携带融合蛋白基因的重组腺病毒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及携带融合蛋白基因的重组腺病毒及其制备方法和应用。具体而言，本发明专利技术涉及一种携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白的编码序列的重组腺病毒、其制备及应用，该腺病毒的基因组缺失E1区和E3区，并且在E1和/或E3区位置插入了所述融合蛋白编码序列的表达盒，该表达盒依次包括：启动子序列、所述融合蛋白的编码序列以及加尾信号序列，其中所述热休克蛋白选自：Hsp70或Hsp70L1。本发明专利技术的重组腺病毒可高效介导基因(尤其是抗肿瘤)转移及表达，具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
携带融合蛋白基因的重组腺病毒及其制备方法和应用
本专利技术属生物
，涉及一种人癌胚抗原576-669(CEA576-669)和热休克蛋白70样分子1(hsp70L1)融合基因的重组腺病毒及其制备方法和应用。
技术介绍
热休克蛋白(Heatshockprotein，HSP)是一类在生物进化中高度保守、广泛存在于原核及真核生物中的一类蛋白质，在细胞受到应激后表达增加。HSP在细胞内作为伴侣分子，参与抗原的加工和形成MHC-抗原肽复合物。近年来，HSP家族明显的佐剂样作用引起了国内外学术界的关注。研究表明，HSP在细胞受到应激后，可以释放到细胞外，诱导抗原提呈细胞和T细胞成熟活化等重要的生理过程，因此与机体的抗肿瘤免疫、抗感染免疫、自身免疫性疾病等生理及病理机制密切相关，是一类重要的免疫分子(SrivastavaPK,AnnuRevImmunol.2002；20:395–425)。热休克蛋白家族按照分子量可以分为四类：Hsp90家族、Hsp70家族、HSP60家族和小分子Hsp家族，其中Hsp70家族是HSP中最保守和最主要的一类。许多研究表明，肿瘤细胞或者病毒感染细胞来源的Hsp7本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用同源重组获得的重组腺病毒制备致敏的树突状细胞的方法，所述方法包括用所述重组腺病毒体外致敏树突状细胞的步骤，其中，所述重组腺病毒携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白的编码序列，其基因组缺失E1区和E3区，并且在E1和/或E3区位置插入了所述融合蛋白编码序列的表达盒，该表达盒依次包括：启动子序列、所述融合蛋白的编码序列以及加尾信号序列，其中所述热休克蛋白是Hsp70L1，且其中所述腺病毒是pAdEasy‑1。

【技术特征摘要】
1.一种采用同源重组获得的重组腺病毒制备致敏的树突状细胞的方法，所述方法包括用所述重组腺病毒体外致敏树突状细胞的步骤，其中，所述重组腺病毒携带热休克蛋白与癌胚抗原的融合蛋白的编码序列，其基因组缺失E1区和E3区，并且在E1和/或E3区位置插入了所述融合蛋白编码序列的表达盒，该表达盒依次包括：启动子序列、所述融合蛋白的编码序列以及加尾信号序列，其中所述热休克蛋白是Hsp70L1，且其中所述腺病毒是pAdEasy-1。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述癌胚抗原选自：人癌胚抗原的全长序列或含人癌胚抗原的第576-669位的片段。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述融合蛋白的编码序列从5'至3'依次具有：癌胚抗原编码序列、任选的连接肽编码序列和热休克蛋白编码序列。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述同源重组选自：细胞内同源重组；细菌内同源重组；COS/TPC共转染同源重组；或位置特异...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘书逊，曹雪涛，江金霞，刘娟，韩超峰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海,31