The kit comprises the following components: RPA primer probe mixed solution, PBST solution, flow measuring chromatography test strip, RPA freeze-dried enzyme and RPA reaction premixing liquid, and provides a rapid detection method for Trichinella spiralis nucleic acid. The invention has the advantages that the invention is established on the basis of molecular biology, based on Trichinella mitochondrial small subunit ribosomal RNA (rrnS) gene specific primers and Probe Kit for rapid detection of Trichinella spiralis nucleic acids were prepared using recombinase polymerase amplification flow measurement sensitivity is higher than that of chromatography. The traditional PCR, specificity, the whole process takes only 30 minutes, judge the results of the operation is extremely simple; the whole process can be carried out after the reaction to obtain the nucleic acid samples in a laboratory environment, not only suitable for clinical diagnosis and can be used in food safety testing, field testing, wild animal farms and other areas of environmental assessment.
【技术实现步骤摘要】
旋毛虫核酸的快速检测方法及其快速检测试剂盒
本专利技术涉及生物
,具体涉及旋毛虫核酸的快速检测方法及其快速检测试剂盒。
技术介绍
旋毛虫是一种最大的细胞内寄生线虫,可以感染几乎所有的哺乳动物动物、某些鸟类及爬行类。其可以在同一个宿主体内完成整个生活史,不需要中间宿主。旋毛虫病是一个非常重要的公共卫生问题,不仅对人类的健康构成严重的威胁,而且给畜牧业生产、肉食品工业、外贸出口造成了严重的经济损失。人主要因为生食或半生食含有旋毛虫肌幼虫包囊的猪肉或其他动物肉类而感染,严重时可致人死亡。目前尚未发现对该病的有效预防方法,主要的防治措施还是严格检验肉类食品的污染,鼓励人们不食生的肉类食物,另外在食用动物饲养过程中进行有效的药物杀虫也是一种预防人类感染的方法。综上,建立一种快速简便的旋毛虫检测方法显得尤为重要,用于环境评估,食品安全检测,养殖场现场诊断等,进而采取措施遏制传播。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述现有技术中的缺陷,提供了旋毛虫核酸的快速检测方法及其快速检测试剂盒。为了实现上述目的,本专利技术提供的技术方案为:旋毛虫核酸的快速检测试剂盒,所述试剂盒包括以下成分:RPA引物探针混合液,PBST溶液,测流层析试纸条,RPA冻干酶和RPA反应预混液;所述RPA引物探针混合液中的引物序列为:上游引物:5′-CATGGTTAGGTGAGATATTGCCTGCAAATA-3′;下游引物:5′-biotin-GGTCCTCCTTCCAGAAGATCTACTTTGTTA-3′;探针序列为:5′-FAM-CCCACTAAATTCCTTATGCACATATTGC ...
【技术保护点】
旋毛虫核酸的快速检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括以下成分:RPA引物探针混合液,PBST溶液,测流层析试纸条,RPA冻干酶和RPA反应预混液;所述RPA引物探针混合液中的引物序列为:上游引物:5′‑CATGGTTAGGTGAGATATTGCCTGCAAATA‑3′;下游引物:5′‑biotin‑GGTCCTCCTTCCAGAAGATCTACTTTGTTA‑3′;探针序列为:5′‑FAM‑CCCACTAAATTCCTTATGCACATATTGCCC‑dSpacer‑TCACCCTCATAAGAG‑C3Spacer‑3′。
【技术特征摘要】
1.旋毛虫核酸的快速检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括以下成分:RPA引物探针混合液,PBST溶液,测流层析试纸条,RPA冻干酶和RPA反应预混液;所述RPA引物探针混合液中的引物序列为:上游引物:5′-CATGGTTAGGTGAGATATTGCCTGCAAATA-3′;下游引物:5′-biotin-GGTCCTCCTTCCAGAAGATCTACTTTGTTA-3′;探针序列为:5′-FAM-CCCACTAAATTCCTTATGCACATATTGCCC-dSpacer-TCACCCTCATAAGAG-C3Spacer-3′。2.一种利用所述权利要求1中所述旋毛虫核酸的快速检测试剂盒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1)对旋毛虫核酸样品进行重组酶聚合酶扩增;扩增时所使用的引物和探针为:上游引物:5′-CATGGTTAGGTGAGATATTGCCTGCAAATA-3′;下游引物:5′-biotin-GGTCCTCCTTCCAGAAGATCTACTTTGTTA-3′;探针:5′-FAM-CCCACTAAATTCCTTATGCACATATTGCCC-dSpacer-TCACCCTCA...
【专利技术属性】
技术研发人员:付宝权,李婷婷,张念章,李文卉,
申请(专利权)人:中国农业科学院兰州兽医研究所,
类型:发明
国别省市:甘肃,62
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