一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法技术

本发明专利技术公开了一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，包括以下步骤：S1，取肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞按数目比例1:1‑1:20混合；S2，加入共培养基，所述共培养基中至少包括TIL细胞培养基和MNC细胞培养基；S3，置于37℃、CO2培养箱培养；S4，每天计数，补液，维持细胞密度1×10

【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法
本专利技术属于抗肿瘤效应细胞培养领域，具体涉及一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法。
技术介绍
肿瘤免疫治疗是通过调动宿主的天然防卫机制或给予某些生物制剂以取得抗肿瘤效应，根据作用机制分三类：主动性免疫治疗(肿瘤疫苗)、过继性治疗免疫和非特异性免疫调节剂。过继性免疫治疗通过分离自体或异体淋巴细胞，经过体外激活并回输，消除肿瘤，过继性细胞治疗的关键在于产生数量足够、能够识别肿瘤抗原的效应细胞。1922年，MacCarty提出了肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfiltratingLymphocyte，TIL)的概念，在此之后肿瘤浸润淋巴细胞就持续成为了人们最为热衷关注的一类抗癌效应细胞。研究集中在肿瘤浸润淋巴细胞针对不同种类肿瘤的作用效果。对于肿瘤浸润淋巴细胞的体外增殖鲜有报道。CN102174469A公开了一种有效培养肿瘤浸润淋巴细胞的方法。从患者胸腹水或肿瘤组织中提取单个核细胞，洗涤后接种到重组人纤维蛋白和聚类分化群3抗体包被的培养瓶中，培养24小时后，加入白介素Ⅱ，之后每隔2-3天用含白介素Ⅱ、胸腹水上清的无血清培养基扩瓶、传代培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，取肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞按数目比例1:1‑1:20混合；S2，加入共培养基，所述共培养基中至少包括TIL细胞培养基和MNC细胞培养基；S3，置于37℃、CO2培养箱培养；S4，每天计数，补液，维持细胞密度1×10

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，取肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞按数目比例1:1-1:20混合；S2，加入共培养基，所述共培养基中至少包括TIL细胞培养基和MNC细胞培养基；S3，置于37℃、CO2培养箱培养；S4，每天计数，补液，维持细胞密度1×105/ml-1×107/ml；S5，培养10-20天，离心收获细胞。2.如权利要求1所述的肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，其特征在于，所述S1步骤中的肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞的混合数目比例为1:10。3.如权利要求1所述的肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，其特征在于，所述S2步骤中的共培养基包括TIL-b培养基和AIM-V(invitrogen)培养基；所述TIL-b培养基的基本培养基为RPMI-1640培养基，所述RPMI-1640培养基添加有以下终浓度的溶质：10％人源血清、25mMHEPES、6000U/mlIL-2、0.055mMβ-巯基乙醇。4.如权利要求3所述的肿瘤浸润淋巴细胞与单个核细胞共培养方法，其特征在于，所述TIL-b培养基和AIM-V(invitrogen)培养基的体积百分比分别为10-90％和9...

【专利技术属性】
技术研发人员：李霞云，潘新，贺伟，刘世红，卢家堃，
申请(专利权)人：北京世纪劲得生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11