一种软骨细胞的培养方法技术

本申请属于细胞技术领域，具体涉及一种软骨细胞的培养方法。本发明专利技术公开的一种软骨细胞的培养方法，包括：a)将软骨细胞接种到三维支架上，开启循环压力控制系统，进行培养；b)培养3～5天后，更换新鲜的无血清培养液并添加莱菔硫烷进行培养。本发明专利技术同时采用无血清培养液和循环压力控制系统对软骨细胞进行了三维培养，并在培养过程中添加莱菔硫烷，不仅避免了含血清培养基的动物源性成分带来的干扰，还减少细胞分化，促进细胞增殖。经过实验检测，本发明专利技术培养的软骨细胞所分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖的含量高于现有技术下培养得到的软骨细胞，同时Ⅰ型胶原的含量低于现有技术，表明本发明专利技术技术方案优于现有技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞
，具体涉及一种软骨细胞的培养方法。
技术介绍
软骨是有软骨细胞和细胞外基质组成的无血管组织，软骨细胞是关节软骨中唯一的细胞类型，其主要功能是通过分泌II型胶原(typeIIcollagen)及蛋白多糖(aggrecan，Acan)等保持关节软骨的功能，在正常生理条件下，软骨细胞的合成和分解代谢维持着动态平衡。而软骨细胞主要依靠关节的运动和挤压吸收营养物质，无血液供应，细胞代谢缓慢，所以软骨损伤后自我修复能力比较弱，受损关节软骨的修复一直以来都是医学界的难题之一。现有软骨缺损的治疗方法中，反映较好的一种疗法是自体软骨细胞移植(ACI)，将正常软骨细胞在体外进行定向(细胞)培养后，再移植至机体内的软骨损伤处。然而，在体外培养过程中由于失去了机体内特定的增殖环境以及本身细胞的全能性因素，软骨细胞体外培养出现了增殖速度较慢并伴随细胞退化的现象，使得体外培养的软骨细胞回植后常常形成纤维软骨，使得软骨的机械性能下降，导致进行透明软骨修复的效果达不到预期，成为影响受损关节软骨治疗的一个主要问题。因此，研发出一种软骨细胞的培养方法，用于解决现有技术中增殖速度较慢并伴随细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种软骨细胞的培养方法，其特征在于，包括：a)将软骨细胞接种到三维支架上，开启循环压力控制系统，进行培养；b)培养3～5天后，更换新鲜的无血清培养液并添加莱菔硫烷进行培养。

【技术特征摘要】
1.一种软骨细胞的培养方法，其特征在于，包括：a)将软骨细胞接种到三维支架上，开启循环压力控制系统，进行培养；b)培养3～5天后，更换新鲜的无血清培养液并添加莱菔硫烷进行培养。2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述无血清培养液包含：基础培养基、血清替代物和生长因子。3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述基础培养基为DMEM培养基。4.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述生长因子包含：碱性成纤维生长因子、转化生长因子、血小板衍生生长因子、转录因子E2F-1、表皮生长因子、骨形成蛋白和转录因子bHLH。5.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述血清替代物包含：层粘连蛋白和大豆蛋白酶抑制剂。6.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述无血清培养液中所述生长因子由20μg/L碱性成纤维生长因子、20μg/L转化生长因子、12μg/L血小板衍生生长因子、0.5μg/L转录因子E2F-1、20μg/L表皮生长因子、12μg/L骨形成蛋白和0....

【专利技术属性】
技术研发人员：葛啸虎，陈海佳，王一飞，应杰，张维敏，
申请(专利权)人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44