基因重组伊卡因及其制备方法技术

一种能特异性活化凝血酶原的改良伊卡因蛋白；及利用基因修饰技术产生这种蛋白的方法，该方法包括：１）培养一种转化体，所述转化体通过用表达载体转化微生物或动物细胞来构建，所述表达载体携带整合在启动子下游的编码伊卡因的基因，收集培养基或转化体中产生并积累的伊卡因；２）将收集并回收的含伊卡因溶液纯化得到纯化的伊卡因。依据该方法，可以在实践中在工业规模上生产改良的伊卡因蛋白。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种新型多肽。更具体地说，本专利技术涉及一种特异性活化凝血酶原的基因重组伊卡因(ecarin)及所述基因重组伊卡因的制备方法。
技术介绍
一些动物具有强效毒液，如蛇毒、蜘蛛毒、蝎毒和蜂毒。研究表明，这些毒液实际上包含一些有用的物质，包括神经毒素、出血毒素、血栓毒素、生理活性肽、细胞生长因子等。伊卡因是一种从锯鳞蝰(Echis carinatus)分离的蛇毒来源蛋白酶(T.Morita等，J.Biochem.83，559-570，1978)，可特异性地活化凝血酶原。S.Nishida等(Biochemistry，34，1771-1778，1995)克隆了编码伊卡因的cDNA以揭示其结构。伊卡因(一种糖蛋白)是一种金属蛋白酶，成熟的伊卡因共有426个氨基酸残基，有一个包含螯合Zn2+的镶嵌结构、单链蛇毒多肽域和富含Cys域，和RVV-X(拉塞蝰蛇毒X激活子)的H链具有61％的同源性。伊卡因是一种与Xa因子截然不同的酶，因为它的酶活性可以被EDTA灭活，而不能被DFP或抗凝血酶III灭活。伊卡因活化的靶底物之一，即凝血酶原是凝血酶的前体，而凝血酶是多种血液凝固因子之一。活本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基因重组伊卡因，它可通过切割Ａｒｇ－Ｉｌｅ位点将前凝血酶－２转化为α－凝血酶或将凝血酶原转化为间凝血酶。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：米村宏，今村隆幸，中武博，副岛见事，野崎周英，
申请(专利权)人：财团法人化学及血清疗法研究所，
类型：发明
国别省市：JP[日本]