一种鱿鱼活性多肽的提取方法技术

本发明专利技术提供一种鱿鱼活性多肽的提取方法包括以下步骤：预处理：将鱿鱼用蒸馏水洗净，切块；匀浆：往鱿鱼块中加入缓冲液冰浴匀浆；离心：将匀浆后的溶液进行搅拌，静置，离心取上清液；冻干：在上清液中加入鱿鱼0.3~1.2%重量份的析出剂，静置抽滤得到鱿鱼活性多肽，冻干保存。缓冲液由以下成分及重量份组成：磷酸二氢钾5~10份、氢氧化钠2~8份、氯化钠1~3份、二氢黄酮甙0.1~1份、三聚磷酸钠1~4份、聚丙烯酸甲酯0.3~1.2份。本发明专利技术以鱿鱼为原料，从鱿鱼中提取活性多肽工艺简单，提取的活性多肽含量高，提取效果优异，提取的鱿鱼活性多肽具有很好的应用价值。

Method for extracting squid active polypeptide

The invention provides a method for extracting squid active polypeptide comprises the following steps: preprocessing: squid washed with distilled water, cut into pieces; adding the buffer to homogenate: ice bath homogenate: squid block; centrifugal mixing, solution after homogenate incubation, the supernatant was centrifuged; lyophilized: add precipitationsolvent squid 0.3~1.2% weight portions in the supernatant, static filtering to get squid active polypeptide, lyophilization. The buffer comprises the following components and weight: 5~10, potassium dihydrogen phosphate 2~8, sodium hydroxide and sodium chloride 1~3 and two hydrogen flavones 0.1~1 parts, sodium tripolyphosphate 1~4, polyacrylic acid methyl ester 0.3~1.2. The present invention uses squid as raw material to extract active polypeptide from squid, the process is simple, the extracted active polypeptide is high, and the extraction effect is excellent, and the extracted squid active polypeptide has good application value.

【技术实现步骤摘要】
一种鱿鱼活性多肽的提取方法
本专利技术属于活性多肽提取领域，尤其涉及一种鱿鱼活性多肽的提取方法。
技术介绍
鱿鱼，又称句公、柔鱼或枪乌贼，是软体动物门头足纲管鱿目开眼亚目的动物。我国鱿鱼加工主要分布在浙江和山东，鱿鱼年加工量为30~40万吨，其中鱿鱼皮占加工量的8%~10%，鱿鱼皮干物质中80%左右是胶原蛋白，本专利技术以鱿鱼及其加工废弃物为原料提取鱿鱼活性多肽，制备具有抗氧化活性多肽产品，为鱿鱼加工废弃物的综合利用探索一条新途径，并且可以减少环境污染，又能够充分利用现有资源，提高企业的经济效益。现有技术提供多种活性多肽提取方法，例如，中国专利技术专利文献一种鳖甲活性多肽提取物的制备方法及应用授权公告号：CN103705907B该专利技术属于中药提取物的制备
，具体公开了一种鳖甲活性多肽提取物的制备方法及应用。本专利技术方法的具体步骤包括：鳖甲经水煎煮提取，提取液用蒸馏水稀释至相当于含鳖甲药材4-8g/100mL的浓度，分别采用微滤、多级超滤得到超滤液，减压浓缩，冷冻干燥得到分子量小于6KD的冻干粉。该专利技术采用多级膜分离方法制备鳖甲的活性多肽物质部位，经过中试试验，其工艺参数可过渡到产业化；所制备的鳖甲活性多肽提取物具有保肝作用，可以用于制备预防或治疗肝纤维化、酒精性肝损伤的药物或保健食品。现有技术采用多级膜分离方法制备鳖甲的活性多肽物质部位，提取到的鳖甲活性多肽提取物具有保肝作用，但提取时间长，提取率有待提高。
技术实现思路
本专利技术针对上述技术问题提供一种鱿鱼活性多肽的提取方法，多肽活性高，提取工艺简单且活性多肽提取率显著提高。本专利技术针对上述技术问题所采取的方案为：一种鱿鱼活性多肽的提取方法，步骤如下：1）预处理：将鱿鱼用蒸馏水洗净，切块；用蒸馏水去除鱿鱼中杂质，避免杂质对提取活性多肽的影响，切块为后续匀浆做工艺准备。2）匀浆：往鱿鱼块中加入缓冲液冰浴匀浆；加入缓冲液稳定pH值，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，有利于活性多肽溶出和提取。3）离心：将匀浆后的溶液进行搅拌，静置，离心取上清液；搅拌让匀浆液充分混合，利于多肽的提取，采用离心机取得上清液，便于后续的抽滤及提高活性多肽的提取率。4）冻干：在上清液中加入鱿鱼0.3~1.2%重量份的析出剂，静置抽滤得到鱿鱼活性多肽，冻干保存。加入析出剂提高鱿鱼中的活性多肽析出，效果明显优异，由于活性多肽对环境的要求较高，故采用冻干保存方式。缓冲液液pH为6.5~8，浓度为45~55mol/L，在此范围的pH值和浓度缓冲液与鱿鱼反应效果优异。缓冲液由以下成分及重量份组成：磷酸二氢钾5~10份、氢氧化钠2~8份、氯化钠1~3份、二氢黄酮甙0.1~1份、三聚磷酸钠1~4份、聚丙烯酸甲酯0.3~1.2份。维持pH的平衡，起到溶解保护作用，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，活性多肽分布均匀，有利于活性多肽溶出和提取。析出剂由以下成分及重量份组成：硫酸铵3~5份、氯化钠1~3份、硝酸钾0.5~1份、纳他霉素0.2~0.6份和γ-亚麻酸1~3份。在短时间有效的使活性多肽析出并且不影响多肽的活性，提高活性多肽的提取率，使鱿鱼活性多肽提取时间缩短，保证较高的提取率。步骤3中搅拌时间为10~15min,在2~10℃下静置2~3小时，置入离心机进行离心，离心转速9000~10000r/min,离心10~20min。通过搅拌使缓冲液与鱿鱼块的匀浆充分混合让活性多肽分布均匀，使用离心机取得上清液，除去无用的杂质。蒸馏水中添加有二甲基甲酰胺2~3重量份和β-环糊精0.1~0.7重量份，可有效的去除鱿鱼表面杂质，使杂质溶解并清洗干净，避免提取过程中杂质对提取到的活性多肽和提取率的影响。步骤2中缓冲液加入量按体积是鱿鱼块的2~3倍，保证缓冲液充分与鱿鱼块混合，而缓冲液起到维持pH的平衡，溶解保护作用，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，活性多肽分布均匀，有利于活性多肽溶出和提取。步骤4中抽滤使用1~3层滤纸和1~2层的200~400目滤布抽滤，避免在预处理清洗后提取过程中有杂质参杂进提取液，进一步滤除上清液中杂质，保证提取的活性多肽纯度高且提取率也高。有益效果：本专利技术在预处理中使用的蒸馏水中添加有二甲基甲酰胺和β-环糊精，可有效的去除鱿鱼表面杂质，使杂质溶解并清洗干净，避免提取过程中杂质对提取到的活性多肽和提取率的影响，在匀浆过程中使用的缓冲液可维持pH的平衡，起到溶解保护作用，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，活性多肽分布均匀，有利于活性多肽溶出和提取，在上清液中添加析出剂可在短时间有效的使活性多肽析出并且不影响多肽的活性，提高活性多肽的提取率，使鱿鱼活性多肽提取时间缩短，保证较高的提取率。本专利技术以鱿鱼为原料，从鱿鱼中提取活性多肽工艺简单，提取的活性多肽含量高，提取效果优异，提取的鱿鱼活性多肽具有很好的应用价值。具体实施例以下结合具体实施例作进一步详细描述：实施例1：一种鱿鱼活性多肽的提取方法，步骤如下：1）预处理：将鱿鱼用蒸馏水洗净，切块；用蒸馏水去除鱿鱼中杂质，避免杂质对提取活性多肽的影响，切块为后续匀浆做工艺准备。2）匀浆：往鱿鱼块中加入缓冲液冰浴匀浆；加入缓冲液稳定pH值，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，有利于活性多肽溶出和提取。3）离心：将匀浆后的溶液进行搅拌，静置，离心取上清液；搅拌让匀浆液充分混合，利于多肽的提取，采用离心机取得上清液，便于后续的抽滤及提高活性多肽的提取率。4）冻干：在上清液中加入鱿鱼0.3~1.2%重量份的析出剂，静置抽滤得到鱿鱼活性多肽，冻干保存。加入析出剂提高鱿鱼中的活性多肽析出，效果明显优异，由于活性多肽对环境的要求较高，故采用冻干保存方式。缓冲液液pH为6.5~8，浓度为45~55mol/L，在此范围的pH值和浓度缓冲液与鱿鱼反应效果优异。缓冲液由以下成分及重量份组成：磷酸二氢钾5~10份、氢氧化钠2~8份、氯化钠1~3份、二氢黄酮甙0.1~1份、三聚磷酸钠1~4份、聚丙烯酸甲酯0.3~1.2份。起到维持pH的平衡，溶解保护作用，提高鱿鱼的持水能力，便于匀浆，调节离子强度，避免引起细胞渗透压改变，活性多肽分布均匀，有利于活性多肽溶出和提取。析出剂由以下成分及重量份组成：硫酸铵3~5份、氯化钠1~3份、硝酸钾0.5~1份、纳他霉素0.2~0.6份和γ-亚麻酸1~3份。在短时间有效的使活性多肽析出并且不影响多肽的活性，提高活性多肽的提取率，使鱿鱼活性多肽提取时间缩短，保证较高的提取率。步骤3中搅拌时间为10~15min,在2~10℃下静置2~3小时，置入离心机进行离心，离心转速9000~10000r/min,离心10~20min。通过搅拌使缓冲液与鱿鱼块的匀浆充分混合让活性多肽分布均匀，使用离心机取得上清液，除去无用的杂质。蒸馏水中添加有二甲基甲酰胺2~3重量份和β-环糊精0.1~0.7重量份，可有效的去除鱿鱼表面杂质，使杂质溶解并清洗干净，避免提取过程中杂质对提取到的活性多肽和提取率的影响。步骤2中缓冲液加入量按体积是鱿鱼块的2~3倍，保证缓冲液充分与鱿鱼块混合，而缓冲液起到维持pH的平衡本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱿鱼活性多肽的提取方法，其特征在于以下步骤：1）预处理：将鱿鱼用蒸馏水洗净，切块；2）匀浆：往鱿鱼块中加入缓冲液冰浴匀浆；3）离心：将匀浆后的溶液进行搅拌，静置，离心取上清液；4）冻干：在上清液中加入鱿鱼0.3~1.2%重量份的析出剂，静置抽滤得到鱿鱼活性多肽，冻干保存。

【技术特征摘要】
1.一种鱿鱼活性多肽的提取方法，其特征在于以下步骤：1）预处理：将鱿鱼用蒸馏水洗净，切块；2）匀浆：往鱿鱼块中加入缓冲液冰浴匀浆；3）离心：将匀浆后的溶液进行搅拌，静置，离心取上清液；4）冻干：在上清液中加入鱿鱼0.3~1.2%重量份的析出剂，静置抽滤得到鱿鱼活性多肽，冻干保存。2.根据权利要求1所述的一种鱿鱼活性多肽的提取方法，其特征在于：所述缓冲液液pH为6.5~8，浓度为45~55mol/L。3.根据权利要求1所述的一种鱿鱼活性多肽的提取方法，其特征在于：所述缓冲液由以下成分及重量份组成：磷酸二氢钾5~10份、氢氧化钠2~8份、氯化钠1~3份、二氢黄酮甙0.1~1份、三聚磷酸钠1~4份、聚丙烯酸甲酯0.3~1.2份。4.根据权利要求1所述的一种鱿鱼活性多肽的提取方法，其特征在于：所述析出剂由以下成分...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭健，龚久炎，宋文东，王亚宁，蔡璐，纪丽丽，应知伟，刘新旗，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33