NK细胞培养液和细胞培养方法技术

本申请属于细胞技术领域，具体涉及细胞培养液和细胞培养方法及其应用。本发明专利技术提供的细胞培养液，包括：培养液A和培养液B，所述培养液A中包含OKT3、CD16、IL‑2、IL‑15和4‑1BBL等细胞因子，所述培养液B中包含IL‑2、IL‑15和4‑1BBL等细胞因子。本发明专利技术还提供了一种细胞培养方法，包括：将细胞接种于培养液A中培养，隔天补充所述培养液A；培养至第9天时补充培养液B继续培养，隔天补充所述培养液B。本发明专利技术优化了细胞因子组合和培养工艺流程，不仅缩短了培养周期，使培养只需14‑21天，而且培养得到的NK细胞纯度达到70％以上；本发明专利技术方法无需对NK细胞进行纯化，步骤简便，可操作性强。

NK cell culture medium and cell culture method

The utility model belongs to the technical field of cells, in particular to a cell culture medium and a cell culture method and the application thereof. The invention provides a cell culture fluid, medium A and medium B, the culture medium contained in A OKT3, CD16, IL, IL 2 15 and 4 cytokines such as 1BBL, the culture medium contained in B IL 2, IL 15 and 4 1BBL cells factor. The invention also provides a cell culture method, including: the cells were seeded in culture medium A, the next day the medium added A; after ninth days of culture medium added B to culture, the supplement the medium B. The invention optimizes the combination of cytokines and training process, not only shorten the training period, the training is only 14 for 21 days, and the purity of the cultured NK cells reached more than 70%; the method of the invention does not need to NK cells were purified, simple process, strong operability.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞
，具体涉及NK细胞培养液和细胞培养方法。
技术介绍
肿瘤，又称为癌症，是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞异常增生而形成的新生物，常表现为局部肿块。肿瘤细胞具有异常的形态、代谢和功能，它生长旺盛，常呈持续性不受机体控制的生长，最终破坏机体各器官的正常功能从而导致机体死亡。肿瘤不是人类特有疾病，几乎所有动物(除个别物种)均可以形成肿瘤，甚至一部分植物也会得“癌症”，因此肿瘤是高等物种间具有通性的疾病。肿瘤具有发病率高、隐蔽性强及致死率高等特点，随着全球人口不断增长与老龄化的加剧，癌症已经成为人类健康的第一杀手。《2015全球癌症统计》数据显示，2012年全球约有1410万新发肿瘤患者，有820万肿瘤患者死亡，其中肺癌发病率为180万，占癌症发病人数的13％，是癌症中诊断率最高的病种，也是全球男性、发达国家女性癌症死亡率最高的病种。根据全国肿瘤登记中心发布的《2015年中国肿瘤登记年报》数据：2011年我国新增癌症病例约337万例，比2010年增加28万例——这相当于每分钟就有6个人得癌。人类发现肿瘤已有三千年以上的历史，现代肿瘤治疗学先后实现了三次革命本文档来自技高网...

【技术保护点】
细胞培养液，其特征在于，包括：培养液A，所述培养液A包含OKT3、CD16、IL‑2、IL‑15、4‑1BBL和基础培养基。

【技术特征摘要】
1.细胞培养液，其特征在于，包括：培养液A，所述培养液A包含OKT3、CD16、IL-2、IL-15、4-1BBL和基础培养基。2.根据权利要求1所述的细胞培养液，其特征在于，所述OKT3、CD16、IL-2、IL-15和4-1BBL在所述培养液A中的终浓度依次为：0-500ng/mL、0-500ng/mL、0-1000U/mL、0-500ng/mL和0-500U/mL。3.根据权利要求1所述的细胞培养液，其特征在于，所述OKT3、CD16、IL-2、IL-15和4-1BBL在所述培养液A中的终浓度依次为：50ng/mL、50ng/mL、100U/mL、50ng/mL和50U/mL。4.根据权利要求1所述的细胞培养液，其特征在于，还包括：培养液B，所述培养液B包含IL-2、IL-15、4-1BBL和基础培养基；其中，所述IL-2、IL-15和4-1BBL在所述培养液B中的终浓度依次为：0-1000U/mL、0-500ng/mL和0-500U/mL。5.根据权利要求4所述的细胞培养液，其特征在于，所述IL-2、IL-15和4-1BBL在所述培养液B中的终浓度依次为：100U/mL、50ng/mL和50U/mL。6.根据权利要求1-5任意一项所述的细胞培养液，其特征在于，所述基础培养基为NK细胞无血清培养基。7.一种细胞培养方法，其特征在于，包括：将细胞接种于培养液A中培养，隔天补充所述培养液A；培养至第9天时补充培养液B继续培养，隔天补充所述培养液B...

【专利技术属性】
技术研发人员：许澎，
申请(专利权)人：湖南丰晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43