靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法技术

本发明专利技术提供靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法，属于医用配制品技术领域；所述制备方法包括确定突变多肽、突变多肽的初筛、筛选高亲和性肽段、整合得到新生抗原多肽、获得免疫原性强的新生抗原多肽、合成mRNA、制得mRNA疫苗。本发明专利技术可以针对肿瘤患者测序获取突变多肽，筛选得到高亲和的新生抗原多肽，进一步筛选获得免疫原性强的新生抗原多肽，然后采取特定的连接方式，将新生抗原多肽进行连接，制备个性化肿瘤mRNA疫苗；所述mRNA疫苗能够刺激CD8+T细胞，使其IFN‑γ、TNF‑α表达上调，且刺激后的CD8+T细胞能够杀伤肿瘤细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及靶向肝肿瘤个性化mrna疫苗及其制备方法，属于医用配制品。

技术介绍

1、肿瘤疫苗作为近年来的研究热点，是根据癌症病人肿瘤细胞特有的肿瘤新生抗原定制的治疗性抗癌疫苗，利用肿瘤抗原引发机体内以细胞免疫为主的肿瘤免疫反应。癌症疫苗主要包括细胞疫苗、dna疫苗、mrna疫苗、多肽疫苗等。mrna疫苗技术是最新的第三代疫苗技术，其注入机体后，在细胞质中翻译，无需进入细胞核，克服了dna疫苗递送系统难题，也不存在整合性突变风险。该技术不仅能全面诱导体液免疫与细胞免疫应答，还可激活免疫应答佐剂，同时具有研发快、产量高、成本低和更容易实现多联多价设计优点，已成为癌症免疫治疗的重要平台。

2、mrna编码新抗原引领个性化疫苗发展，个性化新抗原疫苗是以基因测序为基础，针对每位患者不同突变位点的、包含多个位点的、个体化的“高级定制”疫苗。其制备的4个基本步骤是获取肿瘤组织和正常细胞、推定新肿瘤抗原、确定新表位和制备疫苗。但是都不涉及肿瘤新抗原的筛选优化，基本都是根据软件直接推定的。

3、如cn106645677a涉及肿瘤新生抗原特异性t细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括确定突变多肽、突变多肽的初筛、筛选高亲和性肽段、整合得到新生抗原多肽、获得免疫原性强的新生抗原多肽、合成mRNA、制得mRNA疫苗；所述获得免疫原性强的新生抗原多肽的方法为将新生抗原多肽合成后，利用试剂盒测试其免疫原性，选取免疫斑点数比阳性对照多的新生抗原多肽，即为免疫原性强的新生抗原多肽。

2.根据权利要求1所述的靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法，其特征在于：所述合成mRNA的方法为将免疫原性强的新生抗原多肽按照免疫斑点数从多到少的顺序连接合成mRNA。

3.根据权利要求1所述的靶向肝...

【技术特征摘要】

1.靶向肝肿瘤个性化mrna疫苗的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括确定突变多肽、突变多肽的初筛、筛选高亲和性肽段、整合得到新生抗原多肽、获得免疫原性强的新生抗原多肽、合成mrna、制得mrna疫苗；所述获得免疫原性强的新生抗原多肽的方法为将新生抗原多肽合成后，利用试剂盒测试其免疫原性，选取免疫斑点数比阳性对照多的新生抗原多肽，即为免疫原性强的新生抗原多肽。

2.根据权利要求1所述的靶向肝肿瘤个性化mrna疫苗的制备方法，其特征在于：所述合成mrna的方法为将免疫原性强的新生抗原多肽按照免疫斑点数从多到少的顺序连接合成mrna。

3.根据权利要求1所述的靶向肝肿瘤个性化mrna疫苗的制备方法，其特征在于：所述确定突变多肽的方法为将肿瘤患者的肿瘤组织和健康血液进行测序比对，确定突变位点，突变类型包括单核苷酸变异、插入/缺失突变；对于单核苷酸变异导致的氨基酸突变，在突变位点前后各添加非突变氨基酸得到突变多肽；对于插入/缺失突变产生的移码肽，在整段移码肽的n端添加非突变氨基酸得到突变多肽。

4.根据权利要求3所述的靶向肝肿瘤个性化mrna疫苗的制备方法，其特征在于：所述突变多肽的初筛方法为对单核苷酸变异得到的突变多肽进行mhc i和mhc ii亲和性分析预测，选择mhc i和...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明录，李书红，张传鹏，王立新，金海锋，许淼，韩庆梅，冯建海，强邦明，
申请(专利权)人：山东兴瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：