一种短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物的制备方法，所述方法将短直链淀粉、胰岛素两者或短直链淀粉、胰岛素、原花青素三者混合后回生制得短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物。本发明专利技术短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物粒径较小，可以紧密的粘附在小肠的膜粘附层，延长在胃肠带停留时间，同时可以克服消化道系统中存在的粘液层屏障、酶屏障及上皮屏障，提高口服胰岛素的生物利用率。

【技术实现步骤摘要】
一种短直链淀粉-胰岛素或短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物的制备方法
本专利技术涉及纳米复合材料
，尤其是涉及一种通过将短链淀粉与胰岛素或者短链淀粉与胰岛素、原花青素混合制备纳米复合物的方法。
技术介绍
胰岛素制剂皮下注射是目前用于糖尿病治疗的主要手段，具有更快的降血糖效果和更高的药物利用度，但由于药物释放较快，需要频繁注射给药，增加了病人的身体和心理负担。注射给药这种方式与正常生理状态下体内的胰岛素的分泌也存在着较大的差异；胰岛素经注射给药后直接进入人体循环；在正常生理条件下，胰岛分泌的胰岛素先进入肝门静脉系统，大部分为肝脏摄取，胰岛素以口服途径给药最接近正常生理状态下的分泌模式，因此，无论从服用的方便程度上，还是从代谢的模式上看，口服都是胰岛素最为理想的给药方式。纳米技术的快速发展为胰岛素口服给药开辟了新的途径。以纳米颗粒作为药物载体，可有效地保护胰岛素免受胃酸及胃肠道酶的降解，增加其黏膜吸收；还可以有效地穿过小肠Peyer's结，经淋巴循环进入血液循环，同时还具有控制释放和体内靶向分布等特点。在众多用于制备纳米粒的天然大分子中，淀粉是一类重要的具有生物可降解性、可再生、良好生物相容性的天然多糖类高分子材料，来源丰富，价格低廉，广泛地应用于各种药物的纳米粒制剂中，是一种理想的载体材料。天然产物多酚因具有良好的生物兼容性和诸多生理学功能，如抗氧化、抗粉样纤维、抗癌和抑菌等活性，一直是生命领域研究的重要对象之一。原花青素在抗氧化、清除体内自由基、免疫调节、治疗炎症以及预防心脑血管、癌症和神经退行性等重大疾病方面均发挥了重要作用，因此被广泛应用于食品工业、生物医药、卫生保健、日用化工等领域。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本专利技术申请人提供了一种短直链淀粉-胰岛素或短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物的制备方法。本专利技术短直链淀粉-胰岛素或短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物粒径较小，可以紧密的粘附在小肠的膜粘附层，延长在胃肠带停留时间，同时可以克服消化道系统中存在的粘液层屏障、酶屏障及上皮屏障，提高口服胰岛素的生物利用率。本专利技术的技术方案如下：一种短直链淀粉-胰岛素纳米复合物，所述纳米复合物通过如下步骤制得：(1)制备短直链淀粉：配制质量百分比为10-25％的蜡质玉米淀粉乳，100℃水浴30min使之完全糊化，随后降温至58℃，向其中加入100-500U/mL的普鲁兰酶，酶解6-12h，离心，灭酶，冻干得短直链淀粉；(2)制备短直链淀粉溶液：称取短直链淀粉加入到去离子水中，超声5min，然后100℃水浴30min使之完全糊化，降至室温待用，制得质量浓度为1-10％的短直链淀粉溶液；(3)制备胰岛素溶液：称取胰岛素粉末用pH＝2的盐酸溶液溶解，配制成质量浓度为1‰-1％的胰岛素溶液；(4)制备短直链淀粉-胰岛素纳米复合物：将步骤(3)制得的胰岛素溶液逐滴加入到步骤(2)制得的短直链淀粉溶液中搅拌1h，在室温下使其充分反应，然后将其放置4℃冰箱下回生处理12～48h，离心得到沉淀，将沉淀冻干即得短直链淀粉-胰岛素纳米复合物。步骤(4)中所述胰岛素溶液与短直链淀粉溶液的体积比为1:8。步骤(4)中所述冻干的条件为真空度为1Pa，冷阱温度为-82℃，干燥至样品最终含水量为5-7％。一种短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物的制备方法，所述方法将短链淀粉、胰岛素与原花青素复合，具体制备过程为：将质量浓度为1‰-1％的胰岛素溶液和质量浓度为1‰-1％的原花青素溶液同时分别逐滴加入到质量浓度为1％-10％的胰岛素溶液中搅拌1h，在室温下使其充分反应，然后将其放置4℃冰箱下回生处理12～48h，离心得到沉淀，将沉淀冻干即得短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物。所述原花青素溶液的制备过程为：将原花青素加入到去离子水中，制得质量浓度为1‰-1％的原花青素溶液。本专利技术有益的技术效果在于：本专利技术采用生物酶法制备短直链淀粉，短直链淀粉含有大量的-OH，胰岛素含有NH2，原花青素可以作为交联剂跟稳定剂，抑制胰岛素本身的聚集，利用短直链自组装并结合二者之间或者三者之间的相互作用，制得所述纳米复合物。制备得到的纳米复合物粒径较小，可以紧密的粘附在小肠的膜粘附层，延长在胃肠带停留时间，同时可以克服消化道系统中存在的粘液层屏障、酶屏障及上皮屏障，提高口服胰岛素的生物利用率。制备得到的纳米复合物，具有包埋率高，成本低，降血糖作用明显等特性，有效提高了口服胰岛素的生物利用度，而且口服纳米复合物在胃肠道环境中具有明显的缓释功效。附图说明图1为实施例1、2所得纳米复合物的透射电镜和粒径图；图2本专利技术实施例所用短直链淀粉与胰岛素两者或短直链淀粉、原花青素和胰岛素三者相互作用的荧光图谱；图3本专利技术实施例所用短直链淀粉与胰岛素两者或短直链淀粉、原花青素和胰岛素三者相互作用的同步荧光图谱；图4短直链淀粉与胰岛素两者或短直链淀粉、原花青素和胰岛素三者相互作用的共振光散射图谱；图5为实施例1、3、5、7所得短直链淀粉-胰岛素纳米复合物的X衍射图和实施例2、4、6、8所得短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物的X衍射图；图6为实施例1、3、5、7所得纳米复合物中短直链淀粉对胰岛素的包埋率；和实施例2、4、6、8所得纳米复合物中短直链淀粉和原花青素对胰岛素的包埋率；图7为实施例1、2所得纳米复合物体内降血糖效果曲线。具体实施方式下面结合附图和实施例，对本专利技术进行具体描述。实施例1一种短直链淀粉-胰岛素纳米复合物，所述纳米复合物通过如下步骤制得：(1)制备短直链淀粉：配制质量百分比为15％的蜡质玉米淀粉乳，100℃水浴30min使之完全糊化，随后降温至58℃，向其中加入100U/mL的普鲁兰酶，酶解6h，离心，灭酶，冻干得短直链淀粉；(2)制备短直链淀粉溶液：称取0.1g步骤(1)制得的短直链淀粉加入到10mL去离子水中，超声5min，然后100℃水浴30min使之完全糊化，降至室温，制得质量浓度为1％的短直链淀粉溶液；(3)制备胰岛素溶液：称取0.01g胰岛素粉末用10mLpH＝2的盐酸溶解，配制成1‰的胰岛素溶液；(4)制备短直链淀粉-胰岛素纳米复合物：将5mL步骤(3)制得的胰岛素溶液逐滴加入到40mL步骤(2)制得的短直链淀粉溶液中，搅拌1h，在室温下使其充分反应，然后将其放置4℃冰箱下回生处理48h，离心得到沉淀，将沉淀冻干即得短直链淀粉-胰岛素纳米复合物。本专利技术实施例所得纳米复合物的透射电镜图和粒径图分别如图1A、C所示；所得纳米复合物体内降血糖效果曲线如图7所示；所得纳米复合物动物体内生物利用率如表1所示。实施例2一种短直链淀粉-胰岛素-原花青素纳米复合物的制备方法，其特征在于所述制备方法包括如下步骤：(1)制备短直链淀粉：配制质量百分比为15％的蜡质玉米淀粉乳，100℃水浴30min使之完全糊化，随后降温至58℃，向其中加入100U/mL的普鲁兰酶，酶解6h，离心，灭酶，冻干得短直链淀粉；(2)制备短直链淀粉溶液：称取0.1g步骤(1)制得的短直链淀粉加入到10mL去离子水中，超声5min，然后100℃水浴30min使之完全糊化，降至室温，制得质量浓度为1％的短直链淀粉溶液；(3)制备胰岛素溶液：称取0.01g胰岛素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种短直链淀粉‑胰岛素纳米复合物，其特征在于所述纳米复合物通过如下步骤制得：(1)制备短直链淀粉：配制质量百分比为10‑25％的蜡质玉米淀粉乳，100℃水浴30min使之完全糊化，随后降温至58℃，向其中加入100‑500U/mL的普鲁兰酶，酶解6‑12h，离心，灭酶，冻干得短直链淀粉；(2)制备短直链淀粉溶液：称取短直链淀粉加入到去离子水中，超声5min，然后100℃水浴30min使之完全糊化，降至室温待用，制得质量浓度为1‑10％的短直链淀粉溶液；(3)制备胰岛素溶液：称取胰岛素粉末用pH＝2的盐酸溶液溶解，配制成质量浓度为1‰‑1％的胰岛素溶液；(4)制备短直链淀粉‑胰岛素纳米复合物：将步骤(3)制得的胰岛素溶液逐滴加入到步骤(2)制得的短直链淀粉溶液中搅拌1h，在室温下使其充分反应，然后将其放置4℃冰箱下回生处理12～48h，离心得到沉淀，将沉淀冻干即得短直链淀粉‑胰岛素纳米复合物。

【技术特征摘要】
1.一种短直链淀粉-胰岛素纳米复合物，其特征在于所述纳米复合物通过如下步骤制得：(1)制备短直链淀粉：配制质量百分比为10-25％的蜡质玉米淀粉乳，100℃水浴30min使之完全糊化，随后降温至58℃，向其中加入100-500U/mL的普鲁兰酶，酶解6-12h，离心，灭酶，冻干得短直链淀粉；(2)制备短直链淀粉溶液：称取短直链淀粉加入到去离子水中，超声5min，然后100℃水浴30min使之完全糊化，降至室温待用，制得质量浓度为1-10％的短直链淀粉溶液；(3)制备胰岛素溶液：称取胰岛素粉末用pH＝2的盐酸溶液溶解，配制成质量浓度为1‰-1％的胰岛素溶液；(4)制备短直链淀粉-胰岛素纳米复合物：将步骤(3)制得的胰岛素溶液逐滴加入到步骤(2)制得的短直链淀粉溶液中搅拌1h，在室温下使其充分反应，然后将其放置4℃冰箱下回生处理12～48h，离心得到沉淀，将沉淀冻干即得短直链淀粉-胰岛素纳米复合物。2.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪雁，姬娜，顾正彪，程力，李兆丰，李才明，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32