一种增强型CIK细胞的培养液及其培养方法技术

本发明专利技术提供了一种增强型CIK细胞的培养液及培养方法，所述培养液包括基础培养液和营养物质，其中营养物质由自体血清、人血白蛋白和三磷酸腺苷组成。本发明专利技术避免了胎牛血清的应用，减少外源致热源、致敏原污染几率。一方面三磷酸腺苷在水解时，给细胞提供生长能量，另一方面自体血清中含有大量细胞生长需要的营养物质，而且可以提供游离的铁离子，与三磷酸腺苷一起协同调节CIK细胞的增殖效率。而白蛋白可以保持CIK细胞的活性，提高培养细胞的存活率，适合临床治疗应用。本发明专利技术方法简单，成本低，具有很强的实用性。

Culture medium of an enhanced CIK cell and its culture method

The invention provides an enhanced CIK cell culture medium and a culture method, wherein the culture medium comprises a basic culture medium and a nutrient substance, wherein the nutrient substance is composed of autologous serum, Human Albumin and adenosine triphosphate. The invention avoids the application of fetal bovine serum and reduces the risk of exogenous heat source and allergen pollution. On the one hand, adenosine triphosphate can provide growth energy to cells when hydrolyzed. On the other hand, autologous serum contains a large number of nutrients needed for cell growth, and it can provide free iron ions and synergy with ATP to regulate the proliferation efficiency of CIK cells. Albumin can maintain the activity of CIK cells and improve the survival rate of cultured cells, which is suitable for clinical treatment. The invention has the advantages of simple method, low cost and strong practicability.

【技术实现步骤摘要】
一种增强型CIK细胞的培养液及其培养方法
本专利技术涉及细胞免疫治疗领域，具体地说是一种增强型CIK细胞的培养液及其培养方法。
技术介绍
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller，CIK)，是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等)共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由于该种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，故又被称为NK细胞样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点，可用于任何一期的肿瘤患者，是一种广泛应用的肿瘤免疫治疗手段。这种细胞对肿瘤细胞的精确识别杀伤能力很强(不损伤正常的细胞)，尤其对手术后或放化疗后的患者治疗效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止肿瘤细胞扩散和复发，并能提高机体免疫力。CIK细胞能通过体外诱导而得以扩增，常规的CIK制备方法是将分离的外周血单个核细胞(PBMC)用含有IFN-γ的培养液预处理后，再加入CD3mAb(CD3单克隆抗体)、IL-1α和IL-2因子进行刺激诱导，最终获得一定数量的CIK细胞。但最终获得的CIK细胞的增殖倍数本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强型CIK细胞的培养液，其特征在于：所述培养液包括基础培养液和营养物质，其中营养物质由自体血清、人血白蛋白和三磷酸腺苷组成。

【技术特征摘要】
1.一种增强型CIK细胞的培养液，其特征在于：所述培养液包括基础培养液和营养物质，其中营养物质由自体血清、人血白蛋白和三磷酸腺苷组成。2.根据权利要求1所述的增强型CIK细胞的培养液，其特征在于：所述营养物质中，自体血清占培养液的体积百分数为5-10％，人血白蛋白占培养液的体积百分数为5-10％，三磷酸腺苷的浓度为10-1000U/ml。3.根据权利要求1所述的增强型CIK细胞的培养液，其特征在于：所述基础培养液为GT-T551无血清培养基。4.一种利用权利要求1-3中任一项所述培养液的增强型CIK细胞培养方法，其步骤包括：(1)提取并分离单个核细胞；(2)将单个核细胞用培养液进行诱导培养，并加入细胞因子得到诱导液，诱导液中细胞密度为(2-8)×106个/ml；(3)每隔3-5天向诱导液中补充培养液和细胞因子，使诱导液中细胞密度维持在(1-4)×106个/ml；(4)7-21天后收集CIK细胞。...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈里新，张祥林，朱毅，
申请(专利权)人：斯坦曼生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31