一种从酒糟中提取多肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种从酒糟中提取多肽的方法。本发明专利技术提取方法包括以下步骤：(1)将酒糟进行脱脂；(2)提取水溶性蛋白；(3)采用由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌进行发酵；(4)将经步骤(2)所提取的水溶性蛋白和经步骤(3)处理的酒糟在蛋白酶下酶解。本发明专利技术从酒糟提取多肽的方法中，于蛋白酶酶解之前采用里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌的混合菌进行发酵，可将酒糟中的木质纤维和半纤维等降解为多糖等小分子，从而避免了纤维素和半纤维对蛋白质的束缚，增大蛋白质与蛋白酶的充分接触，提高蛋白质的酶解效果，保证了得率。

Method for extracting polypeptide from distiller's grains

The invention discloses a method for extracting polypeptides from distillers grains. The method comprises the following steps: (1) the lees were defatted; (2) extraction of water soluble protein; (3) fermentation by mixed bacteria composed of Trichoderma reesei, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis, Pasteur Bacillus licheniformis; (4) the steps (2) the extraction of water soluble protein (3) and the steps of processing protease hydrolysis in lees. The present invention from the lees of peptides extraction method, before enzymatic hydrolysis by Trichoderma reesei mixed bacteria, bacillus, Bacillus subtilis, PAP Bacillus licheniformis fermentation, the lees of wood fiber and hemicellulose degraded to some polysaccharides and other small molecules, so as to avoid the shackles of cellulose and half of the fiber protein, protein and protease increase full contact, improve the protein enzymolysis effect and ensure the recovery rate.

【技术实现步骤摘要】
一种从酒糟中提取多肽的方法
本专利技术涉及多肽提取的
，具体而言，涉及一种从酒糟中提取多肽的方法。
技术介绍
酒糟，又名红糟、酒醅糟、粕等等，是米、麦、高梁等酿酒后剩余的残渣。酒糟中含有丰富的蛋白质，是一种很高的蛋白质的来源。长期以来，大多数厂家主要是将湿糟作为粗饲料直接低价出售，其收益甚微；有少数厂家则是将啤酒糟直接排放，不仅造成严重的环境污染，还导致资源的浪费。因此开发综合利用啤酒糟成为研究人员的重要任务。多肽是是氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。人体很多活性物质都是以肽的形式存在的。肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域，其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能，激活体内有关酶系，促进中间代谢膜的通透性，或通过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成，最终产生特定的生理效应。肽是涉及人体内多种细胞功能的重要物质。肽可以合成细胞，并调节细胞的功能活动。肽在人体作为神经递质，传递信息。肽可在人体作为运输工具，将人体所食的各种营养物质与各种维生素、生物素、钙及对人体有益的微量元素输送到人体各细胞、器官和组织。肽是人体重要的生理调节物，它可全面调节人体生理功能，增强和发挥人体生理活性，它具有重要的生物学功能。肽对人的细胞活性、功能活动、生命存在太重要了。但现代人因各种因素使人体中的肽流失、损失，合成肽的能力大大减弱，因此现代人体缺乏肽，必须补充人工合成肽，补肽就是补活性，补肽就是补活力，补肽就是补生命。从粕中提取多肽，在近年来得出现了一些报道。例如中国专利CN101736065A一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法。该方法是将湿啤酒糟进行干燥、粉碎和过筛，得到啤酒糟；加入抽提剂，室温下搅拌，过滤去渣，离心，得到蛋自提取液；调节pH4.0～5.0进行沉淀，去上清液，真空冷冻干燥，得到粗多肽；在啤酒糟粗蛋白中加入磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液，调节pH值至6.5～8.5；加入Alcalase碱性蛋白酶，加热至45～65℃，在搅拌条件下水解1～5h；水解完毕之后，于沸水浴灭酶，离心；取离心后的上清液用凝胶柱分离，分别收集各峰后浓缩，冷冻干燥，得到活性多肤。本法未引入有害物质，产品取自天然，来源广泛，使所得天然活性物质经体外试验表明具有明显的降血糖活性。尽管如此，但以上现有技术中从油粕中制取多肽的得率都较低。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术在于提供一种从酒糟提取多肽的方法，该方法所提取的多肽具有较高的得率。一种从酒糟中提取多肽的方法，包括以下步骤：(1)将酒糟进行脱脂；(2)将经步骤(1)处理的酒糟中提取水溶性蛋白；(3)将经步骤(2)处理所残留的酒糟采用由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌进行发酵；(4)将经步骤(2)所提取的水溶性蛋白和经步骤(3)处理残留的酒糟在在蛋白酶下酶解。进一步地，步骤(3)中所述里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌以菌液的形式加入，里氏木霉菌液、解淀粉芽孢杆菌液、枯草芽孢杆菌液、巴氏地衣芽孢杆菌液体积之比为1：0.5～0.8：：2～3：：1～2，所述里氏木霉菌菌液的活菌数为3×1010～5×1010cfu/ml，解淀粉芽孢杆菌的活菌数为2×1010～4×1010cfu/ml，枯草芽孢杆菌液的活菌数为4×1010～6×1010cfu/ml，巴氏地衣芽孢杆菌液的活菌数为3×1010～5×1010cfu/ml。进一步地，步骤(3)中所述发酵的温度为45～55℃，发酵的时间为36～72h。进一步地，步骤(3)中所述发酵的pH为4.5～5.5。进一步地，步骤(3)中所述发酵在有氧条件下进行，氧气通入量为0.3～0.6vvm。进一步地，步骤(2)中所述提取水溶性蛋白的包括：将酒糟采用碱液溶解于醇水溶液以沉降出固体，得到滤液；将所述滤液采用400～600目滤膜进行浓缩，再使用400～600目滤膜进行过滤，得到固体组分；将固体组分溶于水，而后离心。进一步地，所述醇水溶液的质量分数为50～80wt％。进一步地，所述碱液的加入量为以pH为8～13的用量。进一步地，所述过滤在加入酸液的条件下进行，所述酸液的加入量为使pH为2～6的用量。进一步地，所述酶解在碱性条件下进行。本专利技术从酒糟提取多肽的方法中，于蛋白酶酶解之前采用里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌的混合菌进行发酵，可将酒糟中的木质纤维和半纤维等降解为多糖等小分子，从而避免了纤维素和半纤维对蛋白质的束缚，增大蛋白质与蛋白酶的充分接触，提高蛋白质的酶解效果，保证了得率。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面合实施例来进一步说明本专利技术的技术方案。如本文所用，术语：“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者地，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK(K为任意数，表示倍数因子)。不可误解的是，与质量分数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。“一个”、“一种”和“所述”可交换使用并指一个或多个。“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)；另外，本文中由端点表述的范围包括该范围内所包含的所有数值(例如，1至10包括1.4、1.9、2.33、5.75、9.98等)。另外，本文中“至少一个”的表述包括一个及以上的所有数目(例如，至少2个、至少4个、至少6个、至少8个、至少10个、至少25个、至少50个、至少100个等)。本专利技术从酒糟中提取多肽的方法，包括以下步骤：(1)将酒糟进行脱脂；(2)将经步骤(1)处理的酒糟中提取水溶性蛋白；(3)将经步骤(2)处理所残留的酒糟采用由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌进行发酵；(4)将经步骤(2)所提取的水溶性蛋白和经步骤(3)处理残留的酒糟在在蛋白酶下酶解。本专利技术的上述方法所针对的酒糟可以为一切形式的酒糟，例如啤酒糟和黄酒。上述发酵所采用的菌种，系由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌。此处，这些菌种的具体亚种或菌株的类型不作限定。对混合菌的加入形式不加限定，例如可以使用经培养后所得菌液添加，也可以将菌株在添加氮源等营养成分的条件下直接接种到该待发酵的原料中。上述菌液可采用常规的种子培养基及培养条件方法来获得。可列举出一种种子培养基的成分，即每升含木糖30～50克，酵母粉5～10克，玉米浆干粉5～15克，磷酸二氢钾4克，乙酸钠2～6克，氯化钾1～2克，硫酸镁0.2克，余量为水，pH为6～7，于115℃灭菌20分钟。应当知道的是，菌液加到待发酵的原料后，可加入发酵基，发酵基的成分可类似于上述培养基，发酵基所含氮源为酵母粉5～20克、蛋白陈5～20克、玉米浆干粉5～20克、大豆肤5～20克、大豆蛋白陈5～20克五种氮源中的至少一种，还可辅助地含有初糖量不少于500克/升，磷酸二氢钾4克，乙酸钠1～6克，氯化钾2克，硫酸镁0.2克，其余为水，pH为6～70，于115℃灭菌20分钟。类推本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从酒糟中提取多肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将酒糟进行脱脂；(2)将经步骤(1)处理的酒糟中提取水溶性蛋白；(3)将经步骤(2)处理所残留的酒糟采用由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌进行发酵；(4)将经步骤(2)所提取的水溶性蛋白和经步骤(3)处理的酒糟在在蛋白酶下酶解。

【技术特征摘要】
1.一种从酒糟中提取多肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将酒糟进行脱脂；(2)将经步骤(1)处理的酒糟中提取水溶性蛋白；(3)将经步骤(2)处理所残留的酒糟采用由里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌所组成的混合菌进行发酵；(4)将经步骤(2)所提取的水溶性蛋白和经步骤(3)处理的酒糟在在蛋白酶下酶解。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述里氏木霉菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巴氏地衣芽孢杆菌以菌液的形式加入，里氏木霉菌液、解淀粉芽孢杆菌液、枯草芽孢杆菌液、巴氏地衣芽孢杆菌液体积之比为1：0.5～0.8：2～3：1～2，所述里氏木霉菌菌液的活菌数为3×1010～5×1010cfu/ml，解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为2×1010～4×1010cfu/ml，枯草芽孢杆菌液的活菌数为4×1010～6×1010cfu/ml，巴氏地衣芽孢杆菌液的活菌数为3×1010～5×1010cfu/ml。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭鹏，王轶，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42