一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法及其应用，将scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ核苷酸合成，将融合基因片段插入慢病毒表达载体，包装成携带scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ编码基因的慢病毒，将感染单核细胞诱导的免疫细胞，得到抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞，提高嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的安全性，控制毒副作用，避免不良反应的发生。

Preparation and application of an immune cell modified by anti EGFR safe chimeric antigen receptor

The invention discloses a preparation method and application of an anti EGFR safety type chimeric antigen receptor immune cells, scFv (EGFR) CD8 CD137 CD3 T2A Leader CD20 zeta CD8 CD3 zeta nucleotide synthesis, the fusion gene was inserted into the lentiviral expression vector carrying scFv package (EGFR) CD8 CD137 CD3 T2A Leader CD20 zeta CD8 CD3 zeta gene encoding lentiviral infection, the mononuclear cells induced by immune cells, safe anti EGFR chimeric antigen receptor immune cells, improve the safety of chimeric antigen receptor in immune cells, virus control side effects, avoid the occurrence of adverse reactions.

【技术实现步骤摘要】
一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法及其应用
本专利技术涉及生物基因领域，更具体的说，是一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法及其应用。
技术介绍
EGFR(epidermalgrowthfactorreceptor)是原癌基因c-erbB1的表达产物，是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一。EGFR作为一种细胞表面蛋白，表达于正常上皮细胞表面，而在许多类型癌细胞的表面异常高水平表达，如肾癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等组织。EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。由此可见，EGFR与多种癌症密切相关，是肿瘤靶向治疗和诊断的理想靶位之一。嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimericantigenreceptorTcells,简称CAR-T细胞)在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治疗上有着显著的疗效，被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一，在其它实体瘤的治疗中，如利用间皮素作为靶点构建的CAR-T成功的用于胰腺癌的治疗，也显示了良好的应用前景。但CAR-T细胞在临床应用中可能产生针对正常组织细胞的误攻击，或由于大量释放炎本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法，其特征在于：将scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ核苷酸合成，将合成的scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ融合基因片段插入慢病毒表达载体，包装成携带scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ编码基因的慢病毒，将所述携带scFv(EGFR)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑Leader‑CD20‑CD8‑CD3ζ编码基因的慢病毒感染单核细胞诱导的免疫...

【技术特征摘要】
1.一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法，其特征在于：将scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ-T2A-Leader-CD20-CD8-CD3ζ核苷酸合成，将合成的scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ-T2A-Leader-CD20-CD8-CD3ζ融合基因片段插入慢病毒表达载体，包装成携带scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ-T2A-Leader-CD20-CD8-CD3ζ编码基因的慢病毒，将所述携带scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ-T2A-Leader-CD20-CD8-CD3ζ编码基因的慢病毒感染单核细胞诱导的免疫细胞，得到抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞。2.如权利要求1所述的一种抗EGFR安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法，其特征在于：将scFv(EGFR)-CD8-CD137-CD3ζ-T2A-Leader-CD20-CD8-CD3ζ核苷酸合成时，其中CD20与抗EGFR的嵌合抗原受体基因作为两个独立的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明录，王立新，韩庆梅，王亮，万磊，金海锋，刘敏，张传鹏，强邦明，
申请(专利权)人：山东兴瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37