一种NK细胞冻存液的冻存方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种NK细胞冻存液的冻存方法及其应用，属于细胞冻存技术领域，所述NK细胞冻存液包括DMSO、PBS缓冲液、羟乙基淀粉溶液；所述DMSO在NK细胞冻存液中的体积分数为2.8‑3.2%；所述NK细胞冻存液的冻存方法为使用添加了IL‑15和IL‑18的完全培养基对活化后的NK细胞进行培养，离心，清洗，配制NK细胞冻存液并使用NK细胞冻存液重悬至预设细胞浓度，降温冷冻，在液氮中保存。本发明专利技术使用的NK细胞冻存液为通用型NK细胞冻存液，本发明专利技术的冻存方法的冻存效果好，能够即时使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞冻存，具体涉及一种nk细胞冻存液的冻存方法及其应用。

技术介绍

1、nk细胞（自然杀伤细胞）是人体免疫系统中一种重要的先天免疫细胞，具有强大的免疫监视和细胞毒性功能，能够识别并杀死肿瘤细胞、病毒感染细胞等异常细胞，且无需预先致敏，可快速响应病原体入侵。目前nk细胞应用主要包括自体nk细胞和异体nk细胞两种形式，大量临床实验证明，自体nk细胞治疗在肿瘤治疗中虽有一定的治疗效果，且无明显毒副作用，但随着年龄的增长，人体内的nk细胞数量会逐渐减少，活性也会降低，尤其对老年人或免疫力低下的患者来说，可能无法满足治疗需求，且自体nk的制备过程需要经过分离扩增步骤，耗时较长，对于紧急治疗的患者来说，可能不是最佳选择。异体nk细胞临床应用的主要形式为新鲜制剂，虽然新鲜制剂的细胞活性更高，但因其活细胞的特性造成其有效期短、无法即时使用，且存在产品检测结果滞后等问题。因此，研究一种冻存效果更好、即时使用的异体nk细胞冷冻保存液迫在眉睫。

2、但是现有的nk细胞冷冻液的基础成分包括渗透性保护剂（常见的渗透性保护剂包括dmso、甘油等）、非渗透性保本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种NK细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，使用添加了IL-15和IL-18的完全培养基对活化后的NK细胞进行培养，离心，清洗，使用NK细胞冻存液重悬至预设细胞浓度，降温冷冻，在液氮中保存；

2.根据权利要求1所述的NK细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，所述PBS缓冲液为1×PBS缓冲液，pH为7.2-7.6；

3.根据权利要求1所述的NK细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，所述羟乙基淀粉溶液的配制方法为：将羟乙基淀粉溶于氯化钠注射液中；

4.根据权利要求1所述的NK细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，人血清白蛋白在NK细胞冻存液中的浓度为38-42mg...

【技术特征摘要】

1.一种nk细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，使用添加了il-15和il-18的完全培养基对活化后的nk细胞进行培养，离心，清洗，使用nk细胞冻存液重悬至预设细胞浓度，降温冷冻，在液氮中保存；

2.根据权利要求1所述的nk细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，所述pbs缓冲液为1×pbs缓冲液，ph为7.2-7.6；

3.根据权利要求1所述的nk细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，所述羟乙基淀粉溶液的配制方法为：将羟乙基淀粉溶于氯化钠注射液中；

4.根据权利要求1所述的nk细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，人血清白蛋白在nk细胞冻存液中的浓度为38-42mg/ml；

5.根据权利要求1所述的nk细胞冻存液的冻存方法，其特征在于，所述添加了il-15和il-18的完全培养基中il-15的浓度为9.5-10...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明录，冯建海，王立新，徐阳，强邦明，金海锋，张传鹏，许淼，
申请(专利权)人：山东兴瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：