癌症治疗方法和使用结合糖基化PD-L1的抗体的组合的疗法技术

提供了抗癌治疗和治疗方法，其中将相对于未糖基化PD‑L1特异性结合糖基化PD‑L1并阻断PD‑L1与PD‑1的结合的抗体与相对于非糖基化PD‑L1特异性结合糖基化PD‑L1的抗体组合施用于有需要的个体，阻断PD‑L1与PD‑1的结合，并促进PD‑L1的内化和降解。所述抗癌方法利用识别糖基化PD‑L1蛋白质上特定表位的抗体，以及表现出阻断PD‑L1与PD‑1结合且还促进表达PD‑L1的细胞上的PD‑L1的内化的IPD功能的抗体。其中此类抗体组合特别有用的方法包括癌症或肿瘤治疗和疗法，其中所述癌症或肿瘤是PD‑L1阳性癌症或肿瘤。

Cancer therapy and combination therapy with glycosylated PD-L1 antibody

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】癌症治疗方法和使用结合糖基化PD-L1的抗体的组合的疗法相关领域本文呈现的方法和治疗通常涉及分子生物学、医学和肿瘤学的领域。更具体地，提供了使用特异性结合糖基化免疫检查点蛋白质PD-L1的抗体、尤其是不同抗体的组合的癌症的疗法和治疗的方法。背景T-细胞活化的永久化已彻底改变广谱恶性癌症的治疗。例如，伊匹单抗(ipilimumab)(FDA首次批准的靶向T-细胞反应的检查点阻断)的发展使得转移性黑色素瘤的治疗是可能的(Hodi,F.S.等人,2010,NEJM,363:711-723；Robert,C.等人,2013,Clin.CancerRes.,19:2232-2239；和Robert,C.等人,2011,NEJM,364:2517-2526)。尽管抗细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)单克隆抗体显示在治疗黑色素瘤患者中有前景的结果，但靶向PD-1和PD-L1两者的第二代检查点抑制剂已证实在III期临床试验中更好的临床活性和安全性(Topalian,S.L.等人,2012,NEJM,366:2443-54；和Brahmer,J.R.等人,2012,NEJM,366:2455-2465)。因为PD-L1还具有诱发癌细胞进展的致癌潜力(Topalian,S.L.等人,同上；Page,D.B.等人,2014,Ann.Rev.Med.,65:185-202)。除了其免疫抑制活性外，靶向PD-1/PD-L1相互作用提供经由PD-1阻断免疫抑制作用同时经由PD-L1减慢细胞进展的双重疗效，且预期具有更敏感的结果(Topalian,S.L.等人，同上；Brahmer,J.R.等人，同上；和Hamid,O.,2013,NEJM,369:134-144)。在2014年，在美国仍有超过10项临床试验测试抗PD-L1和/或抗PD-1抗体的疗效(作为单一药剂或呈组合)(Page,D.B.等人，同上)。美国FDA已批准两种抗PD-1治疗性抗体用于治疗特定癌症，(派姆单抗(pembrolizumab))和(纳武单抗(nivolumab))。然而，PD-L1的病理生理功能和调节机制仍未被完整定义。最近，已将再觉醒沉默的免疫反应(具体而言效应子T-细胞)添加至治疗选项列表(包括外科手术移除、化学疗法、放射疗法和靶向疗法)。尽管最初证实使用抗CTLA-4单克隆抗体(Dunn,G.P.,等人,2002,Nat.Immunol.,3:991-998；和Leach,D.R.,等人,1996,Science,271:1734-1736)在治疗转移性黑色素瘤中取得成功，但其已显示还诱发自体免疫反应。不同于抗CTLA-4抗体(其仅影响免疫细胞)，抗PD-L1抗体和抗PD-1抗体在细胞水平和在肿瘤位点用于阻断表达PD-1的效应子T细胞与表达PD-L1的肿瘤细胞之间的相互作用。此产生来自肿瘤细胞和T-细胞两者的双重影响，由此限制不良效应且提供更好的治疗疗效(Okazaki,T.,等人,2013,Natureimmunology,14:1212-1218)。需要更好地理解PD-L1介导的免疫抑制和对肿瘤细胞的促致癌效应潜在的病理生理机制以开发靶向此途径的更稳健的治疗。仍需要成功地靶向PD-1/PD-L1途径并活化免疫系统的效应子细胞以攻击肿瘤细胞并治疗癌症的新颖且更有效的治疗和方法，特别是涉及抗体的那些。概述本专利技术人已发现表达于肿瘤细胞上的PD-L1(也称为CD274、PDCD1L1或B7-H1)的糖基化促进或增强结合表达于免疫效应子细胞(诸如T细胞)上的PD-1，由此增加T细胞活性抗肿瘤细胞的抑制作用。本专利技术人进一步发现PD-L1的糖基化可稳定细胞表面上的PD-L1表达，由此减小PD-L1的内化和胞内降解的速率。本专利技术人已鉴定了相对于未糖基化人PD-L1多肽优先结合糖基化人PD-L1多肽的抗体。如本文所用，优先结合糖基化人PD-L1的此类抗体被称为“抗糖基化PD-L1抗体”。如本文所述的某些抗糖基化PD-L1抗体也阻断PD-L1/PD-1相互作用并且还促进PD-L1在PD-L1表达细胞上的内化和细胞内降解；因此，这些抗体被称为“内化和促进降解”抗体或“IPD”抗糖基化PD-L1抗体。因此，提供了抑制PD-1/PD-L1结合并且促进PD-L1内化和降解的此类抗糖基化PD-L1抗体，并将其包括在所述的组合疗法中。本文提供了使用两种或更多种本文所述的抗糖基化PD-L1抗体的组合来治疗其细胞表达或过表达PD-L1的癌症、肿瘤和赘生物的方法。组合癌症治疗和治疗方法涉及将两种或更多种不同的如本文所述的抗糖基化PD-L1抗体(即，具有不同的结合特异性和/或与不同的表位结合)施用于具有或被鉴定为患有癌症、肿瘤或赘生物(优选地，其中所述细胞表达或过表达PD-L1，且更具体地，糖基化PD-L1)的个体。在某些实施方案中，2、3、4或5种不同的抗糖基化PD-L1抗体组合施用(或组合存在于药物组合物中)。在一个实施方案中，抗癌治疗涉及向有需要的个体施用两种抗糖基化PD-L1抗体的组合，其中两种抗体结合癌症、肿瘤或赘生物细胞的表面上的糖基化PD-L1并且相对于未糖基化PD-L1优先结合糖基化PD-L1，并且其中至少一种抗体也是如本文所述或根据本文所述的方法(例如，实施例1)产生的IPD抗糖基化PD-L1抗体。在某些实施方案中，两种抗糖基化PD-L1抗体均为IPD抗糖基化PD-L1抗体。如本文所述的抗糖基化PD-L1抗体抑制或阻断PD-1与PD-L1间的相互作用。因此，这些抗糖基化PD-L1抗体抑制源自于PD-1/PD-L1相互作用的免疫抑制并促进表达PD-1的效应子T-细胞针对表达PD-L1的肿瘤细胞的细胞毒性活性的永久化。通过抑制PD-1/PD-L1相互作用和减低肿瘤细胞表面上糖基化PD-L1的浓度，所述的抗糖基化PD-L1抗体可增强效应子T-细胞反应并介导抗肿瘤活性。IPD抗糖基化PD-L1抗体还通过促进细胞表面表达的PD-L1的内化和降解来降低肿瘤细胞上PD-L1的水平。在某些实施方案中，IPD抗糖基化PD-L1抗体结合为非线性、构象表位的PD-L1表位。另外，并在不受理论约束下，抗糖基化PD-L1抗体结合含有PD-L1的三维结构或在PD-L1的三维结构中接近糖基化氨基酸的PD-L1表位；PD-L1的此类糖基化区被认为尤其参与PD-L1/PD-1相互作用。通过结合PD-L1的糖基化区中的表位氨基酸，所述的抗糖基化PD-L1抗体可有效地用于掩蔽或中和糖基化PD-L1蛋白质的参与PD-L1/PD-1相互作用和/或参与肿瘤细胞表面上PD-L1表达的稳定化的结合位点或区。与单独的抗糖基化PD-L1抗体相比，两种或更多种抗糖基化PD-L1抗体(包括一种或多种IPD抗糖基化PD-L1抗体)的组合可以表现出累加或协同活性。如本文所用，术语肿瘤、癌症和赘生物可互换使用。除非另作指明，否则如本文所用的“PD-L1”是指PD-L1蛋白质、多肽或肽，具体而言人PD-L1(其氨基酸序列为SEQIDNO:1)；且“PD-1”是指PD-1蛋白质、多肽或肽，具体而言人PD-1。本专利技术人发现人PD-L1在胞外结构域中的四个位点，于人PD-L1蛋白质(例如，如SEQIDNO:1中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.治疗有需要的个体中的PD‑L1‑阳性癌症、肿瘤或赘生物的方法，其包括向具有PD‑L1阳性癌症、肿瘤或赘生物的个体施用有效量的第一和第二分离的抗体的组合，其中所述第一抗体相对于未糖基化PD‑L1选择性结合糖基化PD‑L1，并且抑制糖基化PD‑L1与PD‑1的结合；并且其中所述第二抗体是这样的抗体，其相对于未糖基化PD‑L1选择性结合糖基化PD‑L1，抑制糖基化PD‑L1与PD‑1的结合，并促进PD‑L1在肿瘤细胞上的内化和降解。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.07.20 US 62/364,4411.治疗有需要的个体中的PD-L1-阳性癌症、肿瘤或赘生物的方法，其包括向具有PD-L1阳性癌症、肿瘤或赘生物的个体施用有效量的第一和第二分离的抗体的组合，其中所述第一抗体相对于未糖基化PD-L1选择性结合糖基化PD-L1，并且抑制糖基化PD-L1与PD-1的结合；并且其中所述第二抗体是这样的抗体，其相对于未糖基化PD-L1选择性结合糖基化PD-L1，抑制糖基化PD-L1与PD-1的结合，并促进PD-L1在肿瘤细胞上的内化和降解。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一分离的抗体在施用第二分离的抗体的同时、之前或之后施用于个体。3.权利要求1或权利要求2的方法，其中所述第一和第二分离的抗体是重组工程改造的、嵌合的或人源化的。4.权利要求1至3中任一项的方法，其中所述第一和第二分离的抗体结合糖基化PD-L1，其Kd小于所述抗体结合未糖基化PD-L1表现出的Kd的一半。5.权利要求4的方法，其中所述第一和第二分离的抗体结合糖基化PD-L1，其Kd比所述抗体结合未糖基化PD-L1表现出的Kd小至少10倍。6.权利要求5的方法，其中所述第一和第二分离的抗体以5-20nM的亲和力结合糖基化PD-L1。7.权利要求1至4中任一项的方法，其中在细胞流式细胞术测定法中，通过荧光标记物直接或间接可检测的第一和/或第二分离的抗体优先结合表达糖基化PD-L1的细胞，其测量的荧光强度(MFI)比所述抗体结合表达未糖基化PD-L1的细胞表现出的MFI高2倍至10倍。8.权利要求7的方法，其中所述第一和/或第二分离的抗体优先结合表达糖基化PD-L1的细胞，其MFI比所述抗体结合表达未糖基化PD-L1的细胞表现出的MFI高3倍至5倍。9.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体特异性结合糖基化PD-L1的表位，所述表位包含SEQIDNO:1的氨基酸Y56、K62和K75中的至少一个。10.权利要求1至9中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体特异性结合糖基化PD-L1的表位，所述表位包含SEQIDNO:1的氨基酸H69、S80、Y81、Y112、R113、K162、K124和S169中的至少一个。11.权利要求10的方法，其中所述表位包含SEQIDNO:1的区域V68至V128内或区域L74至Q173内的氨基酸。12.权利要求1至9中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体特异性结合糖基化PD-L1的表位，所述表位包含SEQIDNO:1的氨基酸Y112、R113和S117中的至少一个。13.权利要求12的方法，其中所述表位包含SEQIDNO:1的区域D108至V128内的氨基酸。14.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体特异性结合由单克隆抗体(MAb)STM004或MAbSTM115识别的PD-L1的表位。15.权利要求1至14中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体与MAbSTM004或MAbSTM115竞争或交叉竞争与糖基化PD-L1的特异性结合。16.权利要求1至15中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体是MAbSTM004或MAbSTM115的人源化或嵌合形式。17.权利要求16的方法，其中所述第一分离的抗体是MAbSTM004的人源化或嵌合形式。18.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体特异性结合由MAbSTM073或MAbSTM108识别的PD-L1的表位。19.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体与MAbSTM073或MAbSTM108竞争或交叉竞争与糖基化PD-L1的特异性结合。20.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体是MAbSTM073或MAbSTM108的人源化或嵌合形式。21.权利要求20的方法，其中所述第二分离的抗体是MAbSTM073的人源化或嵌合形式。22.权利要求20的方法，其中所述第二分离的抗体是MAbSTM108的人源化或嵌合形式。23.权利要求1至8中任一项的方法，其中抗体组合包含作为MAbSTM004的人源化或嵌合形式的第一分离的抗体，和作为MAbSTM108的人源化或嵌合形式的第二分离的抗体。24.权利要求1至8中任一项的方法，其中抗体组合包含作为MAbSTM004的人源化或嵌合形式的第一分离的抗体，和作为MAbSTM073的人源化或嵌合形式的第二分离的抗体。25.权利要求1至8中任一项的方法，其中抗体组合包含作为MAbSTM004的人源化或嵌合形式的第一分离的抗体，和作为MAbSTM073的人源化或嵌合形式和MAbSTM108的人源化或嵌合形式的第二分离的抗体。26.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体包含MAbSTM004或MAbSTM115的重链可变(VH)结构域或轻链可变(VL)结构域。27.权利要求1至8或26中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体包含MAbSTM073或MAbSTM108的VH结构域或VL结构域。28.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体包含来自MAbSTM004或MAbSTM115的重链CDR1-3和/或轻链CDR1-3。29.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体包含来自MAbSTM073或MAbSTM108的重链CDR1-3和/或轻链CDR1-3。30.权利要求1至29中任一项的方法，其中所述第一和第二分离的抗体具有人抗体框架区。31.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:3或SEQIDNO:19的氨基酸序列。32.权利要求1至8或31中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体的VL结构域具有SEQIDNO:11或SEQIDNO:27的氨基酸序列。33.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:44或SEQIDNO:60的氨基酸序列。34.权利要求1至8或33中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体的VL结构域具有SEQIDNO:52或SEQIDNO:68的氨基酸序列。35.权利要求1至8或30至34中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:3的氨基酸序列且所述VL具有SEQIDNO:11的氨基酸序列。36.权利要求1至8或30至34中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:19的氨基酸序列且所述VL具有SEQIDNO:27的氨基酸序列。37.权利要求1至8或30至36中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:44的氨基酸序列且所述VL具有SEQIDNO:52的氨基酸序列。38.权利要求1至8或30至36中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体的VH结构域具有SEQIDNO:60的氨基酸序列且所述VL结构域具有SEQIDNO:68的氨基酸序列。39.权利要求16至38中任一项的方法，其中所述第一和第二分离的抗体包含人恒定结构域。40.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体具有包含具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的CDRH1、具有SEQIDNO:6的氨基酸序列的CDRH2和具有SEQIDNO:8的氨基酸序列的CDRH3的VH结构域，或包含具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的CDRH1、具有SEQIDNO:7的氨基酸序列的CDRH2和具有SEQIDNO:9的氨基酸序列的CDRH3的VH结构域。41.权利要求1至8或40中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体具有包含具有SEQIDNO:45的氨基酸序列的CDRH1、具有SEQIDNO:47的氨基酸序列的CDRH2和具有SEQIDNO:49的氨基酸序列的CDRH3的VH结构域，或包含具有SEQIDNO:46的氨基酸序列的CDRH1、具有SEQIDNO:48的氨基酸序列的CDRH2和具有SEQIDNO:50的氨基酸序列的CDRH3的VH结构域。42.权利要求1至8或40中任一项的方法，其中所述第一分离的抗体具有包含具有SEQIDNO:12的氨基酸序列的CDRL1、具有SEQIDNO:14的氨基酸序列的CDRL2和具有SEQIDNO:16的氨基酸序列的CDRL3的VL结构域。43.权利要求1至8或41中任一项的方法，其中所述第二分离的抗体具有包含具有SEQIDNO:53的氨基酸序列的CDRL1、...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·S·刘，MC·黄，CW·李，SO·林，
申请(专利权)人：斯特库比股份有限公司，得克萨斯大学体系董事会，
类型：发明
国别省市：韩国,KR