LNT、LNnT和其岩藻糖基化衍生物的生物技术生产制造技术

本发明专利技术主要涉及体内合成乳糖基‑N‑四糖(LNT)和乳糖基‑N‑新四糖(LNnT)和它们的岩藻糖基化衍生物的遗传工程化微生物，并涉及所述微生物在产生乳糖基‑N‑四糖和乳糖基‑N‑新四糖和它们的岩藻糖基化衍生物的方法中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及体内合成乳糖基-N-四糖(lacto-N-tetrose；LNT)和乳糖基-N-新四糖(lacto-N-neotetrose；LNnT)和它们的岩藻糖基化衍生物的遗传修饰微生物，并涉及这类微生物在产生乳糖基-N-四糖和乳糖基-N-新四糖和它们的岩藻糖基化衍生物的方法中的用途。认为人乳汁在健康的婴儿发育中具有重要作用。存在于其中的低聚糖(人乳汁低聚糖(HMO))是乳汁的主要组分之一，并且它们的核心结构具有在还原性末端处的乳糖单元并且以分支或链样方式续以N-乙酰基乳糖胺单位。末端位置处的岩藻糖基修饰或唾液酰基修饰额外地扩展了结构变异性。乳糖基-N-四糖(LNT)是具有以下结构的化学式N-[(2S,3R,4R,5S,6R)-2-{[(2R,3S,4S,5R,6S)-3,5-二羟基-2-(羟甲基)-6-{[(2R,3S,4R,5R)-4,5,6-三羟基-2-(羟甲基)氧杂环己-3-基]氧基

【技术保护点】
用于体内合成乳糖基‑N‑四糖或乳糖基‑N‑新四糖的遗传修饰微生物，所述微生物包含(i)编码β1,3‑N‑乙酰葡糖胺基转移酶的第一转基因，和(ii)编码β1,3‑半乳糖基转移酶或编码β1,4‑半乳糖基转移酶的第二转基因。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.14 EP 14176958.8;2014.12.18 EP 14198960.81.用于体内合成乳糖基-N-四糖或乳糖基-N-新四糖的遗传修饰微生物，所述微生物包含(i)编码β1,3-N-乙酰葡糖胺基转移酶的第一转基因，和(ii)编码β1,3-半乳糖基转移酶或编码β1,4-半乳糖基转移酶的第二转基因。2.根据权利要求1所述的遗传修饰微生物，所述微生物额外地经遗传修饰，从而抑制LacZ和LacA的表达。3.根据权利要求2所述的遗传修饰微生物，其中(i)第一转基因已经整合入LacZYA基因座并且微生物包含进一步的编码LacY的转基因。4.根据权利要求3所述的遗传修饰微生物，其中编码LacY的转基因已经整合入FucIK基因座。5.根据权利要求1至4中任一项所述的遗传修饰微生物，所述微生物包含进一步的编码UDP-糖焦磷酸酶的转基因。6.根据权利要求1至5中任一项所述的遗传修饰微生物，所述微生物额外地经遗传修饰，从而抑制UDP-葡萄糖4-差向异构酶的表达。7.根据权利要求1至6中任一项所述的遗传修饰微生物，其中一个或两个、或一个、多个或全部转基因是染色体整合的。8.根据权利要求1至7中任一项所述的遗传修饰微生物，所述微生物包含进一步的编码具有L-岩藻糖激酶活性和L-岩藻糖-1-磷酸鸟苷酸转移酶活性的双功能酶的转基因和至少一个编码能够α1,2-岩藻糖基化、α1,3-岩藻糖基化或α1,4-岩藻糖基化的酶的转基因。9.根据权利要求8所述的遗传修饰微生物，其中编码具有L-岩藻糖激酶活性和L-岩藻糖-1-磷酸鸟苷酸转移酶活性的所述双功能酶的转基因是染色体整合的，并且至少一个编码能够α1,2-岩藻糖基化、α1,3-岩藻糖基化或α1,4-岩藻糖基化的酶的转基因在质粒载体上表达。10.根据权利要求8所...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·鲍姆格特纳，G·A·施普伦格，C·阿尔贝曼，
申请(专利权)人：巴斯夫欧洲公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE