法：水提取-浓缩-酶解-大孔吸附树脂精制-离子交换树脂脱色-浓缩-喷雾干燥制得。该专利技术在分离纯化环节也需要大孔树脂吸附纯化，然后有机溶剂洗脱，操作复杂，溶剂有残留，成本高。为了改善这种局面，促进其甜味剂产业更好更快的发展，以解决在分离纯化中最为突出的问题。针对这这个问题，本专利技术进行了实验研究，试图建立一种罗汉果甜苷V的高效分离纯化技术。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的在于：针对罗汉果甜苷V纯度不高、收率较低等问题，提供一种高纯度罗汉果苷V的提取方法。本专利技术采用的技术方案如下：1)预处理：将原料罗汉果冷冻后立即进行瞬时高温加热；2)提取：以蒸馏水为提取溶剂，料液比为1：10～1：30g/mL，破碎，搅拌后转入在压力250～400KPa下浸提5～10min，离心取上清得到提取液；3)澄清：稀释提取液为提取原液浓度的0.5～0.8倍，加入ZTC-II型澄清剂，所述澄清剂A、B组分添加的体积比为0.5～0.8：1.8～3，添加量为1～4％，制得澄清液；4)纯化：以10微米C18制备柱对澄清液进行纯化，流速为20～30mL/min，进样量为1.5～3mL；洗脱条件为：25～35％乙腈、65～75％水；5)浓缩与干燥：过柱液浓缩、干燥，得罗汉果苷V；优选地，所述步骤1)的预处理步骤为：将原料罗汉果在-70℃～-50℃条件下冷冻10-30min后，立即在95℃～100℃条件下加热10～30秒；优选地，所述步骤2)中，所述的料液比为1：18g/mL；优选地，所述步骤2)中，所述的破碎后进行浸泡，浸泡条件为25～30℃，浸泡5～8h；优选地，所述步骤2)中，所述压力为350KPa，所述浸提时间为8min；优选地，所述步骤3)中，所述的稀释提取液为提取原液浓度的0.7倍；优选地，所述步骤3)中，所述的ZTC-II型澄清剂A、B组分添加的体积比为0.7：2.5，添加量为3％；优选地，所述步骤4)中，所述的纯化条件为：流速为25mL/min，进样量为2mL，洗脱条件为30％乙腈、70％水。优选地，所述步骤5)中，所述的浓缩采用单效、双效或三效浓缩器，所述干燥为微波干燥，控制真空压力-0.1～0.06MPa，干燥温度45～55℃，最终产品水分控制＜3％。综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：1.本专利技术利用超高压提取技术对罗汉果甜苷进行提取，超高压技术在提取罗汉果甜苷V天然活性成分方面具有对提取成分破坏小等特点，其提取甜苷V纯度高达99.9％，与传统的加热回流提取方法比较，显著提升提取效率，缩短提取时间，而且也节约能耗，实现连续化规模化生产。2.本专利技术采用对罗汉果水提液有良好澄清效果的ZTC-II型澄清剂，澄清效果好，产品纯度高。3.本专利技术通过乙腈-水体系洗脱得到了高纯度的罗汉果甜苷V，有机试剂残留低，产品安全环保，工艺简单，物美价廉，能够实现连续化大规模工业生产。具体实施方式为了更清楚地表达本专利技术，以下通过具体实施例对本专利技术作进一步说明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到，其中ZTC-II型天然澄清剂购于武汉正天成生物技术有限公司、罗汉果由桂林莱茵提供。实施例11)预处理：将原料罗汉果在-70℃条件下冷冻10min后，立即在95℃条件下加热10秒。2)提取：以蒸馏水为提取溶剂，料液比为1：10g/mL，破碎，破碎后进行浸泡，条件为25℃，浸泡5h，搅拌后转入聚乙烯塑料袋中，在压力250KPa下浸提5min后，离心取上清得到提取液。3)澄清：ZTC-II型天然澄清剂澄清溶液的配制：A组分1g，先用少量蒸馏水搅成糊状，然后加入需要量的去离子水，溶胀24h，搅拌，配成1％溶液；B组分lg，用少量1％醋酸溶液溶解，并搅拌成糊状，加入足够量的1％醋酸溶液，溶胀24h，搅拌，配成1％溶液。取水提液稀释或浓缩至罗汉果水提原液体积的0.5倍，水浴保温至40℃后，向先加入B组分，60r/min搅拌保温10min后，再加入A组分，ZTC-II本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1)预处理：将原料罗汉果冷冻后立即进行瞬时高温加热；/n2)提取：以蒸馏水为提取溶剂，料液比为1：10～1：30g/mL，破碎，搅拌后在压力250～400KPa下浸提5～10min，离心取上清得到提取液；/n3)澄清：稀释提取液为提取原液浓度的0.5～0.8倍，加入ZTC-II型澄清剂，所述澄清剂A、B组分添加的体积比为0.5～0.8：1.8～3，添加量为1～4％，制得澄清液；/n4)纯化：以10微米C

【技术特征摘要】
1.一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)预处理：将原料罗汉果冷冻后立即进行瞬时高温加热；
2)提取：以蒸馏水为提取溶剂，料液比为1：10～1：30g/mL，破碎，搅拌后在压力250～400KPa下浸提5～10min，离心取上清得到提取液；
3)澄清：稀释提取液为提取原液浓度的0.5～0.8倍，加入ZTC-II型澄清剂，所述澄清剂A、B组分添加的体积比为0.5～0.8：1.8～3，添加量为1～4％，制得澄清液；
4)纯化：以10微米C18制备柱对澄清液进行纯化，流速为20～30mL/min，进样量为1.5～3mL；洗脱条件为：25～35％乙腈、65～75％水；
5)浓缩与干燥：过柱液浓缩、干燥，得罗汉果苷V。


2.如权利要求1所述的一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，其特征在于，所述步骤1)的预处理步骤为：将原料罗汉果在-70℃～-50℃条件下冷冻10-30min后，立即在95℃～100℃条件下加热10～30秒。


3.如权利要求1所述的一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述的料液比为1：18g/mL。


4.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：粟月萍，胡婷婷，谢积鉴，钟雪梅，玉泉，陈怡玲，陈金平，李荣，卢琳玲，
申请(专利权)人：广西壮族自治区科学技术情报研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45