一种NK细胞体外培养方法技术

本发明专利技术公开了一种NK细胞体外培养方法，包括NK细胞提取和NK细胞培养的方法，所述NK细胞提取和NK细胞培养的方法包括下述步骤：1)抽取病人的外周血分装在红盖管和绿盖管内，所述红盖管与率盖管各盛有60ml外周血；2)向绿盖管的血液中加入悬浮液，轻轻摇动混合均匀，向离心管里加入细胞分离液，将离心管放入离心机进行离心操作，离心结束后将白膜层取出，放于一个新的离心管中；3)向取出的白膜层中加入细胞洗液，用吸管吹打数次，吹打匀后，放入离心机离心内，离心结束，弃上清。通过取用病人本体外周血液中的细胞，有效防止细胞排异性的发生，提高治疗过程的安全性，通过在体外大量培养NK细胞，便于对病人进行治疗。

An in vitro culture of NK cells

The invention discloses a method for culturing NK cells in vitro, including NK cell extraction and NK cell culture method, the NK cell extraction and NK cell culture comprises the following steps: 1) peripheral blood samples were collected from patients in the red and green packaging cover tube cover tube, the tube and the red cover rate the cover tube filled with peripheral blood 60ml; 2) to join the green cover suspension tube in the blood, gently shaking evenly mixed to centrifugal tube add cell separation, centrifugal tube into the centrifuge centrifugal operation, centrifugal after the albuginea removed, placed in a new centrifuge tube; 3) added to the cell fluid albuginea removed, with Straw at several times, and evenly into the centrifuge, the centrifugal end of supernatant. By taking the cells from the peripheral blood of patients, we can effectively prevent the occurrence of cell exclusion and improve the safety of the treatment process. We can cultivate NK cells in vitro to facilitate the treatment of patients.

【技术实现步骤摘要】
一种NK细胞体外培养方法
本专利技术涉及人类细胞培养
，具体为一种NK细胞体外培养方法。
技术介绍
自然杀伤细胞(naturalkillercell，NK)是机体重要的免疫细胞，是机体抵抗肿瘤和病毒感染的第一道防线，不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。在杀伤靶细胞的过程中，NK细胞可以非特异性识别靶细胞，并且不受主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)的限制，对多种肿瘤细胞有迅速杀伤和溶解作用。但是正常人体外周血中的NK细胞数量较少，仅占外周血淋巴细胞的10％～20％。因此，获得高质量高纯度的NK细胞成为其临床应用最为关键的问题之一。目前，随着生物治疗临床应用的广泛开展，NK细胞治疗取得了一定的临床疗效。目前，体外培养的NK细胞具有排异性，不能对任何病人使用，在对病人进行治疗时，具有一定的安全风险，对病人的生命安全造成影响。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种NK细胞体外培养方法，通过取用病人本体外周血液中的细胞，有效防止细胞排异性的发生，提高治疗过程的安全性，通过在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种NK细胞体外培养方法，包括NK细胞提取和NK细胞培养的方法，其特征在于：所述NK细胞提取和NK细胞培养的方法包括下述步骤：1)抽取病人的外周血分装在红盖管和绿盖管内，所述红盖管与率盖管各盛有60ml外周血；2)向绿盖管的血液中加入悬浮液，轻轻摇动混合均匀，向离心管里加入细胞分离液，将离心管放入离心机进行离心操作，离心结束后将白膜层取出，放于一个新的离心管中；3)向取出的白膜层中加入细胞洗液，用吸管吹打数次，吹打匀后，放入离心机离心内，离心结束，弃上清，再次向白膜层中加入细胞洗液，放入离心机离心内，完成操作；4)向离心好的细胞中加入细胞接种液，用电动助吸器吹打数次，吹打匀后，转入准备好的培养...

【技术特征摘要】
1.一种NK细胞体外培养方法，包括NK细胞提取和NK细胞培养的方法，其特征在于：所述NK细胞提取和NK细胞培养的方法包括下述步骤：1)抽取病人的外周血分装在红盖管和绿盖管内，所述红盖管与率盖管各盛有60ml外周血；2)向绿盖管的血液中加入悬浮液，轻轻摇动混合均匀，向离心管里加入细胞分离液，将离心管放入离心机进行离心操作，离心结束后将白膜层取出，放于一个新的离心管中；3)向取出的白膜层中加入细胞洗液，用吸管吹打数次，吹打匀后，放入离心机离心内，离心结束，弃上清，再次向白膜层中加入细胞洗液，放入离心机离...

【专利技术属性】
技术研发人员：于修鑑，
申请(专利权)人：广州金晟生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44