检测FBXW7基因突变的方法、寡核苷酸及其应用技术

本发明专利技术公开了一种检测急性T淋巴细胞白血病患者的FBXW7基因突变的寡核苷酸及其应用，其包括(i)扩增FBXW7基因全外显子序列的引物；采用Sanger测序技术和测序引物。本发明专利技术可快速地将急性T淋巴细胞白血病患者体内FBXW7基因全外显子的突变检测出来。利用本发明专利技术完成的检测结果准确，可以辅助诊断急性T淋巴细胞白血病，对疾病的风险预测及治疗方案的针对性定制有重要的参考意义。

Method for detecting FBXW7 gene mutation, oligonucleotide and application thereof

The invention discloses a detection oligonucleotide of FBXW7 gene mutations in patients with acute T lymphocytic leukemia and its application, including (I) primers to amplify FBXW7 gene all exons sequences; by Sanger sequencing and sequencing primers. The invention can rapidly detect the mutation of the FBXW7 gene exon in the patients with acute T lymphocyte leukemia. The detection result made by the invention is accurate and can assist the diagnosis of acute T lymphocyte leukemia, and has important reference significance for the prediction of the disease risk and the targeted customization of the treatment program.

【技术实现步骤摘要】
检测FBXW7基因突变的方法、寡核苷酸及其应用
技术介绍
恶性肿瘤的发病是由多种外源性致癌物诱导和内源性基因表达失控共同作用的结果，其中基因的异常表达包括多种癌基因的活化和/或多种抑癌基因的失活。FBXW7基因(F框/WD40域蛋白基因)又称hCDC4，其表达的蛋白属于F-box蛋白，是SCF(SKP1-CUL1-Fbox)泛素连接酶的靶蛋白识别组分，参与降解周期蛋白Myc，Notch1等，在人体细胞周期的进程、细胞的生长和分化中发挥着重要的调节作用，其缺失能引起和/或加快癌细胞增殖，是近年来发现的重要的抑癌基因。FBXW7基因共有12个外显子，在人类基因组中高度保守，其表达的蛋白有3个结构域，包括F-box，WD40重复序列和D结构域。其中N末端的WD40重复序列为底物结合域。FBXW7基因在癌症中的整体突变率约为6％，而在急性T淋巴细胞白血病中的突变率高达31％，且43％的突变发生在两个突变热点：Arg465和Arg479，频率约为29％和14％。FBXW7的突变将影响自身功能，进而对下游参与细胞周期的蛋白产生影响，使血液中的白细胞上升，导致疾病发生。Akhoondi等发现FBXW7突本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测FBXW7基因突变的寡核苷酸，其特征在于，包括：至少一对扩增FBXW7基因外显子的引物，所述至少一对扩增引物选自FBXW7‑1F/FBXW7‑1R、FBXW7‑2F/FBXW7‑2R、FBXW7‑3F/FBXW7‑3R、FBXW7‑4F/FBXW7‑4R、FBXW7‑5F/FBXW7‑5R、FBXW7‑6F/FBXW7‑6R、FBXW7‑7/8F/FBXW7‑7/8R、FBXW7‑9F/FBXW7‑9R、FBXW7‑10F/FBXW7‑10R、FBXW7‑11F/FBXW7‑11R、FBXW7‑12F/FBXW7‑12R，其碱基序列为：FBXW7‑1F:TGTAAAACGACGGCCAGT...

【技术特征摘要】
1.检测FBXW7基因突变的寡核苷酸，其特征在于，包括：至少一对扩增FBXW7基因外显子的引物，所述至少一对扩增引物选自FBXW7-1F/FBXW7-1R、FBXW7-2F/FBXW7-2R、FBXW7-3F/FBXW7-3R、FBXW7-4F/FBXW7-4R、FBXW7-5F/FBXW7-5R、FBXW7-6F/FBXW7-6R、FBXW7-7/8F/FBXW7-7/8R、FBXW7-9F/FBXW7-9R、FBXW7-10F/FBXW7-10R、FBXW7-11F/FBXW7-11R、FBXW7-12F/FBXW7-12R，其碱基序列为：FBXW7-1F:TGTAAAACGACGGCCAGTGGTTGCCGCCTGGTTTAG；FBXW7-1R:AACAGCTATGACCATGTCCCTTTGCCAACTGCTG；FBXW7-2F:TGTAAAACGACGGCCAGTTGTTTTTTACCCTATTTTCCCC；FBXW7-2R:AACAGCTATGACCATGCCTCTACACCCCACACAAGC；FBXW7-3F:TGTAAAACGACGGCCAGTATCATCACACACTGTTCTTCTGG；FBXW7-3R:AACAGCTATGACCATGGTAACAAGACACAGGGGCTCATA；FBXW7-4F:TGTAAAACGACGGCCAGTACAGGCGTTATATAGGAGGGAG；FBXW7-4R:AACAGCTATGACCATGTTTGCAGCAATTAAGTGAGGC；FBXW7-5F:TGTAAAACGACGGCCAGTCCTGATCAACTATGGTTGTGTG；FBXW7-5R:AACAGCTATGACCATGCAATGTTTAAAGGTGGTAGCTGT；FBXW7-6F:TGTAAAACGACGGCCAGTAAGAGCAGAGACAGAGAGGTTTA；FBXW7-6R:AACAGCTATGACCATGATTCGGCTCATCTGAATGTGTAG；FBXW7-7/8F:TGTAAAACGACGGCCAGTGAAGGCAATTTACTCTTGAACTG；FBXW7-7/8R:AACAGCTATGACCATGTGAGCTCTGATATTTGCTATCCA；FBXW7-9F:TGTAAAACGACGGCCAGTGTGATGGGATCATTTTATACGG；FBXW7-9R:AACAGCTATGACCATGAATAGAGGAAGAAGTCCCAACC；FBXW7-10F:TGTAAAACGACGGCCAGTTGTTTTTCTGTTTCTCCCTCTG；FBXW7-10R:AACAGCTATGACCATGCTGGATCAGCAATTTGACAGTG；FBXW7-11F:TGTAAAACGACGGCCAGTCCCCCTTTCCTACTAGGATTAA；FBXW7-11R:AACAGCTATGACCATGTGCTAAGGCTCCATATTTCTCT；FBXW7-12F:TGTAAAACGACGGCCAGTTCCTAAAATACTGAGGACATGGG；FBXW7-12R:AACAGCTATGACCATGAAAAAAAAAGCTTTTCATGATAA。2.如权利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所说寡核苷酸还包括一对测序引物，其碱基序列为：M13F：TGTAAAACGACGGCCAGT；M13R：AACAGCTATGACCATG。3.如权利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，FBXW7-1F：FBXW7-1R、FBXW7-2F：FBXW7-2R、FBXW7-3F：FBXW7-3R、FBXW7-4F：FBXW7-4R、FBXW7-5F：FBXW7-5R、FBXW7-6F：FBXW7-6R、FBXW7-7/8F：FBXW7-7/8R、FBXW7-9F：FBXW7-9R、FBXW7-10F：FBXW7-10R、FBXW7-11F：FBXW7-11R、FBXW7-12F：FBXW7-12R的比值均为1。4.如权利要求2所述的寡核苷酸，其特征在于，M13F：M13R的比值为1。5.如权利要求1～4之一所示的寡核苷酸在辅助检测急性T淋巴细胞白血病中的应用。6.一种检测FBXW7基因突变的方法，包括以下步骤：(...

【专利技术属性】
技术研发人员：林筱剑，吴鹏飞，王淑一，
申请(专利权)人：武汉艾迪康医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42