微型高效莱克多巴胺免疫亲和纯化富集柱制备及应用制造技术

技术编号:8704199 阅读:207 留言:0更新日期:2013-05-16 17:58
本发明专利技术提供了一种高效、准确富集莱克多巴胺的免疫亲和纯化富集柱及其制备方法和用途,本发明专利技术所提供的免疫亲和纯化富集柱包括偶联有莱克多巴胺特异性抗体的活化琼脂糖填料和装载该亲和填料的塑料柱。所述的亲和填料偶联的莱克多巴胺特异性抗体是用免疫亲和法提取得到,所述的免疫亲和纯化富集柱是将免疫亲和填料装载入特制的塑料柱得到。该免疫亲和纯化富集柱装载填料体积小、富集莱克多巴胺能力强,与色谱法、胶体金试纸条联合使用,可高效、准确检测莱克多巴胺的含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物分离、纯化富集装置,尤其是一种微型高效莱克多巴胺免疫亲和层析柱的制备方法及其应用。
技术介绍
莱克多巴胺均属于β_兴奋剂,可以提高瘦肉率、促进动物生长。因其经济效益明显,利益驱使养殖户或养殖企业大量使用,导致畜产品中莱克多巴胺大量残留,人食用这类畜产品后,可引发肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心等中毒症状,特别是对血压、心脏病患者危害更大,长期使用可能导致染色体畸变,诱发恶性肿瘤。莱克多巴胺在许多国家,特别是欧盟和中国,被禁止用做家畜促生长剂。所以,对动物来源的食品中莱克多巴胺残留进行严格地检测是非常重要。由于生物样本成分复杂,待测物浓度低,大多数取样量少,而我国明确规定禁止莱克多巴胺及其衍生物在动物的饲养过程中使用。这就对分析方法的灵敏度、准确度有更高的要求。采用免疫亲和色谱柱提取样品中莱克多巴胺,再与高效液相色谱法(HPLC-UV)、气-质联机法(GC-UV)、胶体金快速试纸条检测法确证是必然的趋势。但是,现有的提取莱克多巴胺免疫亲和色谱柱的技术与工艺存在活化后填料不稳定、非亲和法提纯的抗体特异性差、抗体和填料偶联不稳定,造成偶联在填料上的抗体脱落本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微型高效莱克多巴胺免疫亲和纯化富集柱的制备,其特征在于:    1)将经免疫亲和纯化的莱克多巴胺特异性多克隆抗体和过碘酸活化的琼脂糖混匀,在摇床上室温反应30 分钟,然后在4℃冰箱静置30分钟后加入硼氢化钠还原,用蒸馏水清洗未结合的抗体,用磷酸缓冲液清洗填料,10倍填料体积/次,洗4次,滴干磷酸缓冲液后加入等体积甘油,混匀,得到莱克多巴胺免疫亲和填料; 2)在特制的塑料柱内下端装上过滤膜,将莱克多巴胺免疫亲和填料装入柱中,25μL/柱,填料上层盖上过滤膜,即得所述的莱克多巴胺免疫亲和纯化富集柱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:谢体三李军宁欢欢潘丽金叶云峰韦良云萧浩
申请(专利权)人:南宁市蓝光生物技术有限公司 广西壮族自治区兽药监察所
类型:发明
国别省市:广西;45

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