基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条制造技术

本实用新型专利技术提供一种基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条，包括样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)，所述硝酸纤维素膜(3)上设有4条检测线(5)和1条质控线(6)，所述样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次粘贴在塑料衬板上。其中，4条检测线分别为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌O157:H7、肠致病大肠杆菌和肠毒素大肠杆菌K88检测线。胶体金结合垫上有胶体金标记的各致病菌特异性核酸适配体，检测线固定有捕获探针，质控线固定有质控探针。本实用新型专利技术可以在一个试纸条上实现多种致病菌同时检测，且用适配体替代抗体作为识别元件，实现了致病微生物低成本、高通量的快速检测。

Test strip for detecting various pathogenic bacteria based on nucleic acid aptamers

The utility model provides an aptamer based on multiple pathogenic bacteria detection strip, including the sample pad (1), colloidal gold combined pad (2), fixed with streptavidin nitrocellulose membrane element (3) and (4), the absorption pad of the nitrocellulose membrane (3) is arranged on the 4 the detection line (5) and 1 control line (6), the sample pad, a colloidal gold combined pad, a nitrocellulose membrane and the absorption pad are pasted on the plastic liner. Among them, 4 detection lines were Staphylococcus aureus, Escherichia coli O157:H7, enterotoxigenic Escherichia coli and enterotoxigenic Escherichia coli K88 detection line. The gold binding pad is provided with a colloidal gold marker for each pathogenic bacteria specific nucleic acid aptamer, and the detection line is fixed with a capture probe, and the quality control line is fixed with a quality control probe. The utility model can realize simultaneous detection of a plurality of pathogenic bacteria on a test paper strip, and uses an aptamer instead of an antibody as an identification element to realize rapid detection of pathogenic microorganisms with low cost and high throughput.

【技术实现步骤摘要】
基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条
本技术涉及致病微生物检测
，具体地说，涉及一种基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条。
技术介绍
食源性致病微生物引起的食品中毒是全球关注的重要食品安全问题之一，据全国食源性疾病监测信息资料显示，我国每年由于食源性致病微生物引起的食物中毒人数约占各类食源性疾病患者总人数的40-60％。多种致病菌相互混合存在于食品中，它们数量相差很大，难以分离，检测困难。并且由于食品营养成分的不同，适宜生长的致病菌的种类也不同，检测单一的致病菌已经不能保障食品安全，迫切需要多种致病菌的同步检测技术和产品。近年来针对致病微生物的检测方法已经从传统的繁琐耗时长的微生物培养,向利用免疫学、分子生物学和材料等技术的快速检测方法发展。这类方法通过对食品样品简单增菌，即可实现更为灵敏、抗干扰能力强、高通量的检测，适合现场筛查。目前多种致病菌同步检测的方法鲜有报道，繁杂的前处理过程以及数据处理的复杂性是主要的技术瓶颈。目前，就食源性致病菌快速检测技术应用而言，国内外的主流技术是基于免疫学技术的侧流层析试纸和酶联免疫ELISA试剂盒以及PCR为主的分子生物学方法，虽然目前酶联本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条，其特征在于，包括样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)，所述固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)上设有4条检测线(5)和1条质控线(6)，所述样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)依次粘贴在塑料衬板(7)上；其中，4条检测线分别为金黄色葡萄球菌检测线、大肠埃希菌O157:H7检测线、肠致病大肠杆菌检测线和肠毒素大肠杆菌K88检测线；所述胶体金结合垫(2)固定有胶体金标记的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌O157:H7、肠致病大肠杆菌和肠毒素大肠杆菌K88的特异性适配体...

【技术特征摘要】
1.一种基于核酸适配体的多种致病菌检测试纸条，其特征在于，包括样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)，所述固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)上设有4条检测线(5)和1条质控线(6)，所述样品垫(1)、胶体金结合垫(2)、固定有链霉亲和素的硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)依次粘贴在塑料衬板(7)上；其中，4条检测线分别为金黄色葡萄球菌检测线、大肠埃希菌O157:H7检测线、肠致病大肠杆菌检测线和肠毒素大肠杆菌K88检测线；所述胶体金结合垫(2)固定有胶体金标记的金黄色葡萄球菌、大肠...

【专利技术属性】
技术研发人员：栾云霞，陆安祥，王纪华，田晓琴，付海龙，
申请(专利权)人：北京农业质量标准与检测技术研究中心，
类型：新型
国别省市：北京,11