用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物、含有该引物的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物、含有该引物的试剂盒及其应用。本发明专利技术针对鸡白痢沙门氏菌的特异性片段，设计了一种用于特异性扩增鸡白痢沙门氏菌的引物，并建立了一种能够直接从粪便、鸡蛋和鸡肉样品中检测鸡白痢沙门氏菌的PCR检测方法，该方法特异性好、灵敏度高、检测时间短，可以快速准确的检测出鸡白痢沙门氏菌，与22种其他常见致病性沙门氏菌血清型和8种常见非沙门氏菌致病菌的扩增结果均为阴性，并且可以很好的区分大肠埃希氏菌。本发明专利技术的提出为鸡白痢沙门氏菌的检测提供了一种快速、有效的技术手段，且该方法操作简单、对设备的要求低，检测时间短，能够满足大部分家禽养殖厂对鸡白痢沙门氏菌快速检测的需求。

A kit for specific primer, detection of Salmonella pullorum containing the primer and its application

The invention discloses a reagent kit containing the primer and its application for specific primer, detection of Salmonella pullorum. The specific fragment in S.pullorum, primer for specific amplification of Salmonella pullorum was designed and established a PCR detection method for Salmonella detection directly from feces, egg and chicken samples, this method has good specificity, high sensitivity, detection time is short, can detect Salmonella pullorum quickly and accurately, and the other 22 kinds of common pathogenic Salmonella serotypes and 8 kinds of common pathogens of non Salmonella amplification results were negative, and can distinguish Escherichia coli well. The present invention is the detection of Salmonella pullorum provides a rapid and efficient method, and this method has the advantages of simple operation, low equipment requirement, short detection time, able to meet the majority of poultry factory demand for rapid detection of Salmonella pullorum.

【技术实现步骤摘要】
用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物、含有该引物的试剂盒及其应用
本专利技术涉及一种用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物以及含有该引物的试剂盒，还涉及使用所述的引物以及试剂盒快速检测鸡白痢沙门氏菌的特异性PCR方法，本专利技术属于生物技术检测领域，
技术介绍
沙门氏菌(Salmonella)是主要的食源性致病菌之一，其血清型众多，目前已经确定的血清型有2600多种，但只有某些特定的沙门氏菌血清型会感染人和动物。其中，鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)是严重影响我国禽养殖业发展的宿主特异性病原菌，其传播范围广，致病性强，主要感染21日龄以内的雏鸡，可以引起白色下痢，并且雏鸡感染后死亡率几乎100％；然而成年鸡感染鸡白痢沙门氏菌后通常没有临床症状，但作为病原携带者，不仅可以水平传播，而且可以垂直传播。因此，鸡白痢沙门氏菌是一种传播快、危害大的致病性病原菌。及时准确地检测出鸡白痢沙门氏菌，做出相应的防控措施显得尤为重要。传统的沙门氏菌血清学检测仍然是通过细菌与特异性抗体的凝集反应鉴别其O抗原和H抗原，根据White-Kauffmann-LeMinor抗原表确定沙门氏菌的血清型。但该方法对某本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物，其特征在于所述引物由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鸡白痢沙门氏菌的特异性引物，其特征在于所述引物由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。2.含有权利要求1所述的特异性引物的PCR检测试剂盒。3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于还含有PCR扩增缓冲液、阳性对照以及阴性对照。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于所述的阳性对照为鸡白痢沙门氏菌菌株的基因组DNA或是含有SEQIDNO.1所示序列的载体；所述的阴性对照为无菌水。5.如权利要求2-4任一项所述的试剂盒，其特征在于用于检测鸡白痢沙门氏菌时包括以下步骤：步骤一，提取待检样品基因组DNA，使用权利要求2-4任一项所述的试剂盒进行PCR扩增；步骤二，琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸡白痢沙门氏菌；所述判断具体为：如果电泳结果在219bp位置出现单一的扩增条带，则说明样品中含有鸡白痢沙门氏菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则样品中不含有鸡白痢沙门氏菌。6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：于申业，刘思国，曹俊，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23