间充质干细胞的采集装置及采集方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种间充质干细胞的采集装置及采集方法，所述间充质干细胞的采集装置包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。该采集装置及采集方法在无菌环境内进行，可避免化学和生物污染的可能性，达到复合后的产品能即刻用于临床。该方法及装置可用于生物、制药、医学和兽医等域。

Collection device and acquisition method of mesenchymal stem cells

The present invention relates to a collection device and acquisition method of stem cells to a mesenchymal, the mesenchymal stem cell collection device includes interconnected liquid storage device and storage device, the liquid storage device for containing blood and / or bone marrow, the storage device for receiving the porous biological ceramics; the blood and / or bone marrow in reciprocating flow the liquid storage device and the storage device, and the storage device by the porous biological ceramic filter, so that the blood and / or bone marrow mesenchymal stem cells remain in the porous biological ceramics. The collection device and the acquisition method are carried out in sterile environment, which can avoid the possibility of chemical and biological pollution, and the composite product can be used immediately in clinical practice. The method and the device can be used in biological, pharmaceutical, medical and veterinary domain.

【技术实现步骤摘要】
间充质干细胞的采集装置及采集方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种间充质干细胞的采集装置及采集方法。
技术介绍
间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，目前已经可以从多种组织中分离出间充质干细胞，包括骨膜、松质骨、脂肪、骨骼肌、骨髓液和血液等。因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力，也可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。间充质干细胞采集的现有技术：1)贴壁筛选法：最常用的骨髓基质干细胞筛选方法。利用细胞贴壁时间及贴壁牢固性的不同，逐步将非贴壁细胞和其它杂质细胞去除。但需要时间较长，涉及细胞的体外培养，临床使用有一定难度。2)密度梯度离心法：利用一定的惰性梯度介质(如Ficol溶液等)在离心管内形成连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质顶部，通过重力或离心力的作用使细胞分层分离。但较长时间的高速离心，难免影响细胞活力，因此，原代细胞生长较慢，短期不能大量扩增。3)流式细胞仪分离法：应用特异的荧光抗体与细胞表面的抗原标志相结合，然后应用流式细胞仪对其进行分选。虽然分离迅速纯度高，但是费用昂贵，对痕量细胞难以分离，不能处理大量的样品。4)免疫磁珠分离法：基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞不能与连接磁珠而被排除，从而使细胞得以分离。但对细胞损伤大，回收率低，价格昂贵。除上述常用技术外，近年出现了一些新方法。利用明胶溶液破坏红细胞表面电荷而加速红细胞沉积；利用密度梯度离心而使各种细胞成分按密度梯度重新分布聚集，从而分离出骨髓中的单个核细胞。还有采用人新鲜脐带经胶原酶消化后分离培养而成，适于冷冻保存。另外通过与细胞外基质粘附而从脐带血分离间充质干细胞。上述干细胞分离方法对快速、有效、简易和无污染的临床应用要求仍有很大距离。人体血液和骨髓液中含有丰富的间充质干细胞，如何采集和即时使用是急待决定的问题。专利技术人研究发现人体血液和骨髓液中细胞分为有核细胞和无核细胞，而间充质干细胞属于有核细胞。红细胞为无核细胞，呈双凹圆盘状，直径6～9.5微米，平均7.2微米。血小板直径2～4微米，呈双凸扁盘状。白细胞直径6～20微米不等，呈无色有核细胞。研究发现机械应力干预下体外培养时，细胞形态、结构、功能和分化都会受到影响。Akhouayri等发现动态载荷下细胞会变圆变大，而静态载荷下细胞被拉伸并沿拉伸轴排列。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种间充质干细胞的采集装置及采集方法，以解决间充质干细胞采集困难的问题。为解决上述技术问题，本专利技术提供一种间充质干细胞的采集装置，包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。可选的，所述储液装置包括：储液腔体和第一推进器，所述储液腔体具有一储液腔，所述第一推进器的一端与所述储液腔的内壁密封贴合，并可沿所述储液腔内壁滑动。可选的，所述第一推进器包括依次连接的第一推柄、第一推杆以及第一活塞，所述第一活塞与所述储液腔的内壁密封贴合，并可沿所述储液腔内壁滑动。可选的，所述储物装置包括：储物腔体、隔物腔体以及第二推进器，所述储物腔体具有一储物腔，所述隔物腔体具有一隔物腔，所述隔物腔体的外壁与所述储物腔的内壁密封贴合，并可沿所述储物腔的内壁滑动，所述第二推进器的一端与所述隔物腔的内壁密封贴合，并可沿所述隔物腔的内壁滑动；所述隔物腔的底端具有若干过滤孔，所述储物腔体的底端设置有一可拆卸的密封盖。可选的，所述第二推进器包括依次连接的第二推柄、第二推杆以及第二活塞，所述第二活塞与所述隔物腔的内壁密封贴合，并可沿所述隔物腔的内壁滑动。可选的，所述隔物腔体包括依次连接的第三推柄、腔壁、以及腔底，所述腔壁与所述储物腔的内壁密封贴合，并可沿所述储物腔的内壁滑动；所述若干过滤孔开设在所述腔底上。可选的，还包括连通装置，用于连通所述储液装置和所述储物装置，所述连通装置的一端与所述储液装置连通，所述连通装置的另一端与所述储物装置连通。可选的，所述连通装置上设置有三通阀，所述三通阀具有互相连通的第一端口、第二端口以及第三端口；所述第一端口通过所述连通装置与所述储液装置连通，所述第二端口通过所述连通装置与所述储物装置连通，所述第三端口，用于往所述储液装置注射血液或骨髓液。可选的，所述连通装置为一U形管。可选的，所述储液装置和/或所述储物装置采用PETG材料制备。可选的，所述多孔生物陶瓷由至少两层多孔结构叠加排列，所述至少两层多孔结构的孔径逐渐增大，且孔隙间相互连通。为了解决上述问题，本专利技术明另一方面提供一种间充质干细胞的采集方法，包括以下步骤：S1，在无菌条件下将多孔生物陶瓷载入储物腔体的储物腔内；S2，将血液和/或骨髓液通过三通阀注入储液腔；S3，推压第一推进器，使血液和/或骨髓液通过多孔生物陶瓷进入隔物腔内；S4，推压第二推进器，使血液和/或骨髓液再次通过多孔生物陶瓷进入储液腔；S5，重复循环执行步骤S3、S4若干次后，取出多孔生物陶瓷备用。可选的，所述多孔生物陶瓷采用以下方法制备：取五组直径范围分别为50μm-150μm、150μm-250μm、250μm-350μm、350μm-450μm、450μm-550μm的PMMA球形颗粒；每组PMMA球形颗粒各取一定量分五层依次堆积在相应的模具内加模具栓，并在模具腔内加入丙酮；预定时间后，对模具脱模，并取出由五层PMMA球形颗粒堆积形成的有机构架；将所形成的有机构架放入石膏模具内，并加入磷酸钙浆液，待干燥成形后，脱模并取出由有机构架形成的陶瓷坯体；将陶瓷坯体在排胶炉内加温消除有机物后移入烧结炉内烧结成多孔生物陶瓷。可选的，所述S1具体包括：打开密封盖，将多孔生物陶瓷较大孔径的一面置于储物腔底部，盖上密封塞后推动隔物腔体以固定多孔生物陶瓷。在本专利技术提供的间充质干细胞的采集装置及方法中，利用多孔生物陶瓷从血液、骨髓液及体液中分离和采集充质干细胞，而且也可将采集的细胞连同多孔生物陶瓷即刻应用于临床治疗；另一方面，多孔生物陶瓷能够根据孔径的大小，小孔起到细胞过滤作用；大孔发挥过滤时细胞储留空间和细胞粘附场所，植入体内时组织长入，且空隙间相互连通以便细胞通过；另一方面，间充质干细胞复合到多孔生物陶瓷之中，达到治疗物质能简单快速和均匀高效地复合，提高材料生物效应；另一方面，该梯度多孔生物陶瓷能使间充质干细胞在过滤过程中贴附到材料内部结构表面，有效地避免梯度多孔生物陶瓷应用时由于出血和冲洗造成的细胞丢失；另一方面，该间充质干细胞的采集装置也可作为细胞培养装置，能使细胞在多孔材料内部增殖和分化；另一方面，该间充质干细胞的采集装置能使干细胞的分类和复合过程在密闭无菌环境内经行，可避免化学和生物污染的可能性，使分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种间充质干细胞的采集装置，其特征在于，包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞的采集装置，其特征在于，包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。2.如权利要求1所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述储液装置包括：储液腔体和第一推进器，所述储液腔体具有一储液腔，所述第一推进器的一端与所述储液腔的内壁密封贴合，并可沿所述储液腔内壁滑动。3.如权利要求2所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述第一推进器包括依次连接的第一推柄、第一推杆以及第一活塞，所述第一活塞与所述储液腔的内壁密封贴合，并可沿所述储液腔内壁滑动。4.如权利要求1或2或3所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述储物装置包括：储物腔体、隔物腔体以及第二推进器，所述储物腔体具有一储物腔，所述隔物腔体具有一隔物腔，所述隔物腔体的外壁与所述储物腔的内壁密封贴合，并可沿所述储物腔的内壁滑动，所述第二推进器的一端与所述隔物腔的内壁密封贴合，并可沿所述隔物腔的内壁滑动；所述隔物腔的底端具有若干过滤孔，所述储物腔体的底端设置有一可拆卸的密封盖。5.如权利要求4所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述第二推进器包括依次连接的第二推柄、第二推杆以及第二活塞，所述第二活塞与所述隔物腔的内壁密封贴合，并可沿所述隔物腔的内壁滑动。6.如权利要求4所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述隔物腔体包括依次连接的第三推柄、腔壁、以及腔底，所述腔壁与所述储物腔的内壁密封贴合，并可沿所述储物腔的内壁滑动；所述若干过滤孔开设在所述腔底上。7.如权利要求1所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，还包括连通装置，用于连通所述储液装置和所述储物装置，所述连通装置的一端与所述储液装置连通，所述连通装置的另一端与所述储物装置连通。8.如权利要求7所述的间充质干细胞的采集装置，其特征在于，所述连通装置上设置有三通阀，所述三...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢建熙，卢霄，王臻，
申请(专利权)人：卢建熙，卢霄，
类型：发明
国别省市：上海,31