The invention provides a chicken blood cell antioxidant peptide and its enzymolysis preparation method. The method includes the following steps: (1) preparation of blood cells; (2) hemolytic rupture of membrane; (3) proteolysis; (4) ultrafiltration, removal of weak active large molecular protein, the filtrate contains chicken blood cell antioxidant peptide, and the amino acid sequence of the antioxidant peptide, such as SEQ ID NO:1 or 2, is shown. The antioxidant peptides provided with strong radical scavenging activity have strong scavenging effect on free radicals such as DPPH free radical and superoxide anion, and have high reductive ability. Their antioxidant capacity is comparable to glutathione, and has important value in the development and application of antioxidant activity.
【技术实现步骤摘要】
鸡血球抗氧化肽及其酶解制备方法
本专利技术涉及动物源性抗氧化肽
,具体地说,涉及一种鸡血球抗氧化肽及其酶解制备方法。
技术介绍
我国是畜牧养殖大国,家禽年出栏量已超过110亿羽,位居世界前三位。通常而言,每屠宰一只家禽约可收集0.1kg血液,则粗估家禽血液产量高达110万吨。由此可见,我国血液资源丰富,具有广阔的应用前景。作为肉类加工行业的主要副产物,血液本身营养价值高,蛋白质含量高达20%左右,必需氨基酸(Lys、Leu等)含量高,其营养价值可与畜禽胴体中6%~7%的瘦肉相媲美,素有“液态肉”、“养血之玉”的美誉。除营养特性外,血液经酶解后的水解液具有一定的生物学活性,如抗氧化、阿片样、调节免疫、抗菌、ACE抑制和缓激肽增强等作用。目前市场上血液产品多是以血粉、血豆腐、血球蛋白粉等初级加工形式存在,利用率较低,深加工技术落后,致使大量营养资源流失,并造成环境污染。此外,现有的生产加工技术多关注传统营养产品的制取,而对血球蛋白的分子资源挖掘不够,产品的功能性未得到充分发挥。因此,寻求适宜的加工处理方式,深度开发利用家禽血液的功能特性,对蛋白质资源的高值化利用与生态环境的可持续发展有重大意义。抗氧化活性肽(antioxidative/antioxidantpeptide)是指生物体内源性的或由蛋白质降解后生成的且具有抗氧化活性的肽类物质。因其分子量较小(通常由2~20个氨基酸组成)、结构简单而较易被吸收。抗氧化肽具有抑制、延缓脂质过氧化并清除体内过剩自由基的作用,可有效保护机体免受自由基侵害,因此当机体内自由基过剩且自身无法及时清除时,摄入适量抗氧化肽 ...
【技术保护点】
鸡血球抗氧化肽的酶解制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备血球;(2)溶血破膜;(3)蛋白酶解;(4)超滤,去除3kDa及3kDa以上的蛋白分子,所得滤过液中含有鸡血球抗氧化肽;其中,步骤(3)蛋白酶解所用蛋白酶选自胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶中的至少一种。
【技术特征摘要】
1.鸡血球抗氧化肽的酶解制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备血球;(2)溶血破膜;(3)蛋白酶解;(4)超滤,去除3kDa及3kDa以上的蛋白分子,所得滤过液中含有鸡血球抗氧化肽;其中,步骤(3)蛋白酶解所用蛋白酶选自胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶中的至少一种。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备血球:采集鸡血,加入占血液总重量0.6%-0.8%的抗凝剂,采用连续离心法将鸡血分离为血浆和血球;(2)溶血破膜:向血球中加入盐酸溶液和去离子水,得到血球稀释液,并将血球稀释液置于恒温反应器中,进行破膜处理;(3)蛋白酶解:在破膜处理后的血球稀释液中加入有机酸溶液或碱溶液调节pH至所选蛋白酶的最佳酶解pH,然后加入所选蛋白酶,并在最佳酶解温度下进行酶解;酶解反应结束后,加热使蛋白酶变性失活,终止反应;最后将酶解后的溶液离心,收集上清液;其中,所述血球稀释液中蛋白浓度为4-10%;(4)超滤:将酶解液过超滤膜,收集滤过液;在步骤(4)之后,还包括以下步骤(5):(5)分离纯化:将步骤(4)中收集的滤过液上样于离子交换色谱柱,用洗脱液进行洗脱,收集具有抗氧化活性的洗脱峰;利用SephadexG-25凝胶色谱或SuperdexPeptideHR10/30预装柱进一步分离,用洗脱液进行洗脱,收集抗氧化活性最强的洗脱峰;然后利用反相高效液相色谱进一步分离,乙腈洗脱,收集抗氧化活性最强的洗脱峰,冷冻干燥即得鸡血球抗氧化肽。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述盐酸溶液浓度为0.05-1.0mol/L,血球与盐酸溶液的体积比为3:2,加入去离子水使血球浓度维持在4-10%,将血球...
【专利技术属性】
技术研发人员:张日俊,郑召君,李仲玄,黄燕,
申请(专利权)人:中国农业大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。