稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株及其构建和应用制造技术

本发明专利技术涉及稳定表达MAP3K8蛋白的PK‑15细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为PK‑15/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018262。该细胞株的制备包括以下步骤：目的基因MAP3K8的合成，重组慢病毒载体Lv‑MAP3K8的构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染PK‑15细胞，筛选培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的PK‑15细胞株。和野生型PK‑15细胞相比较，利用PK‑15细胞大量表达MAP3K8可以显著抑制FMDV或SVV的复制。该细胞株的建立为研究猪源细胞中MAP3K8基因功能及其背后的分子机制提供了生物材料。

Construction and application of PK-15 cell line stably expressing MAP3K8 protein

【技术实现步骤摘要】
稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株及其构建和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株及其构建和应用。
技术介绍
稳定细胞系（StableCellLine），是指质粒整合到染色体上后，用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系，就得到了稳定表达的细胞系。可将稳定表达外源DNA整合到宿主细胞染色体上，或者相当于附加子可持续存在，可使宿主细胞长期表达目的基因。慢病毒是逆转录病毒的一种，包括多种哺乳动物的免疫缺陷病毒。慢病毒感染细胞后能将基因整合到宿主细胞染色体上，并能稳定表达。因此，它常被改造为转基因的工具。在疾病治疗，转基因动物，动物疾病模型等方面发挥重要作用。慢病毒载体可以容纳较大的DNA片段，并可能感染多种处于分裂期和非分裂期细胞，该载体可以有效地将目的基因转入脑、肝脏、肌肉、视网膜等，不引起毒性或免疫反应。在细胞构建中可以将目的基因插入到慢病毒载体，通过慢病毒感染靶细胞将目的基因整合到靶细胞上，在细胞系构建中应用较多。随着动物转基因技术的不断进步和发展，转基因动物在家畜改良、医药卫生、生物制药等方面均具有广阔的应用前景。慢病毒载本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.稳定表达MAP3K8蛋白的PK‑15细胞株，其特征在于，该细胞株命名为PK‑15/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018262。

【技术特征摘要】
1.稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株，其特征在于，该细胞株命名为PK-15/MAP3K8，保藏编号为CCTCCNO:C2018262。2.权利要求1所述的PK-15细胞株在抑制FMDV或SVV复制中的应用。3.权利要求1所述的PK-15细胞株在猪源细胞中MAP3K8的基因功能及其分子机制的研究中的应用。4.稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株的构建方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤1：重组慢病毒载体Lv-MAP3K8的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑海学，张克山，郝军红，田宏，茹毅，李丹，朱紫祥，杨帆，刘湘涛，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62