一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR引物、探针、试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR引物、探针、试剂盒和检测方法。本发明专利技术针对棒状杆菌属细菌23S rRNA基因及克氏棒状杆菌16S rRNA基因序列，设计特异性引物和探针，利用多重荧光定量PCR，鉴定生物样本中是否存在棒状杆菌属细菌及克氏棒状杆菌感染，对临床的针对性选择抗生素使用具有重要指导作用，合理的抗生素使用可有效缩短肉芽肿性乳腺炎的病程、避免手术切除乳腺组织，极大减轻患者生理和心理创伤，对肉芽肿性乳腺炎的临床诊治提供病因学依据。

The invention relates to a multi fluorescent quantitative PCR primer, a probe, a reagent kit and a detection method of Corynebacterium and bacteria

The invention discloses a multiplex fluorescent quantitative PCR primer, a probe, a reagent box and a detection method of Corynebacterium and corynebacterium. The present invention is directed to Corynebacterium 23S rRNA gene and gram Corynebacterium 16S rRNA gene sequence, primers and probes were designed, using multiplex fluorescent quantitative PCR, whether in Corynebacterium and gram Corynebacterium infection identified the presence of biological samples for clinical targeted selection of antibiotic use has an important guiding role, reasonable use of antibiotics can effectively shorten the course of disease, avoid granulomatous mastitis in resection of breast tissue, relieve physical and psychological trauma patients, clinical diagnosis and treatment of granulomatous mastitis with etiology basis.

【技术实现步骤摘要】
一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR引物、探针、试剂盒和检测方法
：本专利技术属于分子生物学和医学领域，具体涉及一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR引物、探针、试剂盒和检测方法。
技术介绍
：近年来在医院临床实践中，发现非哺乳期乳腺炎发病率逐渐增高，甚至超过哺乳期乳腺炎。肉芽肿性乳腺炎是一种重要的非哺乳期乳腺炎症疾病，临床表现为乳腺肿块、脓肿窦道或溃疡，病变迁延不愈，反复发作，容易误诊误治。肉芽肿性乳腺炎病因复杂，涉及局部创伤、自身免疫、细菌感染等因素。近年来国内、外越来越多的研究表明棒状杆菌属细菌感染在肉芽肿性乳腺炎病变发展过程中发挥重要作用。最近，本团队通过高通量测序技术进行细菌宏基因组测序，明确了棒状杆菌是我国肉芽肿性乳腺炎发病的主要致病菌。棒状杆菌为一种革兰氏染色阳性杆菌，因菌体的一端或两端膨大呈棒状而得名。胞壁多糖主要是阿拉伯糖和半乳糖。与分枝杆菌属和放线菌属相似，有交叉反应，其归类于放线菌目棒状杆菌科。近年研究显示，该菌属的多数菌种可作为条件致病菌在宿主抵抗力降低时引起各类感染。克氏棒状杆菌是一种革兰阳性短小棒状杆菌。在普通培养基上难以生长，而本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR检测引物，其特征在于，所述的检测引物如下所示：针对棒状杆菌属细菌：23S rRNA‑F：5’‑TGATAGCTGGTTCTCCCCGAA‑3’，23S rRNA‑R：5’‑CGATCTGGGCTGTTTCCCT‑3’；针对克氏棒状杆菌：16S rRNA‑F：5’‑AGAACCTTACCTGGGCTTGA‑3’，16S rRNA‑R：5’‑CGCTCGTTGCGGGACTTA‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR检测引物，其特征在于，所述的检测引物如下所示：针对棒状杆菌属细菌：23SrRNA-F：5’-TGATAGCTGGTTCTCCCCGAA-3’，23SrRNA-R：5’-CGATCTGGGCTGTTTCCCT-3’；针对克氏棒状杆菌：16SrRNA-F：5’-AGAACCTTACCTGGGCTTGA-3’，16SrRNA-R：5’-CGCTCGTTGCGGGACTTA-3’。2.一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述的检测探针如下所示：针对棒状杆菌属细菌：5’-GTCCCGCTMAACCAWCCAGT-3’；针对克氏棒状杆菌：5’-ACTGGATGCGGCCAGA-3’；探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，两探针的5’端标记的荧光报告基团是不同的荧光报告基团。3.根据权利要求2所述的棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR检测探针，其特征在于，所述的荧光报告基团为VIC、HEX或FAM，所述的荧光淬灭基团为BHQ1或MGB。4.一种棒状杆菌属细菌和克氏棒状杆菌多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括2×PrmixExTaq、权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张亮，马健，周伟平，李泌，周香城，王颀，于海静，王波，
申请(专利权)人：广东省妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：广东,44