【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物技术的蛋白质表达领域。特别涉及氨基葡萄糖苷抗性基因,尤指新霉素抗性基因,在实现动物细胞的高密度生长中的应用,以及蛋白质生产方法及高密度细胞培养物。生物技术上以动物细胞培养方式生产治疗用蛋白质是一项非常费力且昂贵的工作。包括下游加工之生产效率主要系受到最初细胞培养步骤之空间-时间产率支配。自当希望同时使培养物肉汤中之产物蛋白达到高产率及高浓度。结果,在进入工业规模细胞培养之生产稳定期前使最大细胞密度达到较少量增加,将可希望使总产量增加,此仅因为于此方式中加入大量细胞总数。强硬地视细胞种类及培养方法而定,习知适用于高密度生长之补料-分批培养系统例如气升式反应器并无法使生长中不含血清的细胞培养物达到或甚至高于107细胞/毫升的密度。有可能于补充血清之补料-分批培养系统或于最近之灌输反应器系统中达到较高密度。但是,该二种选择皆留下严重的缺点。经补充以胎牛血清的培养基包含所有天然生长促进物质,其强烈依赖血清来源品质且(最重要的)具有无心地将动物病毒导入生产供医疗应用之治疗性蛋白质的培养物中的永久性危机。因此基于调节性理由,须避免血清补充。然而,灌输反 ...
【技术保护点】
一种蛋白质表达法,其特征在于,所述方法包括将经氨基葡萄糖苷抗性基因转染且能够表达第二产物蛋白,优选为重组型产物蛋白,的动物细胞在不含血清的高密度生长培养基中生长至存活细胞密度达至少或高于10↑[6]个细胞/毫升,优选为至少或高于10↑[7]个细胞/毫升的步骤,并进一步包括将所述产物蛋白自该培养物肉汤单离的步骤。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员:默罕穆德阿尔卢比尔,A皮拉尼,A拉切尔,J伯奇,
申请(专利权)人:英国龙沙生物医药股份有限公司,默罕穆德阿尔卢比尔,
类型:发明
国别省市:GB[英国]
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