表达PTA基因的重组腺病毒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种含表达三叶半夏凝集素(Pinellia Ternate Agglutinin,PTA)基因重组腺病毒表达载体：将PTA基因依次插入pcDNA3.1+、入门载体pENTR1A，再利用体外重组技术体外重组pENTR1A-PTA和腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST，得到含PTA基因的重组腺病毒表达载体。本发明专利技术提供了一种高表达含PTA基因的重组腺病毒，为将来进一步探究一些肿瘤和自身免疫性等疾病的发病机理，并为这些病的临床诊断和治疗提供一种新颖基因治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
表达PTA基因的重组腺病毒及其制备方法
本专利技术属生物医学领域，特别涉及含表达三叶半夏凝集素(PinelliaTernateAgglutinin, PTA)基因重组腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST_PTA、重组腺病毒及其PTA活性的测定。
技术介绍
三叶半夏凝集素(Pinellia ternata agglutinin, PTA)是一种从三叶半夏中分离出来具有凝血活性的三叶半夏蛋白，具有与甘露糖及其聚合物专一结合的性质，研究发现三叶半夏凝集素能和生长旺盛的肝癌细胞结合并使其凝集，对人类及动物反转录病毒(包括HIV)具有抑制作用，并在生殖和避孕方面也起到一定的作用等，成为近年来研究的热点。基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因，通过一定方式导入人体细胞，以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用，从而达到治疗疾病的目的。基因治疗为恶性肿瘤、心血管疾病、遗传病和艾滋病等严重威胁人类健康的疾病提供了治疗的可能。基因治疗中常用的载体有病毒载体和非病毒载体。病毒载体主要包括慢病毒载体、逆转录病毒载体、腺病毒载体等。腺病毒载体由于其具有宿主细胞广泛、可感染静止及分裂期细胞、繁殖本文档来自技高网...

【技术保护点】
含表达三叶半夏凝集素(Pinellia Ternate Agglutinin,PTA)基因重组腺病毒表达载体，其特征在于：将PTA基因依次插入pcDNA3.1+、入门载体pENTR1A，再利用体外重组技术体外重组pENTR1A‑PTA和腺病毒载体pAd/CMV/V5‑DEST，得到含PTA基因的重组腺病毒表达载体。

【技术特征摘要】
1.含表达三叶半夏凝集素(PinelliaTernate Agglutinin, PTA)基因重组腺病毒表达载体，其特征在于:将PTA基因依次插入pcDNA3.1+、入门载体pENTRlA，再利用体外重组技术体外重组pENTRlA-PTA和腺病毒载体pAd/CMV/V5_DEST，得到含PTA基因的重组腺病毒表达载体。2.根据权利要求1所述的含表达三叶半夏凝集素(PinelliaTernateAgglutinin, PTA)基因重组腺病毒表达载体，其特征在于:所述含PTA基因的重组腺病毒表达载体是利用通路克隆系统，使PTA基因先插入入门载体pENTRlA中，利用入门载体和腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST的同源序列，使其体外重组，得到pAd/CMV/V5-DEST_PTA重组腺病毒表达载体。3.根据权利要求2所述的含表达三叶半夏凝集...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐涛，高永，周伟，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33