二肽卡斯帕酶抑制剂及其用途制造技术

＊＊＊ （Ⅰ） 本发明专利技术涉及通式（Ⅰ）表示的新的二肽：其中Ｒ↓［１］－Ｒ↓［２］和ＡＡ在文中定义。本发明专利技术涉及发现的式（Ⅰ）化合物是卡斯帕酶和编程性细胞死亡的有效抑制剂。因此，本发明专利技术的抑制剂可以延缓或阻断细胞、组织或整个器官发生损失的多种临床病症中的细胞死亡。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
专利
本专利技术属于药物化学领域。具体地讲，本专利技术涉及作为卡斯帕酶(caspase,cysteine aspartase)有效抑制剂的二肽。本专利技术还涉及这些二肽降低或治疗编程性细胞死亡和/或降低白细胞介素1-β产生的用途。
技术介绍
机体消除不需要的细胞是通过一种称为编程性细胞死亡或细胞程序性死亡的过程(regulated cell death,programmed cell death或apoptosis)。此细胞死亡作为动物发育及组织内稳态和老化的正常方面发生(Glucksmann.A.,Bio1.Rev.Cambridge Philos.Soc.2659-86(1951)；G1ucksmann,A.,Archives de Biologie76419-437(1965)；E1lis等，Dev.112591-603(1991)；Vaux等，细胞(Cell)76777-779(1994))。编程性细胞死亡调节细胞数目、加速形态形成、除去有害物或非正常细胞并消除已完成了其功能的细胞。此外，编程性细胞死亡应多种生理应激状态而发生，例如低氧症或局部缺血(PCT公开申请WO96/20721)。经历编程性细胞死亡的细胞发生了一些形态变化，包括细胞浆和细胞核膜出现水泡，细胞皱缩(核质和细胞质凝缩)，细胞器重新定位和收缩，染色质凝缩及编程性死亡体的产生(含细胞内物质的膜包封颗粒)(Orrenius,S.,J.Internal Medicine 237529-536(1995))。编程性细胞死亡是通过细胞自杀的内部机制达到的(Wyllie,A.H.,细胞死亡中的生物和病理学，Bowen和Lockshin编辑，Chapmanand Hall(1981),pp.9-34)。由于产生内部或外部信号结果细胞激活其内部编码的自杀程序。该自杀程序通过激活仔细调节的基因程序进行(Wylie等，Int.Rev.Cyt.68251(1980)；El1is等，Ann.Rev.Cell Bio.7663(1991))。编程性死亡细胞或细胞体通常在溶解前由相邻细胞或巨噬细胞识别和清除。由于此清除机制，尽管清除了大量细胞却不引起炎症(Orrenius,S.,J.Internal Medicine237529-536(1995))。哺乳动物白细胞介素-1β(IL-1β)在多种病理过程中扮演了重要角色，包括急性和慢性炎症以及自身免疫性疾病(Oppenheim,J.H.等，Immunology Today,7,45-56(1986))。IL-1是作为与细胞有关的前体多肽合成的(前-IL-1)，其不能结合IL-1受体且没有生物活性(Mosley等，J.Bio1.Chem.2622941-2944(1987))。通过抑制前体IL-1β向成熟IL-1β的转化，可以抑制白细胞介素-1的活性。白细胞介素-1β转化酶(ICE)是负责激活白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白酶(Thornberry,N.A.等，Nature 356768(1992)；Yuan,J.等，Cell 75641(1993))。ICE是底物特异性的半胱氨酸蛋白酶，该酶将无活性的前白细胞介素-1分解而产生成熟的IL-1。编码ICE和CPP32的基因是哺乳动物ICE/Ced-3基因族的成员，其目前至少包括十二个成员ICE,CPP32/Yama/Apopain.mICE2,ICE4,ICH1,TX/ICH-2,MCH2,MCH3,MCH4,FLICE/MACH/MCH5,ICE-LAP6和ICErelⅢ。此族半胱氨酸蛋白酶的蛋白水解活性似乎对介导细胞死亡是关键的，其活化位点(半胱氨酸残基)对ICE介导的编程性细胞死亡是必需的(Miura等，Cell 75653-660(1993))。最近将此基因族命名为卡斯帕酶(caspases)(Alnernri,E.S.等，Cell,87,171(1996)和Thornberry,N.A.等，J.Biol.Chem.272，17907-17911(1997))并按照其已知功能将其分为三组。表Ⅰ总结了这些已知卡斯帕酶。表Ⅰ<tables id="table1" num="001"><table>Enzyme*组Ⅰ炎症的递质卡斯帕酶-1(ICE)卡斯帕酶-4(ICErel-Ⅱ，TX，ICH-2)卡斯帕酶-5(ICErel-Ⅲ，TY)组Ⅱ编程性细胞死亡的效应子卡斯帕酶-2(ICH-1，mNEDD2)卡斯帕酶-3(apopain，CPP-32，YAMA)卡斯帕酶-7(Mch-3，ICE-LAP3，CMH-1)组Ⅲ编程性细胞死亡的激活物卡斯帕酶-6(Mch2)卡斯帕酶-8(MACH，FLICE，Mch5)卡斯帕酶-9(ICE-LAP6，Mch6)卡斯帕酶-10</table></tables>IL-1还是参与介导大量生物反应的细胞因子，包括炎症、脓毒性休克、伤口愈合、血细胞生成和某些白血病的发展(Dinarello,C.A.,Blood 771627-1652(1991)；diGiovine等，lmmunology Today 1113(1990))。根据卡斯帕酶的肽底物结构已制备了多种有效的卡斯帕酶抑制剂。但是，与其体外活性比较，还没有报告任何在编程性细胞死亡的全细胞模型中具有良好效果的抑制剂(IC50＜1M)(Thomberry,N.A.Chem.Bio1.5R97-103(1998))。因此，需要细胞死亡抑制剂，其在编程性细胞死亡的全细胞模型有效并在编程性细胞死亡的动物模型中具有活性。因此，这些抑制剂可以用作治疗剂，以治疗编程性细胞死亡和IL-1的细胞因子活性起作用的疾病。WO 93/05071公开了下式的肽ICE抑制剂Z-Q2-Asp-Q1其中Z是N末端保护基；Q2是0至4个氨基酸，使Q2-Asp序列相应于序列Ala-Tyr-Val-His-Asp的至少某个部分；Q1包括负电性离去基团。二肽的实例为Boc-His-Asp-CH2F，Boc-Tyr-Asp-CH2F，Boc-Phe-Asp-CH2F，Ac-His-Asp-CH2F，Ac-Tyr-Asp-CH2F，Ac-Phe-Asp-CH2F，Cbz-His-Asp-CH2F，Cbz-Tyr-Asp-CH2F及Cbz-Phe-Asp-CH2F。WO 96/03982公开了作为ICE抑制剂的下式的天门冬氨酸类似物 其中R是H或烷基；R3是离去基团如卤素；R1是杂芳基-CO或氨基酸残基。美国专利5,585,357公开了作为ICE抑制剂的下式的肽酮 其中n是0-2；每个AA独立地是L-缬氨酸或L-丙氨酸；R1选自N-苄氧羰基和其它基团组成的基团；R8、R9、R10彼此独立地是氢原子、低级烷基和其它基团。Revesz等(Tetrahedron Lett.35,9693-9696,1994)报告了三肽乙基酯的制备 其是相应酸的前药，该酸是有效的ICE抑制剂。本专利技术涉及式Ⅰ表示的这些化合物是有效的卡斯帕酶抑制剂的发现。本专利技术还涉及本专利技术的二肽降低、防止或治疗其中编程性细胞死亡是病因或后果的疾病的用途。本专利技术用途的实例包括在病灶局部缺血和脑局部缺血后保护本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式Ⅰ的化合物或其药用盐或前药：＊＊＊ Ⅰ其中：Ｒ↓［１］是Ｎ－末端保护基；ＡＡ是非天然氨基酸的残基或－氨基酸，Ｒ↓［２］是选择性取代的烷基或Ｈ。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡遂雄，J德鲁，王炎，E韦伯，
申请(专利权)人：西托维亚公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]