【技术实现步骤摘要】
本申请属于植物育种领域，具体地，本申请提供了一种快速筛选紫花苜蓿耐寒种质的方法。
技术介绍
1、紫花苜蓿(medicago sativa l.)是豆科苜蓿属、异花授粉、同源四倍体的多年生优良牧草，营养丰富、适口性好，有“牧草之皇后”的美称。目前栽培的苜蓿品种多为群体品种，品种内部任何两粒种子之间都可能存在较大的遗传差异。在我国，苜蓿人工种植区域绝大部分位于北方，这与苜蓿喜凉怕热的生长习性有关；但我国北方纬度高，海拔高，冬季寒冷，时间长，全年积温少，秋眠级偏高耐寒性差的苜蓿品种容易出现冻伤甚至冻死，从而不能顺利越冬或越冬率低，导致产量严重下降的现象。因此选育耐寒紫花苜蓿新品种，提高紫花苜蓿的耐寒性对其育种及其生产应用至关重要。紫花苜蓿品种内部丰富的遗传差异也为进一步筛选耐寒性更强的植株提供了保证。
2、aba(abscisic acid)是一种植物激素，广泛分布于高等植物。其具有使叶子脱落，对细胞的延长也有抑制作用。研究表明，在逆境下，植物在叶片中积累更多的aba,aba可以促进气孔关闭，增强水分平衡，诱导抗氧化防御系统减轻氧化损伤。此外，aba可以通过一系列的信号转导途径和hsp和cbf的诱导激活植物的多种细胞反应，促进植物对冷胁迫的耐受性。因此，aba对紫花苜蓿耐寒性具有一定的调节作用。
3、培育高耐寒苜蓿品种是我国苜蓿育种的重要目标。前人主要基于越冬返青后进行田间筛选。虽已培育出龙牧、公农等耐寒苜蓿系列，但育种周期长、耐寒性提升有限。因此，亟需建立快速的苜蓿耐寒育种技术体系。
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1、本专利技术针对于对苜蓿耐寒生理及分子机制的理解，应用一定浓度的植物激素aba在苜蓿种子萌发期进行筛选对aba敏感和耐aba的植株，从而分离得到耐寒性更强的苜蓿种质。该方法具有快速、精准的特点。
2、一方面，本申请提供了一种快速筛选紫花苜蓿耐寒种质的方法，所述方法中挑选可以在aba条件下萌发的种质作为耐寒种质。
3、进一步地，所述方法包括
4、(1)种子前处理步骤；
5、(2)aba条件处理步骤；
6、(3)筛选步骤。
7、进一步地，所述步骤(2)包括将种子摆放至装有1-2层滤纸的发芽盒中，所述滤纸以10-20μm的aba浸湿；培养2-5日。
8、进一步地，所述滤纸以1μm，10-50μm的aba浸湿。
9、进一步地，在25℃光照培养箱中培养3-5日。
10、进一步地，所述光照培养箱中的光周期14h光照/8h黑暗。
11、进一步地，步骤(3)在10-50μm aba浸湿的滤纸上萌发的种子苗作为耐寒种质；在1μm的aba浸湿的滤纸上培养5日明显吸涨但不萌发的种子，转移到不含aba的湿润滤纸上发芽的苜蓿种子苗为aba敏感型种质。
12、进一步地，所述步骤(1)中将紫花苜蓿种子用次氯酸钠溶液消毒处理后无菌水洗涤。
13、进一步地，所述步骤(1)中将紫花苜蓿种子用20％的次氯酸钠溶液消毒处理20min，无菌水洗涤5次。
14、另一方面，本申请提供了上述方法在紫花苜蓿育种中的应用。
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1.一种快速筛选紫花苜蓿耐寒种质的方法，其特征在于，所述方法中挑选能在ABA处理浓度条件下萌发的种质作为耐寒种质。
2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括：
3.根据权利要求2所述的方法，所述步骤(2)包括将种子摆放至装有1-2层滤纸的发芽盒中，所述滤纸以10-50μM的ABA浸湿，培养2-5日筛选获得的发芽种子苗为ABA不敏感材料；在1μM的ABA浸湿的滤纸上培养5日明显吸涨不萌发的种子，转移到不含ABA的湿润滤纸上发芽的苜蓿种子苗为ABA敏感型材料。
4.根据权利要求3所述的方法，所述滤纸以10-50μM的ABA浸湿，筛选ABA不敏感材料；1μM的ABA浸湿的滤纸上，筛选ABA敏感型材料。
5.根据权利要求3或4所述的方法，，在25℃光照培养箱中培养3日。
6.根据权利要求5所述的方法，所述光照培养箱中的光周期14h光照/8h黑暗。
7.根据权利要求2所述的方法，步骤(3)为选择萌发的种质作为耐寒种质。
8.根据权利要求2所述的方法，所述步骤(1)中将紫花苜蓿种子用次氯酸钠溶液消毒处理后无
9.根据权利要求8所述的方法，所述步骤(1)中将紫花苜蓿种子用20％的次氯酸钠溶液消毒处理20min，无菌水洗涤5次。
10.根据权利要求1-9任一项所述的方法在紫花苜蓿育种中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种快速筛选紫花苜蓿耐寒种质的方法，其特征在于，所述方法中挑选能在aba处理浓度条件下萌发的种质作为耐寒种质。
2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括：
3.根据权利要求2所述的方法，所述步骤(2)包括将种子摆放至装有1-2层滤纸的发芽盒中，所述滤纸以10-50μm的aba浸湿，培养2-5日筛选获得的发芽种子苗为aba不敏感材料；在1μm的aba浸湿的滤纸上培养5日明显吸涨不萌发的种子，转移到不含aba的湿润滤纸上发芽的苜蓿种子苗为aba敏感型材料。
4.根据权利要求3所述的方法，所述滤纸以10-50μm的aba浸湿，筛选aba不敏感材料；1μm的aba浸湿...
【专利技术属性】
技术研发人员：张万军，阚美菱，刘燕蓉，张康宁，刘亚玲，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：
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