布雷菲德菌素A的4-位呋咱NO供体型衍生物的制备方法及用途技术

本发明专利技术涉及药物化学领域，涉及布雷菲德菌素A的4‑位进行修饰的衍生物。具体涉及一类具有抗肿瘤活性4‑位呋咱NO供体取代布雷菲德菌素A衍生物和其在制备抗肿瘤药物中的应用。所述的布雷菲德菌素A衍生物如通式I或II所示，其中，m、n分别为1‑8的整数。

Preparation and use of brefeldin A 4 bit furazan derivatives of NO donor type

The present invention relates to the field of pharmaceutical chemistry, relates to brefeldin A 4 bit modified derivatives. In particular to a class with antitumor activity 4 a furazan NO donor substituted brefeldin A derivatives and their application in preparing antitumor drugs. The Buleifeide bacteria A derivatives such as formula I or II shows, among them, m and N are respectively 1 integer 8.

【技术实现步骤摘要】
布雷菲德菌素A的4-位呋咱NO供体型衍生物的制备方法及用途
本专利技术涉及药物化学领域，涉及布雷菲德菌素A的4位修饰衍生物。具体涉及4-位呋咱类NO供体取代的布雷菲德菌素A衍生物的制备方法及在制备抗肿瘤药物中的用途。
技术介绍
布雷菲德菌素A(brefeldinA)是大环内酯抗生素，具有广泛的生物学活性，包括抗真菌、抗病毒和抗肿瘤等。美国国家肿瘤研究院(NCI)的检测数据显示，brefeldinA对60种肿瘤细胞系的平均GI50为40nM，其作用机制与高尔基体的分解有密切联系。高尔基体可逆的分解导致蛋白质转运的中断，进而导致高尔基体蛋白质重新分布进入内质网。本专利技术以brefeldinA为先导化合物，选择呋咱氮氧化物作为NO供体，通过连接基团连接到brefeldinA的4位上，设计并合成了通式为Ⅰ和Ⅱ的NO供体型brefeldinA衍生物。
技术实现思路
专利技术要解决的技术问题是寻找抗肿瘤活性好的NO供体型brefeldinA衍生物，并进一步提供一种包含该衍生物的用于治疗肿瘤及其它疾病或病症的药物组合物。为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：通式Ⅰ或Ⅱ所示呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐：其中，m、n分别为1-8的整数。优选地，m、n分别为1-4的整数。更优选地，m、n分别为2或3。本专利技术优选如下化合物：本专利技术通式Ⅰ或Ⅱ的衍生物可用下列方法制备得到：将苯硫酚(2)与氯乙酸在碱性条件下反应得苯硫乙酸(3)，然后经30％H2O2氧化生成苯磺酰乙酸(4)。化合物4在发烟HNO3存在下加热环合成3,4-二苯磺酰基呋咱氮氧化物(5)。化合物5的4-位苯磺酰基被乙二醇或丙二醇取代生成单苯磺酰基呋咱氮氧化物类NO供体化合物6a、6b，化合物6a或6b再与丁二酸酐、戊二酸酐或邻苯二甲酸酐经DMAP，三乙胺催化反应得到NO供体7a-f。将布雷菲德菌素A的4,7-位羟基用TBS保护得化合物8，化合物8用TBAF脱去4-位TBS保护基得中间体9，中间体9与呋咱NO供体7a-f在EDCI/DMAP条件下缩合得化合物10a-f，化合物10a-f用TBAF脱去7-位TBS保护基得目标化合物11a-f，柱层析石油醚：乙酸乙酯(v/v)为1:1至10:1得到单体化合物。实验设备与试剂仪器超净工作台(苏净集团安泰公司)恒温培养箱(ThermoelectronCorporation)酶标仪(BIO-RAD公司)倒置生物显微镜(重庆光学仪器厂)试剂细胞培养基RPMI-1640、F12、MEM、DMEM(高糖)(GIBCO公司)胎牛血清(杭州四季清有限公司)四甲基偶氮唑蓝(MTT)(Sigma公司产品)DMSO(Sigma公司)细胞株人肝癌细胞株Bel-7402和HepG-2人结肠癌细胞株HT-29、人前列腺癌细胞株PC-3实验方法细胞抑制活性实验方法细胞在37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱中常规培养。培养液为含10％热灭活胎牛血清，青霉素100U/mL和链霉素100U/mL的RPMI1640细胞培养基。48h更换培养液，细胞贴壁后，用0.25％胰蛋白酶消化传代。实验用细胞均处于对数生长期，台盼蓝拒染法表明细胞活力>95％。取处于对数生长期状态良好的细胞一瓶，加入消化液(0.125％胰蛋白酶+0.01％EDTA)消化，计数2～4×104cell/mL，制成细胞悬液接种于96孔板上，180μL/孔，置恒温CO2培养箱中培养24小时。换液，加入受试药物，20μL/孔，培养72小时。将MTT加入96孔板中，20μL/孔，培养箱中孵育4小时。吸去上清液，加DMSO，150μL/孔，平板摇床上震荡10分钟。用酶联免疫监测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光度，分别计算各浓度下的细胞抑制率。抑制率计算方法：药敏孔相对OD值＝药敏孔绝对OD值﹣空白对照孔绝对OD值实验结果表1实施例对3种人类癌细胞株抗增殖活性的IC50值(nM)样品PC-3HT-29HepG-2Bel-7402实施例1116±6232±8514±1314±1实施例246±4282±22407±1747±2实施例3252±9788±26732±3132±1实施例495±65741±3721828±9328±3实施例5108±5401±19815±429±1实施例6153±11858±54616±3912±1药理试验证明，本专利技术的部分布雷菲德菌素A衍生物具有更好的抗肿瘤作用，可以用于进一步制备抗肿瘤药物。实施例1将60gNaOH与480mLH2O配成的溶液倒入反应瓶中，取苯硫酚(75mL,0.63mol)，而后加入氯乙酸(78g,0.825mol)，反应液中有大量白色沉淀析出。加入6NHCl，得白色固体苯硫乙酸(3)。将3(20g,0.12mol)溶于90mL冰乙酸中，加入24.3mL30％H2O2，室温搅拌。待反应完全，加入发烟HNO348mL。升温反应，4h后，有白色针状晶体析出，过滤，干燥得3,4-二苯磺酰基呋咱氮氧化物(5)。将乙二醇(0.56mL,10mmol)和5(1g,2.7mmol)溶于10mLTHF中，滴入30％NaOH水溶液(0.5mL,3mmol)，反应2h。倾入20mLH2O中，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，有机层合并后加饱和食盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液浓缩、重结晶，得白色固体化合物6a。将化合物6a(202mg,0.71mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入丁二酸酐(111mg,1.11mmol)。依次加入催化量的DMAP，三乙胺0.3mL，室温搅拌1h。待反应结束后，无水硫酸钠干燥、过滤、滤液浓缩，硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)，得到白色粉末状固体7a。将布雷菲德菌素A(150.9mg,0.54mmol)溶于5mL无水二氯甲烷中，加入TBSOTf(310μL,1.35mmol)和2,6-二甲基吡啶(189μL,1.62mmol)室温搅拌2h,用二氯甲烷(3×5mL)萃取，有机层合并后加饱和食盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液浓缩，硅胶柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝100:1)，得化合物8。将化合物8溶于5mL无水四氢呋喃中，加入TBAF(290μL,0.29mmol),冰浴下搅拌25h,用乙酸乙酯(3×5mL)萃取，有机层合并后加饱和食盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液浓缩，硅胶柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝10:1)，得化合物9。将化合物9溶于10mL无水二氯甲烷中，加入7a(32.8mg,0.08mmol)，EDCI(29.4mg,0.15mmol)，催化量的DMAP，室温搅拌12h。TLC监测反应，待反应完全或不继续进行时，停止反应。有机相用饱和食盐水洗，再用无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩，硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)，得到化合物10a。将化合物10a溶于2mL无水四氢呋喃中，加入TBAF(193μL,0.193mmol),室温搅拌15h,用乙酸乙酯(3×2mL)萃取，有机层合并后加饱和食盐水洗一次，用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液浓缩，硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)，得白色粉末状固体11a，产率21.6％:mp.148-151℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式Ⅰ或Ⅱ所示的呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.通式Ⅰ或Ⅱ所示的呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐：其中，m、n分别为1-8的整数。2.权利要求1所述的通式Ⅰ或Ⅱ所示的呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐，其中，m、n分别为1-4的整数。3.权利要求1或2所述的通式Ⅰ或Ⅱ所述的呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐：其中，m、n分别为2或3。4.权利要求1-3任何一项所述的呋咱NO供体型布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐，选自：5.一种药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1-4任何一项所述的衍生物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。6.如权利要求4所述的布雷菲德菌素A衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，将苯硫酚(2)与氯乙酸在碱性条件下反应得苯硫乙酸(3)，然后经30％H2O2氧化生成苯磺酰乙酸(4)，化合物4在发烟HNO3存在下加热环合成3...

【专利技术属性】
技术研发人员：李达翃，华会明，潘华奇，李占林，田康涛，韩通，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21