一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法技术

本发明专利技术涉及一种毛囊干细胞分离培养技术，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：S1，分离小鼠毛囊组织；所述小鼠为出生24小时内的小鼠；S2，酶解消化组织；S3，差速贴壁筛选毛囊干细胞；S4，小鼠毛囊干细胞的培养和传代。该方法综合了显微分离技术、酶解法、差速贴壁筛选法，比传统的毛囊干细胞分离方法更适用于小鼠毛囊组织的分离提取，来获取纯度更高、活性更好，干性更强的小鼠毛囊干细胞。干性更强的小鼠毛囊干细胞。

A method for isolation and culture of mouse hair follicle stem cells

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法


[0001]本专利技术涉及一种毛囊干细胞分离培养技术，属于生物


技术介绍

[0002]干细胞是一类具备自我复制能力和多向分化潜能的细胞，在特定条件下，它可能分化成多种功能细胞。干细胞存在于多种组织细胞中，能够通过特定分化和自我更新再生成新的组织。干细胞的特性为许多疾病的治疗提供了新的方向，相对于传统的药物治疗，干细胞的功能更强大，且副作用小，因此在临床医学上有着重要的意义。
[0003]毛囊干细胞就是成体干细胞的一种，位于毛囊外根鞘的隆突区(bulge区)，能分化成表皮、皮脂腺、毛囊等皮肤相关组织的形成细胞。毛囊干细胞的研究为表皮创伤修复、皮肤组织工程、秃发机制研究等，提供了重要的理论依据。除此之外，毛囊干细胞也可以定向诱导成其他组织细胞如泌尿系统组织，相关研究为毛囊干细胞在新的领域奠定了基础。因此获取高质量的毛囊干细胞是一切研究的根本条件。
[0004]目前毛囊干细胞的分离方法主要运用到显微分离法、差速贴壁筛选法、酶解法、免疫磁珠法。显微分离法指的是在体视显微镜下分离出目的组织，差速本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1，分离小鼠毛囊组织；所述小鼠为出生24小时内的小鼠S2，酶解消化组织；S3，差速贴壁筛选毛囊干细胞；S4，小鼠毛囊干细胞的培养和传代；其中，所述S1，分离小鼠毛囊组织的方法为：S11，剪取小鼠触须皮肤组织，放入组织暂存液，置于冰上；S12，酒精洗涤触须皮肤组织，组织清洗液浸泡；S13，在体式显微镜下解剖出完整的毛囊组织，加入组织暂存液，置于冰上。2.根据权利要求1所述的一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述S1，分离小鼠毛囊组织的方法为：S11，剪取小鼠触须皮肤组织，放入离心管中，加入组织暂存液，离心管置于冰上；S12，触须皮肤组织使用75％酒精漂洗3次，每次30秒，使用组织清洗液再次浸泡3次，每次2
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3分钟；S13，将触须部组织修剪成0.5cm
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0.5cm大小，在体式显微镜下剪除上端毛干及毛球部，解剖出完整的毛囊组织，放入离心管中，加入组织暂存液，离心管置于冰上。3.根据权利要求1或2所述的一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述组织暂存液为DMEM基础培养基、5％青链霉素、50μg/ml庆大霉素的混合；所述组织清洗液为PBS、5％青链霉素、50μg/ml庆大霉素的混合。4.根据权利要求1所述的一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述S2，酶解消化组织的方法为：S21，中性蛋白酶消化；S22，胰蛋白酶与乙二胺四乙酸钠消化。5.根据权利要求1或4所述的一种小鼠毛囊干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述S2，酶解消化组织的方法为：S21，中性蛋白酶消化：用DMEM基础培养基漂洗毛囊组织，...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡清云，刘彩云，
申请(专利权)人：湖南丰晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：