一种增强型CIK细胞的培养方法技术

本发明专利技术提供了一种增强型CIK细胞的培养方法，除了按照常规培养方法进行之外，还在诱导培养时，以及每隔3‑5天均加入了细胞因子IL‑15，IL‑15与IL‑2和培养液协同效应，使本发明专利技术方法培养7‑21天后得到的CIK细胞中有效细胞含量(即CD3

A culture method of enhanced CIK cells

The present invention provides an enhanced CIK cell culture method, except in accordance with the conventional culture method, was induced when cultured for 5 days, and every 3 were added cytokines IL 15, IL 15 and IL 2 and medium synergistic effect, effective cell content according to the method of 7 training 21 days later obtained CIK cells (i.e. CD3

【技术实现步骤摘要】
一种增强型CIK细胞的培养方法
本专利技术涉及细胞免疫治疗领域，具体地说是一种增强型CIK细胞的培养方法。
技术介绍
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller，CIK)，是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等)共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由于该种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，故又被称为NK细胞样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点，可用于任何一期的肿瘤患者，是一种广泛应用的肿瘤免疫治疗手段。这种细胞对肿瘤细胞的精确识别杀伤能力很强(不损伤正常的细胞)，尤其对手术后或放化疗后的患者治疗效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止肿瘤细胞扩散和复发，并能提高机体免疫力。CIK细胞能通过体外诱导而得以扩增，常规的CIK制备方法是将分离的外周血单个核细胞(PBMC)用含有IFN-γ的培养液预处理后，再加入CD3mAb(CD3单克隆抗体)、IL-1α和IL-2因子进行刺激诱导，最终获得一定数量的CIK细胞。但最终获得的CIK细胞的增殖倍数和细胞毒活性都不是很本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强型CIK细胞的培养方法，其步骤包括：(1)提取并分离单个核细胞；(2)将单个核细胞用培养液进行诱导培养，并加入细胞因子得到诱导液，诱导液中细胞密度为(2‑8)×10

【技术特征摘要】
1.一种增强型CIK细胞的培养方法，其步骤包括：(1)提取并分离单个核细胞；(2)将单个核细胞用培养液进行诱导培养，并加入细胞因子得到诱导液，诱导液中细胞密度为(2-8)×106个/ml；(3)每隔3-5天向诱导液中补充培养液和细胞因子，使诱导液中细胞密度维持在(1-4)×106个/ml；(4)7-21天后收集CIK细胞。2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：所述步骤(2)中按照50-2000U/ml加入细胞因子IFN-γ进行预处理。3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：所述预处理后间隔16-36小时，再向培养液中添加细胞因子CD3mAb、IL-1α和IL-2进行诱导培养，其中CD3mAb的添加量为10-100ng/ml，IL-1α的添加量为50-2000U/ml，IL-2的添...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈里新，张祥林，朱毅，
申请(专利权)人：斯坦曼生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31