一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法技术

本发明专利技术属于酶联免疫技术领域，具体的说是涉及一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法。一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：(1)将制备好的全抗原注射到免疫动物体内；(2)再加强免疫3次后采血，检测血清效价；(3)若血清效价达到要求，则大量采血，离心取上清，得到抗血清；(4)将所得抗血清流过抗原免疫亲和填料柠檬黄‑Agarose，血清中的抗柠檬黄抗体与偶联在填料上的柠檬黄特异吸附，洗掉杂质，用弱酸洗脱，即得到抗柠檬黄多克隆抗体。本发明专利技术的方法制备出的柠檬黄多克隆抗体具有高特异性、高亲和力、敏感度高和纯度高的优点。

Preparation method of citric acid polyclonal antibody

The invention belongs to the technical field of enzyme linked immunity, in particular to a preparation method of a polyclonal antibody of lemon yellow. A preparation method of lemon yellow polyclonal antibody, which comprises the following steps: (1) the prepared antigen injected into immune animal; (2) to strengthen the immunity after 3 times of blood serum was detected; (3) if the serum titer reached the requirements, large amounts of blood, then centrifuged. Get the antiserum; (4) the antiserum through antigen affinity packing lemon yellow Agarose, serum anti tartrazine antibody and coupling on the packing of the lemon yellow specific adsorption, wash impurities, weak acid elution to obtain the polyclonal antibody against tartrazine. The citric acid polyclonal antibody prepared by the method of the invention has the advantages of high specificity, high affinity, high sensitivity and high purity.

【技术实现步骤摘要】
一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法
本专利技术属于酶联免疫
，具体的说是涉及一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法。
技术介绍
柠檬黄又称酒石黄、酸性淡黄、肼黄。柠檬黄之所以能用做食品药品染色剂，是因为它安全度比较高，基本无毒，不在体内贮积，绝大部分以原形排出体外，少量可经代谢，其代谢产物对人无毒性作用。而它的生产所用原料对氨基苯磺酸、酒石酸及2-萘酚-6-磺酸都是基本无毒的物质。因此，世界粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)早在1994年就给了它一个很宽容的每日答应摄用量。若按标准使用柠檬黄，则进入人体的量距每日答应摄用量相差很多。柠檬黄为一种偶氮型酸性染料，其主要用于食品、饮料、药品及化妆品的着色，也用于羊毛、蚕丝的染色及制造色淀。水溶性合成色素，鲜艳的嫩黄色，广泛用于冰淇淋、雪糕、果冻、酸奶、饮料、罐头、糖果包衣等的着色。根据中国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-1996)规定：用于高糖果汁(味)或果汁(味)或果汁(味)饮料、碳酸饮料、配制酒、糖果、糕点上彩装、西瓜酱罐头、青梅、虾(味)片、渍制小菜、红绿丝，最大使用量0.1g/kg；用于冰淇淋，最大使用量0.02g/k本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将制备好的全抗原注射到免疫动物体内；(2)再加强免疫3次后采血，检测血清效价；(3)若血清效价达到要求，则大量采血，离心取上清，得到抗血清；(4)将所得抗血清流过抗原免疫亲和填料柠檬黄‑Agarose，血清中的抗柠檬黄抗体与偶联在填料上的柠檬黄特异吸附，洗掉杂质，用弱酸洗脱，即得到抗柠檬黄多克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.一种柠檬黄多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将制备好的全抗原注射到免疫动物体内；(2)再加强免疫3次后采血，检测血清效价；(3)若血清效价达到要求，则大量采血，离心取上清，得到抗血清；(4)将所得抗血清流过抗原免疫亲和填料柠檬黄-Agarose，血清中的抗柠檬黄抗体与偶联在填料上的柠檬黄特异吸附，洗掉杂质，用弱酸洗脱，即得到抗柠檬黄多克隆抗体。2.根据权利要求1所述的柠檬黄多克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的全抗原包括柠檬黄-KLH和柠檬黄-BSA。3.根据权利要求1所述的柠檬黄多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述的全抗原的制备方法，包括以下步骤：(1)先将柠檬黄溶解于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，然后加入N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，混匀直到全部溶解，再加入N,N'-二环己基碳二亚胺DCC，室温摇床反应30min，得到柠檬黄-NHS中间体；(2)取血蓝蛋白KLH或牛血清蛋白BSA，分别溶解在0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液中；(3)将柠檬黄-NHS中间体和BSA或KLH混匀，室温摇床震荡反应2h，经G25Sephadex脱盐后，制得的...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘丽金，李俊杰，韦柳桂，陈文婷，萧浩，
申请(专利权)人：南宁市蓝光生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45